厄貝沙坦和羅格列酮對(duì)胰島素抵抗SD大鼠脂蛋白脂酶的影響

諸葛銘寧 蔡玉琴 斯重陽 馬淑平

高血壓和胰島素抵抗(IR)密切相關(guān)［1］，脂蛋白脂酶(LPL)是調(diào)節(jié)體內(nèi)三酰甘油(TG)和血漿脂蛋白代謝的重要因子，其活性降低與IR關(guān)系密切。本實(shí)驗(yàn)用SD大鼠經(jīng)果糖飼料喂養(yǎng)造成IR后，分別給予厄貝沙坦與羅格列酮，比較二種藥物對(duì)其血壓和血清LPL含量的影響。

1 材料與方法

1．1 動(dòng)物來源與分組 由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物室提供6周齡雄性SD大鼠30只，食物中能量的70%由果糖提供，25%由蛋白質(zhì)提供，5%由脂肪提供，喂養(yǎng)4周造成IR。之后將大鼠隨機(jī)分為果糖喂養(yǎng)組(FG組)、厄貝沙坦治療組(IFG組)和羅格列酮治療組(RFG組)，每組10只。IFG組于果糖喂養(yǎng)同時(shí)給予厄貝沙坦片(賽諾菲公司產(chǎn)品)，按3 mg·kg－1·d－1溶于飲水中灌胃;RFG組于果糖喂養(yǎng)同時(shí)給予羅格列酮片(葛蘭素史克公司產(chǎn)品)，按50 mg·kg－1·d－1溶于飲水中灌胃。8周后宰殺動(dòng)物，采血并觀察結(jié)果。

1．2 實(shí)驗(yàn)方法 試驗(yàn)期間，每周二8∶00～10∶00將30只大鼠在38℃箱中預(yù)熱10 min后，用尾袖法測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓，主要儀器為RBP-1B型大鼠血壓計(jì)(中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所生產(chǎn))。在采血前1 d 18∶00后禁食水，于晨8∶00給予戊巴比妥鈉(30 mg/kg)麻醉，采鼠尾靜脈血 0．5 ml，不抗凝，2 000～3 000 r/min離心10 min，取血清0．1 ml，采用葡萄糖氧化酶法檢驗(yàn)空腹血糖(FPG)，試劑盒從北京中山生物技術(shù)開發(fā)公司購買(批間變異＜10%，批內(nèi)變異＜5%)，儀器為Vitalab Micro半自動(dòng)生化分析儀(荷蘭);用胰島素放射免疫分析藥盒測(cè)定血清中FINS含量;按照李光偉等［2］的方法計(jì)算胰島素敏感指數(shù)(ISI)，ISI=1n［I/(FPG × FINS)］?？崭寡迥懝檀?TC)、TG、極低密度脂蛋白(VLDL)和游離脂肪酸(FFA)的測(cè)定用酶學(xué)方法;血清LPL含量采用敏感的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫(ELISA)方法測(cè)定。

表13組大鼠SBP、FPG、FINS、ISI和TG、TC、VLDL、FFA、LPL比較n=10，±s

表13組大鼠SBP、FPG、FINS、ISI和TG、TC、VLDL、FFA、LPL比較n=10，±s

注:與 FG 組比較，*P ＜0．05，#P ＜0．01;與 IFG 組比較，△P ＜0．05，☆P ＜0．01

組別 SBP(mm Hg)FPG(mmol/L)FINS(mU/L) ISI TG(mmol/L) TC(mmol/L)VLDL(mmol/L)FFA(mmol/L) LPL(ng/ml)FG 組 148±18 5．9±0．6 71±19 －3．39±0．36 0．62±0．17 1．43 ±0．21 0．32 ±0．12 0．71 ±0．12 1．12 ±0．14 IFG 組 113 ±20# 6．1 ±0．4 60 ±17# －2．93 ±0．21# 0．52 ±0．19# 1．36 ±0．21 0．23 ±0．09* 0．50 ±0．07# 1．37 ±0．26#RFG 組 128 ±17#△ 5．7 ±0．6 43 ±13#☆ －2．48 ±0．31#☆ 0．41 ±0．24#☆ 1．13 ±0．36# 0．25 ±0．11* 0．42 ±0．11#☆ 1．53 ±0．23#☆

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 11．5統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，在進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，組間比較用單因素方差分析(ANOVA)，兩兩之間比較使用q檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

收縮壓(SBP)比較，F(xiàn)G組較其他2組高(P ＜0．01)，RFG組高于IFG組(P＜0．05);FPG在3組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05);FINS比較，F(xiàn)G組高于其他2組(P ＜0．01)，IFG 組高于RFG組(P ＜0．01);ISI比較，F(xiàn)G組低于其他2組(P ＜0．01)，IFG組低于RFG組(P ＜0．01)。TG 比較，F(xiàn)G 組高于其他2組(P＜0．01)，IFG組高于RFG組;TC比較，RFG組低于其他2組(P＜0．01)，F(xiàn)G組和IFG組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞ 0．05);VLDL比較，F(xiàn)G 組高于其他2組(P ＜0．05)，IFG組和RFG組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05);FFA比較，F(xiàn)G組高于其他2組(P ＜0．01)，IFG組高于RFG組(P ＜0．01);LPL含量比較，F(xiàn)G組低于其他2組(P＜0．01)，IFG組高于FG組(P ＜0．01)。見表1。

3 討論

IR是代謝綜合征的中心環(huán)節(jié)，高血壓又是該綜合征的主要組成部分［3］;IR、高胰島素血癥和高血壓密切相關(guān)。胰島素是脂肪代謝的重要調(diào)節(jié)因素，它的作用包括抑制激素敏感脂肪酶和增強(qiáng)LPL活性。LPL是水解循環(huán)載脂蛋白中TG分子的主要反應(yīng)酶，除了水解作用外，LPL還作為脂蛋白受體的配體，促進(jìn)細(xì)胞攝取脂蛋白顆粒。隨著高脂血癥患者的增多和對(duì)脂毒性認(rèn)識(shí)的深入，對(duì)LPL的研究得到了重視［4］。我們應(yīng)用果糖飲食復(fù)制了IR動(dòng)物模型，其血清TC、TG、VLDL和FFA均造成了不同程度增高，ISI明顯降低，血清LPL含量降低，血壓升高，并在FPG水平保持正常的情況下出現(xiàn)了高胰島素血癥。

厄貝沙坦是ARB類抗高血壓藥物，大規(guī)模臨床試驗(yàn)如LIFE，VALUE證實(shí)ARB類藥物可增強(qiáng)2型糖尿病患者的胰島素敏感性［5，6］，研究表明厄貝沙坦可抑制轉(zhuǎn)基因小鼠代謝綜合征模型的高胰島素血癥、高血壓和肥胖的發(fā)生［7］。厄貝沙坦的降脂機(jī)制可能為:(1)厄貝沙坦對(duì)AT1的阻斷促進(jìn)了脂肪細(xì)胞分化及其對(duì)FFA的攝?。?］;(2)通過抑制交感神經(jīng)興奮和增加胰腺胰島素釋放使脂肪組織LPL含量增量調(diào)節(jié)［9］。應(yīng)用厄貝沙坦處理后的IR大鼠模型血壓明顯下降，ISI升高，血清TG、LDL、FFA降低，血清LPL含量升高。

羅格列酮是噻唑烷二酮類胰島素增敏劑，其作用是與過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPAR-γ)結(jié)合并使其激活，調(diào)節(jié)與胰島素作用相關(guān)的多種基因的表達(dá);通過PPAR-γ的作用使LPL表達(dá)增加，加速TG分解，減少血清中TG水平［10］;羅格列酮還能夠增加骨骼肌對(duì)FFA和TG的攝取，降低IR動(dòng)物血糖、血漿胰島素和TC水平［11］。高血壓與胰島素敏感性密切相關(guān)，羅格列酮可降低血漿FFA的濃度，改善胰島素敏感性，降低血壓［12］。Gaikwad等［13］研究發(fā)現(xiàn)羅格列酮能降低IR大鼠血糖、血漿胰島素及TC水平，減弱血管緊張素Ⅱ的反應(yīng)。大規(guī)模的臨床試驗(yàn)PROactive證明，噻唑烷二酮類藥物有一定的降血壓作用［14］，其降壓機(jī)制可能與該類藥物影響腎素-血管緊張素調(diào)節(jié)系統(tǒng)有關(guān)。我們應(yīng)用羅格列酮干預(yù)IRSD大鼠后，ISI升高，血清LPL含量增加，血清TC、TG、VLDL和FFA降低，且有輕度降低血壓的作用。

綜上所述，厄貝沙坦和羅格列酮均有不同程度的增加胰島素敏感性、改善IR、降低血脂及血壓的作用。厄貝沙坦比羅格列酮降壓作用顯著，而羅格列酮在改善IR和脂代謝方面的作用優(yōu)于厄貝沙坦。

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