GP73與肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展

吳婧 徐偉文

2.南方醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院，廣東，廣州 510515

肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）（以下簡稱肝癌）是世界范圍最常見的惡性腫瘤之一。據(jù)最新數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界每年新發(fā)肝癌患者約七十萬，居惡性腫瘤的第五位，并且其惡性程度高，預(yù)后差，死亡率為世界腫瘤死亡第二位。我國是全球肝癌發(fā)病率最高的國家，每年發(fā)病患者數(shù)占全球約55%。肝癌患者早期無明顯癥狀[1]，一旦出現(xiàn)癥狀就診，往往已屬于中晚期，失去了有效的治療時機(jī)，發(fā)病后一般只能生存6個月，被譽(yù)為“癌中之王”。因此其早期診斷就顯得尤為重要。

甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是目前全世界應(yīng)用最廣泛的肝癌腫瘤標(biāo)志物，是診斷HCC的唯一“金標(biāo)準(zhǔn)”。它是胎兒發(fā)育早期由肝臟和卵黃囊合成的一種血清糖蛋白，在成人血清中含量甚微。當(dāng)肝細(xì)胞癌變時，低甲基化作用會使AFP的基因表達(dá)開放，AFP表現(xiàn)為表達(dá)增加。大多數(shù)臨床研究結(jié)果表明，當(dāng)臨界值為20 ng/mL時，AFP診斷HCC的敏感性和特異性分別為41%～65%和80%～94%[2]，是早期肝癌診斷特異性較高的腫瘤標(biāo)志物。

但AFP用于肝癌早期診斷存在2個問題：（1）假陰性，當(dāng)AFP基因表達(dá)調(diào)控停止在轉(zhuǎn)錄后翻譯前時，AFP的表達(dá)量會降低，就會出現(xiàn)假陰性，并且當(dāng)肝癌較小時，AFP的表達(dá)量低于檢測的最低限，易出現(xiàn)假陰性；而當(dāng)肝癌過大時，AFP表達(dá)延遲或者表達(dá)量超過檢測的最高限，HCC患者也可呈現(xiàn)AFP陰性。（2）假陽性，AFP不僅在HCC患者中會升高，在慢性肝炎、肝硬化、胃癌、胚胎癌及其他腫瘤患者中都常有一過性AFP增高。這就需要一種敏感性及特異性高的新腫瘤標(biāo)志物作為HCC的早期診斷。

近年來人們運(yùn)用各種方法，發(fā)現(xiàn)了多種肝癌標(biāo)記物如包括高爾基體糖蛋白73（golgi protein-73，GP73），磷脂?；嫉鞍拙厶?-3（glypican-3，GPC3），鱗狀細(xì)胞癌抗原免疫球蛋白復(fù)合物（Squamous cell carcinoma antigen，SCCA），α-L巖藻糖苷酶（alphalfucosidase，AFU）等，其中GP73以良好的敏感性和特異性，被視為最有潛力的HCC標(biāo)志物[3]，為HCC的早期診斷帶來了希望。本文將對近年來GP73與肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展做綜述。

1 GP73的概述

GP73是Kladney等[4]在研究成人巨細(xì)胞性肝炎病原學(xué)首次發(fā)現(xiàn)的存在于高爾基體的一種II型跨膜糖蛋白，相對分子質(zhì)量為7.3×104kDa。GP73有一段簡短的N末端跨膜區(qū)域和一個長的C末端外功能區(qū)。這個外功能區(qū)包含一個螺旋形結(jié)構(gòu)。在穩(wěn)定的功能狀態(tài)下，這個螺旋形結(jié)構(gòu)對高爾基體的定位很有必要。但一項(xiàng)新的研究[5]發(fā)現(xiàn)，GP73的定位與C末端外功能區(qū)關(guān)系不大，其定位與N端的TMD功能區(qū)關(guān)系更為密切。除此之外，C末端還包含一個功能未知的高酸性區(qū)域和蛋白質(zhì)之間相互作用點(diǎn)。

GP73在人體多種組織中均表達(dá)，但表達(dá)強(qiáng)度不一，最高可相差20倍[6]。在胃、腸、前列腺中表達(dá)較強(qiáng)，在腎、脾、肺、子宮及睪丸中表達(dá)較弱，在心臟中表達(dá)最弱。在正常肝臟組織，GP73主要表達(dá)于匯管區(qū)的膽管上皮細(xì)胞，在肝細(xì)胞則無表達(dá)或表達(dá)很少。但在肝臟疾病中，其在肝細(xì)胞及血清中的含量上調(diào)，在肝炎中上調(diào)水平低，在肝癌中上調(diào)水平高。經(jīng)研究，這些高表達(dá)的GP73主要來自于肝細(xì)胞，而膽管細(xì)胞表達(dá)GP73則改變不明顯。有研究[7,8]認(rèn)為，這些組織中升高的GP73可能是通過弗林蛋白水解酶的酶切機(jī)制進(jìn)入血清的。GP73是位于高爾基體順面膜囊上的一種整合膜蛋白，穩(wěn)態(tài)下如GPP130一樣，通過胞內(nèi)體在高爾基體與細(xì)胞表面之間往返循環(huán)，但在肝臟疾病中，認(rèn)為[8～12]可能是因?yàn)榧毙愿渭?xì)胞損傷觸發(fā)或慢性肝臟組織的重構(gòu)和纖維化，使GP73被前蛋白水解酶（PC）弗林水解酶裂解其遠(yuǎn)端第55個氨基位點(diǎn)，形成分子量比全長GP73小的分泌型GP73（sGP73），在循環(huán)過程中，運(yùn)輸至細(xì)胞外，進(jìn)入血清中，從而使HCC及肝硬化患者血清GP73水平上調(diào)。不過又有研究[13]發(fā)現(xiàn)在前列腺患者的尿液中出現(xiàn)了全長形式的GP73，這就提示可能還存在不依賴弗林蛋白酶酶切的分泌機(jī)制。

目前對于GP73在組織上皮細(xì)胞中的功能，以及其在各種肝臟疾病中含量上調(diào)的原因尚不太清楚。但是其在多種細(xì)胞中均表達(dá)，推測其具有管家蛋白的功能。研究發(fā)現(xiàn)，通過“Knock-down”技術(shù)檢測HepG2.2.15細(xì)胞后，證實(shí)當(dāng)細(xì)胞表面的高爾基復(fù)合體減少時，GP73的表達(dá)受到抑制。因此人們猜測GP73的功能與穩(wěn)定高爾基復(fù)合體結(jié)構(gòu)的完整性有關(guān)。而細(xì)胞器的改變與癌癥發(fā)生的關(guān)系密切，提示GP73的改變可能是肝癌所引起的肝臟細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)。Wright等[14]采用“gene trap”的方法發(fā)現(xiàn)將大鼠GP73基因的C末端縮短，所培養(yǎng)繁殖的大鼠均有不同程度的腎臟和肝臟疾病，證實(shí)了GP73對于維持肝腎的正常功能具有重要意義。

2 GP73作為肝癌診斷標(biāo)志物的價值

2005年，Block等[15]用乙型肝炎病毒感染土撥鼠，建立土撥鼠肝癌模型，并運(yùn)用糖蛋白組學(xué)手段檢測了GP73在肝癌組和正常組血清中的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在肝癌組血清中GP73明顯增高。趙秀英等[16]對372例樣本進(jìn)行研究，其中健康組43例，肝炎肝硬化組110例，肝癌組219例。健康組GP73表達(dá)量為22.1 ng/mL，肝炎肝硬化組GP73表達(dá)量為81.4 ng/mL，肝癌組GP73表達(dá)量為271.5 ng/mL，GP73的表達(dá)在肝癌組明顯高于健康組及肝炎肝硬化組。

Mao等[17]進(jìn)行了大樣本，多中心，多種族患者的GP73系列相關(guān)研究，將4217名病例分為健康組（1690例）、HBV（hepatitis B virus)組（337例）、肝硬化組（512例）、肝癌組（789例）、其他惡性肝臟疾病組（61例）、良性肝腫瘤組（206例），14種非肝腫瘤組（622例）等，對各組人群檢測其血清GP73表達(dá)量。結(jié)果顯示，健康組為1.2個相對單位，HBV組為2.9個相對單位，肝硬化組為4.7個相對單位，肝癌組在所有組中GP73含量最高，高達(dá)14.7個相對單位，再次證實(shí)了GP73可以作為肝癌早期的診斷標(biāo)志物。

近年來許多研究者都用實(shí)驗(yàn)證明了GP73對于肝癌的早期診斷具有較高的敏感性與特異性，雖然各研究者所取的臨界值不同，但我們可以大致看到一個范圍，GP73敏感性范圍為69%～83%，特異性范圍為73%～97%[11,16～22]（見表 1）。Mao 等[17]用 Immunoblot的方法對4217例樣本進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)GP73對于肝癌早期診斷具有較高的敏感性與特異性，其敏感性為74.6%，特異性為97.4%，可見GP73對肝癌早期診斷具有一定價值。早在2005年，Marrero等[22]就發(fā)現(xiàn)GP73對肝癌早期診斷具有較高的敏感性和特異性。由于當(dāng)時技術(shù)的限制，他們采用Immunoblot的方法檢測352個樣本的血清GP73，以10個相對單位作為臨界值，發(fā)現(xiàn)GP73對于肝癌早期診斷的敏感性與特異性分別為69%和75%，AUROC為0.79，這組數(shù)據(jù)值雖然相對近年來的研究數(shù)據(jù)值較低（比較表1），但也從側(cè)面證實(shí)了GP73對于肝癌早期診斷的價值。Tian等[18]發(fā)現(xiàn)在早期肝癌患者血清中GP73為110.4 μg/L，進(jìn)展期肝癌患者血清水平為102.8μg/L，二者無明顯差異，說明在早期肝癌患者血清中就可以檢測出高水平GP73，也證實(shí)了GP73的敏感性較高。

值得一提的是，Ozkan等[23]報告對78例肝癌，55例肝硬化和28例健康人進(jìn)行檢測，卻得出與大多數(shù)學(xué)者不同的研究結(jié)果。他們發(fā)現(xiàn)GP73對于肝癌早期診斷的敏感性為82%，但是特異性僅為9%，因此認(rèn)為GP73作為單獨(dú)的肝癌診斷標(biāo)志物，優(yōu)越性低于AFP。但即使如此，我們也可以發(fā)現(xiàn)，GP73診斷肝癌的敏感性較高，可以在一定程度上彌補(bǔ)AFP敏感性較低所帶來的局限性，從一定程度上體現(xiàn)了GP73對于肝癌早期診斷的價值。

Hu等[19]通過Western blotting法檢測亞洲人血清中GP73的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)乙肝病毒相關(guān)性肝癌組檢測的數(shù)值在所有檢測組中是最高的。其在健康人組為1.13個單位，在乙肝病人組為3.01個單位，在肝硬化病人組為5.68，在乙肝病毒相關(guān)性肝癌病人組為17.15個單位。在相同條件下檢測，發(fā)現(xiàn)GP73診斷乙肝病毒相關(guān)性肝癌的敏感性與特異性分別為77.4%，83.9%，AUROC為0.89，而AFP則為48.4%，96.8%，AUROC為0.77。毛一雷等[24]也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果，在以乙肝為基礎(chǔ)的肝癌患者血清中的GP73則顯著增高，其診斷肝癌的敏感度（76.9%）較AFP（48.6%）顯著升高，并且特異度達(dá)到88%。

多項(xiàng)研究[16,17,22]都證實(shí)，不管是HBV、HCV（hepatitis C virus）病毒相關(guān)性肝癌，還是非病毒相關(guān)性肝癌，肝癌患者血清中所測得的GP73水平都顯著高于良性肝病。Riener等[25]使用免疫組化的方法研究肝細(xì)胞癌、良性肝臟疾病、膽管細(xì)胞癌（Cholangiocarcinoma）及健康人的肝臟組織中GP73的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中GP73表達(dá)明顯增強(qiáng)，其表達(dá)明顯高于其周圍的非癌變組織，而肝臟良性疾病組織中GP73的表達(dá)對比周圍正常組織，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Mao等[17]也發(fā)現(xiàn)在肝良性腫瘤及惡性肝病中檢測到的血清GP73水平，顯著低于HCC患者。值得一提的是，Tian等[18]用ELISA法檢測HCC、肝炎、肝硬化、局灶結(jié)節(jié)性增生、血管瘤、肝內(nèi)膽管瘤、肝轉(zhuǎn)移性腺瘤、健康人等535例樣本中血清GP73含量，雖然結(jié)果表明GP73在肝硬化組表達(dá)最高，與大多數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同，但是實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了GP73在HCC、肝炎患者中的表達(dá)差異是具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的。這些都說明用GP73有助于良惡性肝病與肝癌之間的鑒別診斷。

表1 各研究組對于GP73診斷早期肝癌的價值研究Table1 The value of serum GP73 as a marker in the diagnosis of HCC in different researches

除此之外，Riener等[25]還發(fā)現(xiàn)HCV感染導(dǎo)致的HCC和膽管細(xì)胞癌患者的血清GP73水平（均值分別為18 mg/L和14.5 mg/L）明顯高于健康人群（均值為4 mg/L）。HCC和膽管細(xì)胞癌的肝臟組織強(qiáng)烈表達(dá)GP73。Tian等[18]也發(fā)現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象。由此可見，GP73有望成為膽管細(xì)胞癌的一個血清標(biāo)志物。

研究還發(fā)現(xiàn)，GP73表達(dá)水平的提高可能還與腫瘤的侵犯轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Sun等[26]用免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中GP73的表達(dá)與血管侵犯、腫瘤分化等密切相關(guān)，提示GP73能增強(qiáng)腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。除此之外，研究[18,25,28]還發(fā)現(xiàn)GP73對于肝癌的術(shù)后預(yù)測預(yù)后也有一定的價值。據(jù)資料顯示[24]，GP73在HCC患者術(shù)后一周內(nèi)維持在一定水平，但術(shù)后1.5～2年下降明顯，低于肝癌組，略高于正常組。也有研究者[27]發(fā)現(xiàn)，HCC患者術(shù)后1～8周內(nèi)GP73下降明顯?？傊囗?xiàng)研究[17,24,27,28]都證實(shí)GP73在HCC患者術(shù)后或治療后，有下降趨勢，而在肝癌復(fù)發(fā)時GP73重新增高。術(shù)后血清GP73水平依舊維持在較高水平者，5年復(fù)發(fā)率明顯升高。

3 GP73與AFP相比較

對表2中數(shù)據(jù)進(jìn)行比較可發(fā)現(xiàn)，從總體水平來看，AFP對于肝癌診斷的特異性略高于GP73，但AFP的敏感性顯著低于GP73，AUROC值則是GP73略高于AFP。因而從總體上來看，GP73略優(yōu)于AFP。而單看敏感性，GP73則顯著優(yōu)于AFP。很多研究[16,22,29]都發(fā)現(xiàn)在AFP陰性的患者中，可以檢測出高水平的GP73。

Marrero等[22]研究發(fā)現(xiàn)在AFP水平低于20 ng/mL的HCC患者中，有62%的患者血清GP73水平超過最佳臨界值，而在AFP水平低于100 ng/mL的HCC患者中，有71%的患者血清GP73水平超過最佳臨界值。趙秀英等[16]在大樣本試驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，對于149例AFP＜400 ng/mL的HCC樣本中，有108例（72.5%）患者GP73＞100 ng/mL。張亞松等[29]也發(fā)現(xiàn)45例HCC患者血清AFP≤13.3 μg/L，GP73檢出陽性25例（55.6%）；33例AFP＜7 μg/L，其 GP73檢出陽性17例（52%）。大量研究都證實(shí)，GP73對于AFP陰性患者具有較高的檢出率，能在一定程度上彌補(bǔ)AFP的不足。

除此之外，AFP與GP73的不同之處還表現(xiàn)在腫瘤轉(zhuǎn)移，術(shù)后預(yù)后等方面。目前的研究認(rèn)為[12]GP73與腫瘤大小，結(jié)節(jié)數(shù)目，是否多發(fā)及臨床分期等無密切相關(guān)性，與病理分級及合并肝硬化相關(guān)。而AFP則與腫瘤大小，臨床分期等有相關(guān)性。在肝癌較小、癌腫數(shù)量少甚至單發(fā)或患者肝功能較好時，AFP升高水平較低甚至不升高，而只有當(dāng)肝癌發(fā)生侵襲時，如癌栓形成，包膜浸潤，血管侵犯，肝內(nèi)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化時，血清AFP才顯著升高[30]。而GP73則在肝癌早期就顯著升高，并且可能起到增強(qiáng)腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。AFP與GP73都對于肝癌術(shù)后預(yù)測預(yù)后具有一定的價值，不同之處是GP73血清水平是隨時間逐漸下降[24,27]，而AFP則在術(shù)后一周就明顯下降。血清AFP水平在膽管細(xì)胞型肝癌患者中并沒有明顯提高，處于較低的水平。毛一雷等[24]研究發(fā)現(xiàn)，有4/6的膽管細(xì)胞型肝癌患者血清中GP73顯著提高，其提高的水平低于肝癌患者，高于HBV病毒感染者。Riener[25]和Tian等[18]也得出了同樣的結(jié)論。

4 GP73與AFP聯(lián)合診斷

GP73敏感性高，但特異性較AFP低。AFP敏感性差，但特異性高，提示兩者聯(lián)合診斷能提高肝癌的檢出率。研究發(fā)現(xiàn)[31]GP73與AFP不存在相關(guān)性（Spearman相關(guān)分析，P=0.667），在所有HCC患者中，41.3%兩者僅一個指標(biāo)升高，54.7%兩者皆升高，而僅有4%兩個指標(biāo)均不升高，兩者聯(lián)合診斷可使HCC診斷率顯著提高。

表2 GP73與AFP對于肝癌早期診斷的價值比較Table 2 Comparison of the efficacy of serum GP73 and AFP levels in the early diagnosis of HCC

Mao等[17]的多中心大樣本研究表明，AFP聯(lián)合GP73檢測后，敏感性提高到了89.2%，特異性提高到了85.2%（GP73，AFP單項(xiàng)檢測的敏感度分別為 74.6%、58.2%，特異性分別為 97.4%、85.3%）。姚建華[32]發(fā)現(xiàn)GP73和AFP聯(lián)檢，敏感性升高為92.98%，特異性為88.89%，準(zhǔn)確度為90.83%，陽、陰性預(yù)測值分別為88.33%和90.32%，與單項(xiàng)指標(biāo)相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。且GP73與AFP聯(lián)檢的AUROC為0.929，高于單項(xiàng)檢測值（GP73為0.9000，AFP為0.802）。

楊盛力等[33]運(yùn)用Meta分析發(fā)現(xiàn)，GP73與AFP聯(lián)合檢測的敏感性和特異性分別為0.889和0.831，敏感性提高，而且AUROC為0.9282，因此GP73聯(lián)合AFP檢測可以減少對腫瘤患者的漏診。同時檢測血清AFP與GP73，對AFP陰性的肝癌患者中有一定診斷價值，有助于無臨床癥狀及體征的肝癌患者的早期發(fā)現(xiàn)，能夠達(dá)到早診斷，早治療，提高肝癌患者生存期?？傊珿P73與AFP聯(lián)合診斷可以大大提高診斷肝癌的敏感性。

5 問題與展望

GP73自被發(fā)現(xiàn)后，一直受到人們的關(guān)注，其所具有的較高的敏感性，能夠較好的彌補(bǔ)AFP敏感性較低所帶來的局限性，與AFP聯(lián)合診斷能較好的提高肝癌診斷的敏感性。而其單獨(dú)檢測時特異性也不低，從而也使其具有一定單獨(dú)診斷肝癌的價值。

但是GP73若想推廣于臨床，還有很多問題尚待解決。首要問題就是GP73的生物學(xué)特性，分泌機(jī)制，功能等問題。目前對于GP73的分子生物學(xué)特性，功能知之甚少，其在多種正常細(xì)胞表達(dá)，表明其有某些看家功能，但在各種細(xì)胞中的表達(dá)水平又相差巨大，說明該蛋白還有許多未知功能。GP73是穩(wěn)定高爾基體復(fù)合體的一個必要成分，還是高爾基體的功能組成成分，還是兩者兼具，其在蛋白上的結(jié)構(gòu)域的具體功能如何，在肝癌組織中是通過何種調(diào)控使GP73表達(dá)量升高的，GP73在肝細(xì)胞受損及HCC患者中升高的原因是否相同，它與腫瘤的發(fā)生發(fā)展是否有關(guān)，它是HCC的癌啟動因子，還是HCC細(xì)胞固有的表達(dá)蛋白，通過阻斷其表達(dá)是否可達(dá)到治療HCC的目的等等均未明確，這些都有待進(jìn)一步研究。

而另一個亟待解決的問題，就是GP73的臨床研究缺乏多中心大樣本的聯(lián)合臨床研究來評價其臨床應(yīng)用價值。大樣本研究[34]將避開一個標(biāo)志物在一個人群為陽性/陰性時在另外一個人群是陰性/陽性的尷尬情況，對于從多方面確定標(biāo)志物的臨床價值具有重要意義。除此之外，GP73與肝癌大小，分期，復(fù)發(fā)，預(yù)后等關(guān)系還需要更系統(tǒng)深入的分析。隨著對GP73研究的深入，也發(fā)現(xiàn)GP73不僅在肝癌患者血清中高表達(dá)，有時在肝硬化進(jìn)展期以及急性肝炎患者血清中也高表達(dá)，不利于肝癌的鑒別診斷。GP73是否還在其它肝臟疾病中高表達(dá)，在不同肝臟中疾病的血清及組織中表達(dá)是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，是否可以利用這些進(jìn)行鑒別診斷，這些都有待進(jìn)一步研究。

目前，GP73的檢測方法很多，大多數(shù)人使用ELISA，Western blot，Immunoblot這三種方法，后兩種方法是半定量的，雖然能夠獲得較高的敏感性與特異性，但操作起來步驟多，易出錯；ELISA操作簡便，經(jīng)濟(jì)，但用ELISA方法檢測GP73時，血清中存在GP73自身抗體，會干擾ELISA檢測，從而導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差[35]。Tian等[18]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，用ELISA方法檢測時，HCC組的血清GP73水平是正常組的2.2倍，而用Western blot方法檢測時，HCC組的血清GP73水平是正常組的1.4倍，說明用ELISA檢測可能更敏感。陳旺等[36]已開始研發(fā)GP73單克隆抗體，以取代GP73多克隆抗體，增加實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性與均一性，從而為進(jìn)一步開發(fā)更有價值的ELISA試劑盒做準(zhǔn)備。除了ELISA之外，有研究[19]證明用RT-PCR檢測GP73 mRNA似乎比Western blot更敏感，而這有可能為GP73在臨床上大規(guī)模使用帶來曙光。除此之外，（電）化學(xué)發(fā)光免疫分析法是目前敏感性較高的檢測方法之一，臨床上多使用其來檢測AFP等腫瘤標(biāo)志物的血清水平，但可能是成本問題以及GP73作為診斷標(biāo)志物尚無官方或行業(yè)定論，目前尚無有實(shí)驗(yàn)室報道將（電）化學(xué)法光法用于GP73的檢測。但尋求一種更經(jīng)濟(jì)，簡便，穩(wěn)定可靠，可供大規(guī)模使用的方法檢測GP73，以推廣其在臨床檢測中的應(yīng)用是必須的。因而，若能研發(fā)出高靈敏、穩(wěn)定檢測血清GP73的方法試劑，不管對于GP73和AFP二者單獨(dú)，還是聯(lián)合運(yùn)用于臨床，都將是巨大進(jìn)展，也將為日后我們對二者進(jìn)行臨床檢測標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范帶來簡便。除了標(biāo)準(zhǔn)化臨界點(diǎn)外，對于檢驗(yàn)過程的標(biāo)準(zhǔn)化，也是必不可少的。規(guī)范檢驗(yàn)過程中所有環(huán)節(jié)，可以減少任一環(huán)節(jié)的出錯對檢驗(yàn)結(jié)果的影響，提高精準(zhǔn)度，減少出錯率[37]。

另外，隨著對腫瘤的不斷研究，人們發(fā)現(xiàn)在腫瘤的進(jìn)展過程中，蛋白質(zhì)的糖基化，特別是巖藻糖基化是一個十分常見的現(xiàn)象。Norton等[38]使用凝集素親和層析法進(jìn)一步證明，從HCC來源的細(xì)胞分泌出來的GP73中有3/4的被巖藻糖基化，利用質(zhì)譜法進(jìn)一步證明，從培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞分泌出來的大部分GP73分子上至少2/3N-連接糖基化位點(diǎn)被占據(jù)。說明在肝癌患者中，GP73的巖藻糖基化是一個十分常見的現(xiàn)象。研究也發(fā)現(xiàn)，巖藻糖基化的GP73比GP73相對于肝癌診斷具有更高的敏感度和特異度。一項(xiàng)包括80名患者的研究中[39]，GP73診斷肝癌的敏感性和特異性為65%和90%，而巖藻糖基化的GP73敏感性和特異性高達(dá)90%和100%，提示可能有一些肝癌患者，其血清中GP73的水平不高，但巖藻糖基化的GP73明顯增高。提示對于某些GP73陰性或低水平者，檢測巖藻糖基化的GP73不失為一個更好的選擇。

GP73不僅在肝癌等肝臟疾病中表達(dá)上調(diào)，而且在膽管細(xì)胞癌[18,24,25]、前列腺腫瘤[40]、肺癌[6]、精原細(xì)胞癌[41]等多種腫瘤中也存在表達(dá)上調(diào)，但在大部分透明細(xì)胞癌中表達(dá)下調(diào)[42]。GP73在多種腫瘤中的異常表達(dá)，使其有可能成為相應(yīng)腫瘤的新的輔助診斷標(biāo)志物。Kristiansen等[40]發(fā)現(xiàn)在614例前列腺腫瘤患者中，567例前列腺腫瘤腺體中GP73表達(dá)量上調(diào)，其診斷靈敏度為92.3%，稍低于AMACR（95%，583/614）。而在84%（26/31）AMACR陰性患者中也發(fā)現(xiàn)GP73有所上調(diào)，從而證實(shí)GP73可能成為前列腺腫瘤診斷的一個輔助標(biāo)志物。Varambally及Wei等[13,43]也得出了類似的結(jié)論。Zhang等[6]用免疫組化的方法對178例肺癌患者進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)所有肺腺癌標(biāo)本均為陽性，其中83.6%的細(xì)胞擴(kuò)散染色。不過在鱗狀細(xì)胞癌僅有16.3%染色強(qiáng)烈。而對于血GP73含量，相較于正常人（53 ng/mL），肺癌患者增高30%（69 ng/mL）。并且作者還推測肺癌組織中的GP73能通過肺泡進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)的，若如此，就可以利用其它檢測方法，使GP73有可能成為輔助肺癌（特別是肺腺癌）診斷及監(jiān)測的生物標(biāo)志物。不過也有研究[42]發(fā)現(xiàn)GP73對于腎癌的診斷方面意義不大。

總之，血清GP73是一個較為重要的肝癌標(biāo)志物，其在診斷方面具有較高的敏感性和特異性，特別是高敏感性能有效彌補(bǔ)AFP低敏感性所帶來的局限性。雖然目前GP73廣泛運(yùn)用于臨床還存在很多問題，但是隨著各界學(xué)者以及臨床醫(yī)師對該領(lǐng)域的進(jìn)一步深入研究，相信在不久的將來，GP73將廣泛應(yīng)用到HCC的早期診斷，發(fā)病機(jī)制，腫瘤藥物治療靶點(diǎn)以及治療效果等研究中去。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部. 原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)[J]. 臨床肝膽病雜志, 2011, 27(11): 1141-1159.

[2] Debruyne E N, Delanghe J R. Diagnosing and monitoring hepatocellular carcinoma with alpha-fetoprotein: new aspects and applications[J]. Clin Chin Acta, 2008, 395(1-2), 19-26.

[3] Li X, Wu K, Fan D. Serum golgi phosphoprotein 2 level:a better marker than alpha-fetoprotein for diagnosing early hepatocellular carcinoma[J]. Hepatology, 2009, 50(5): 1682.

[4] Kladney R D, Bulla G A, Guo L, et al. GP73, a novel Golgilocalized protein upregulated by viral infection[J]. Gene,2000, 249(1-2): 53-65.

[5] Hu L, Li L, Xie H, et al. The Golgi localization of GOLPH2(GP73/GOLM1) is determined by the transmembrane and cytoplamic sequences[J]. PLoS One, 2011, 6(11): e28207.

[6] Zhang F, Gu Y, Li X, et al. Up-regulated Golgi phosphoprotein 2 (GOLPH2) expression in lung adenocarcinoma tissue[J]. Clin Biochem, 2010, 43(12):983-991.

[7] Puri S, Bachert C, Fimmel C J, et al. Cycling of early Golgi proteins via the cell surface and endosomes upon lumenal pH disruption[J]. Traffic, 2002, 3(9): 641-653.

[8] Bachert C, Fimmel C, Linstedt A D. Endosomal trafficking and proprotein convertase cleavage of cis Golgi protein GP73 produces marker for hepatocellular carcinoma[J].Traffic, 2007, 8(10): 1415-1423.

[9] Iftikhar R, Kladney R D, Havlioglu N, et al. Disease-and cell-specific expression of GP73 in human liver disease[J].Am J Gastroenterol, 2004, 99(6): 1087-1095.

[10] Shi Y, Chen J, Li L, et al. A study of diagnostic value of golgi protein GP73 and its genetic assay in primary hepatic carcinoma[J]. Technol Cancer Res Treat, 2011, 10(3):287-294.

[11] Zhou Y, Yin X, Ying J, et al. Golgi protein 73 versus alphafetoprotein as a biomarker for hepatocellular carcinoma: a diagnostic meta-analysis[J]. BMC Cancer, 2012, 12: 17.

[12] Yamamoto K, Imamura H, Matsuyama Y, et al. AFP,AFP-L3, DCP, and GP73 as markers for monitoring treatment response and recurrence and as surrogate markers of clinicopathological variables of HCC[J]. J Gastroenterol,2010, 45(12): 1272-1282.

[13] Varambally S, Laxman B, Mehra R, et al. Golgi protein GOLM1 is a tissue and urine biomarker of prostate cancer[J].Neoplasia, 2008, 10(11): 1285-1294.

[14] Wright L M, Huster D, Lutsenko S, et al. Hepatocyte GP73 expression in Wilson disease[J]. J Hepatol, 2009, 51(3):557-564.

[15] Block T M, Comunale M A, Lowman M, et al. Use of targeted glycoproteomics to identify serum glycoproteins that correlate with liver cancer in woodchucks and humans[Z].Proc Natl Acad Sci U S A, 2005, 102(3): 779-784.

[16] 趙秀英, 李寧, 丁惠國, 等. 血清高爾基體糖蛋白73在肝細(xì)胞癌診斷中的作用[J]. 中華腫瘤雜志, 2010, 32(12):943-946.

[17] Mao Y, Yang H, Xu H, et al. Golgi protein 73 (GOLPH2) is a valuable serum marker for hepatocellular carcinoma[J]. Gut,2010, 59(12): 1687-1693.

[18] Tian L, Wang Y, Xu D, et al. Serological AFP/Golgi protein 73 could be a new diagnostic parameter of hepatic diseases[J]. Int J Cancer, 2011, 129(8): 1923-1931.

[19] Hu J S, Wu D W, Liang S, et al. GP73, a resident Golgi glycoprotein, is sensibility and specificity for hepatocellular carcinoma of diagnosis in a hepatitis B-endemic Asian population[J]. Med Oncol, 2010, 27(2): 339-345.

[20] 梁嶸, 羅小玲, 葛蓮英, 等. GP73在肝細(xì)胞癌診斷中的價值[J]. 腫瘤, 2012, 32(2): 115-118.

[21] 費(fèi)迎明, 許文芳, 周建康, 等. 高爾基體蛋白73（GP73）在原發(fā)性肝癌中的早期診斷價值研究[J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志,2011, 40(12): 57-60.

[22] Marrero J A, Romano P R, Nikolaeva O, et al. GP73,a resident Golgi glycoprotein, is a novel serum marker for hepatocellular carcinoma[J]. J Hepatol, 2005, 43(6):1007-1012.

[23] Ozkan H, Erdal H, Tutkak H, et al. Diagnostic and prognostic validity of Golgi protein 73 in hepatocellular carcinoma[J].Digestion, 2011, 83(1-2): 83-88.

[24] 毛一雷, 楊華瑜, 徐海峰, 等. 新的肝癌血清標(biāo)記物GP73在肝癌診斷中的初步研究[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志, 2008, 88(14):948-951.

[25] Riener M O, Stenner F, Liewen H, et al. Golgi phosphoprotein 2 (GOLPH2) expression in liver tumors and its value as a serum marker in hepatocellular carcinomas[J].Hepatology, 2009, 49(5): 1602-1609.

[26] Sun Y, Yang H, Mao Y, et al. Increased Golgi protein 73 expression in hepatocellular carcinoma tissue correlates with tumor aggression but not survival[J]. J Gastroenterol Hepatol, 2011, 26(7): 1207-1212.

[27] 梁嶸. 高爾基體糖蛋白73對原發(fā)性肝癌的診斷價值研究[D]. 廣西醫(yī)科大學(xué), 2012.

[28] Hann H W, Wang M, Hafner J, et al. Analysis of GP73 in patients with HCC as a function of anti-cancer treatment[J].Cancer Biomark, 2010, 7(6): 269-273.

[29] 張亞松, 石玉玲, 張喜欽. GP73在肝癌早期診斷中的應(yīng)用價值[J]. 醫(yī)學(xué)臨床研究, 2011, 28(4): 651-653.

[30] 蔡云峰, 甄作均, 陳煥偉, 等. 肝癌術(shù)后肝再生狀態(tài)與肝癌復(fù)發(fā)關(guān)系的初步研究[J]. 中國普通外科雜志, 2008, 17(7):692-696.

[31] 方玫玫, 陳展洪, 李星, 等. 肝癌及肝硬化患者血清中GP73的表達(dá)及臨床意義[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 27(20):3716-3718.

[32] 姚建華. 高爾基體蛋白73和甲胎蛋白聯(lián)檢在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床應(yīng)用[J]. 放射免疫學(xué)雜志, 2012, 25(6):673-675.

[33] 楊盛力, 王云霞, 趙志輝, 等. 比較GP73和AFP聯(lián)合檢測與AFP單項(xiàng)檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值的meta分析[J]. 肝膽外科雜志, 2012, 20(4): 251-255.

[34] Sturgeon C M, Hoffman B R, Chan D W, et al. National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines for use of tumor markers in clinical practice: quality requirements[J]. Clin Chem, 2008, 54(8):e1-e10.

[35] Gu Y, Chen W, Zhao Y, et al. Quantitative analysis of elevated serum Golgi protein-73 expression in patients with liver diseases[J]. Ann Clin Biochem, 2009, 46(Pt 1): 38-43.

[36] 陳旺, 楊華瑜, 毛一雷, 等. 高爾基蛋白73單克隆抗體在肝細(xì)胞肝癌診斷中的價值[J]. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報, 2011，33(1): 39-44.

[37] 石遠(yuǎn)凱, 楊晟. 合理應(yīng)用腫瘤標(biāo)志物以提高臨床治療水平[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 35(2): 101-102.

[38] Norton P A, Comunale M A, Krakover J, et al. N-linked glycosylation of the liver cancer biomarker GP73[J]. J Cell Biochem, 2008, 104(1): 136-149.

[39] Drake R R, Schwegler E E, Malik G, et al. Lectin capture strategies combined with mass spectrometry for the discovery of serum glycoprotein biomarkers[J]. Mol Cell Proteomics,2006, 5(10): 1957-1967.

[40] Kristiansen G, Fritzsche F R, Wassermann K, et al. GOLPH2 protein expression as a novel tissue biomarker for prostate cancer: implications for tissue-based diagnostics[J]. Br J Cancer, 2008, 99(6): 939-948.

[41] Fritzsche F R, Kristiansen G, Riener M O, et al. GOLPH2 expression may serve as diagnostic marker in seminomas[J].BMC Urol, 2010, 10: 4.

[42] Fritzsche F R, Riener M O, Dietel M, et al. GOLPH2 expression in renal cell cancer[J]. BMC Urol, 2008, 8: 15.

[43] Wei S, Dunn T A, Isaacs W B, et al. GOLPH2 and MYO6:putative prostate cancer markers localized to the Golgi apparatus[J]. Prostate, 2008, 68(13): 1387-1395.