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    HPLC法測定維生素B1片含量均勻度

    2013-11-09 10:15:52廣東省韶關(guān)市食品藥品檢驗所512028劉旺培黃義純陳華龍
    首都食品與醫(yī)藥 2013年20期
    關(guān)鍵詞:液相色譜儀均勻度附表

    廣東省韶關(guān)市食品藥品檢驗所(512028)劉旺培 黃義純 陳華龍

    維生素B1片為用于預(yù)防和治療維生素B1缺乏癥,如腳氣病、神經(jīng)炎、消化不良等藥品,口服吸收快,安全有效?,F(xiàn)行的國家藥品標(biāo)準(zhǔn)沒有對維生素B1片的含量均勻度作規(guī)定。本文介紹高效液相色譜法測定維生素B1的含量均勻度,具有分析方法簡單、快速、分析結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定的特點。

    1 儀器與試藥

    日本島津LC-20A高效液相色譜儀,四元梯度泵,自動進樣器,Lc-solution工作站。維生素B1對照品(中國藥品生物制品檢定所提供),維生素B1片樣品(2012年韶關(guān)市評價抽驗和監(jiān)督抽驗);甲醇和乙腈為色譜純,其他試劑為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件[1]色譜柱:Diamonsil,C18(150mm×4.6mm;5μm);流動相:甲醇-乙腈-0.02mol/L庚烷磺酸鈉溶液(含1%三乙胺,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5,9∶9∶82);檢測波長為238nm;流速為1.0ml/min;進樣量:10μl。

    2.2 線性范圍試驗 精密稱取維生素B1對照品適量,加水稀釋至含維生素B1為0.5026mg/ml的儲備液;分別吸取儲備液溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10.0ml,置于10ml量瓶中,加水稀釋至刻度。分別取上述溶液10μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,以濃度作橫坐標(biāo)(X),以峰面積作縱坐標(biāo)(Y),作線性回歸,得回歸方程。線性試驗結(jié)果表明:維生素B1在50.5~505μg/ml濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系?;貧w方程分別為Y=18240X+39282,r=0.99999。

    2.3 精密度試驗 取含維生素B1濃度分別為101μg/ml的對照品溶液,精密取10μl,注入液相色譜儀,重復(fù)進樣5次,計算峰面積的RSD分別為0.1%。結(jié)果顯示,本方法及儀器精密度良好。

    附表1 維生素B1加樣回收試驗結(jié)果

    附表2 3種批次維生素B1片的含量均勻度測量結(jié)果

    2.4 溶液的穩(wěn)定性試驗 取同一維生素B1片樣品溶液,置于室溫下,分別于0h、2h、8h、12h、24h取樣測定,結(jié)果顯示,本品溶液在24h內(nèi)測定,維生素B1的峰面積均無明顯改變,說明本測定溶液較穩(wěn)定。

    2.5 回收率試驗 精密量取已知含量的供試品0.06670(含維生素B1為9.513mg)置100ml容量瓶中,分別加入維生素B1(0.505mg/ml)對照品各1.6、2.0、2.4ml,加水稀釋至刻度,精密取10μl注入液相色譜儀,測定回收率,結(jié)果見附表1。

    2.6 含量均勻度測定 取維生素B1片(標(biāo)示量10mg)置100ml量瓶中,加水約70ml,超聲使維生素B1溶解,加水稀釋至刻度,過濾,精密量取續(xù)濾液10μl,注入色譜儀,記錄色譜圖。另取維生素B1對照品適量,加水稀釋至每1ml含0.1mg的溶液,同法測定,按外標(biāo)法以峰面積計算,即得。

    以上述方法分別測定3批維生素B1片的含量均勻度,含量均勻度A+1.80S,,X為標(biāo)示含量為100的相對含量。

    結(jié)果顯示,3批樣品的含量均勻度均符合規(guī)定(A+1.80S≤15.0)。見附表2。

    3 討論

    3.1 流動相和溶劑的選擇 維生素B1為水溶性物質(zhì),在水中溶解性很好,在中性水中相對穩(wěn)定,用水做溶劑既經(jīng)濟又環(huán)保,且便于操作。本文選用甲醇-乙腈-0.02mol/L庚烷磺酸鈉溶液(含1%三乙胺,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5,9∶9∶82)為流動相,維生素B1的峰形好,保留時間適中。

    3.2 測定波長的選擇 以水為空白,用供試品溶液和對照品溶液在200~400nm波長范圍內(nèi)掃描,結(jié)果維生素B1在238nm波長處有最大吸收,所以選擇238nm為測定波長,且在238nm波長處雜質(zhì)吸收小。

    3.3 結(jié)果 實驗證明,該研究提出的HPLC法測定維生素B1片含量均勻度,選擇性、準(zhǔn)確度及專屬性高,且方法簡便、精密度高、重現(xiàn)性好,自動化程度高,可作為維生素B1片的質(zhì)量控制方法。

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