全自動(dòng)生化儀日立7600與羅氏c311的比對(duì)分析

陳 勛，張伍鳳，李榮海，沈麗琴，尚曉泓△（.中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 0009；.河北北方學(xué)院檢驗(yàn)系，河北張家口 075000）

由于臨床標(biāo)本量的逐漸增多，中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院先后引進(jìn)了日立7600－020全自動(dòng)生化儀（日立7600）與羅氏c311全自動(dòng)生化儀（羅氏c311）各1臺(tái)，2臺(tái)分析儀檢測(cè)項(xiàng)目有交叉。為驗(yàn)證兩臺(tái)分析儀檢測(cè)結(jié)果的可比性，參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）EP15－A、EP6－A、EP9－A2文件的要求，以美國臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)（CLIA′88）規(guī)定的允許總誤差范圍的1／3為標(biāo)準(zhǔn)，本科室通過分別在兩臺(tái)生化分析儀上進(jìn)行血清葡萄糖濃度（Glu）檢測(cè)，參照此模式以期達(dá)到不同生化儀間相同檢測(cè)項(xiàng)目比對(duì)的目的，現(xiàn)將研究情況報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 日立7600所用Glu試劑購自中生北控生物科技股份有限公司；羅氏c311試劑為羅氏廠家配套試劑；水平1、水平2質(zhì)控品均為羅氏產(chǎn)品。

1.2 精密度測(cè)定 參考 NCCLS EP15－A 文件［1］，選用 Glu 2個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平（7.00mmol／L和11.00mmol／L）的血清標(biāo)本。廠家聲明的批內(nèi)精密度（σwithin）和總精密度（σtotal）分別應(yīng)小于2%、5%。由于σwithin≤2／3倍的σtotal，因此在日立7600上常規(guī)檢測(cè)Glu，每天重復(fù)測(cè)定4次，共檢測(cè)5d。判定各水平的批內(nèi)精密度（s within）和批間精密度（s total）是否低于廠家聲明值。

1.3 線性分析 參照 NCCLS EP6－A文件［2］，選用 Glu濃度近似于廠家聲稱線性范圍的低限（1.00mmol／L）和高限（41.00mmol／L）的新鮮血清標(biāo)本各1份。按比例將這兩份血清稀釋，使其預(yù)期濃度分別為1.00、2.80、7.00、11.10、22.20、41.00mmol／L。用日立7600測(cè)定此6批Glu，同一批重復(fù)測(cè)定2次。將結(jié)果進(jìn)行多元線性分析。

1.4 比對(duì)實(shí)驗(yàn) 參照 NCCLS EP9－A2文件［3］，取40例新鮮血清標(biāo)本，按Glu濃度水平分為Ⅰ組（＜2.80mmol／L，4例），Ⅱ組（2.80～6.11mmol／L，16例），Ⅲ組（6.12～8.30mmol／L，12例），Ⅳ組（8.31～14.00mmol／L，4例），Ⅴ組（14.01～44.20mmol／L，4例）。分別用日立7600和羅氏c311每天測(cè)定8個(gè)標(biāo)本，每個(gè)標(biāo)本重復(fù)檢測(cè)2次，共測(cè)定5d。第1次測(cè)定按照1→8的順序，第2次按照8→1的順序，記錄測(cè)定結(jié)果。以日立7600為比對(duì)系統(tǒng)，羅氏c311為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。參照文件檢查離群值，繪制散點(diǎn)圖，進(jìn)行回歸分析。以CLIA′88允許總誤差的1／3為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算給定的醫(yī)學(xué)決定水平處的可接受限（Xc）、預(yù)估偏倚值（Bc）以及Bc的95%可信區(qū)間。通過比較Xc和Bc的95%可信區(qū)間的關(guān)系，判定實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是否與比對(duì)系統(tǒng)具有一致性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)采用F檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 精密度評(píng)價(jià) 日立7600檢測(cè)Glu濃度在7.00mmol／L處的s within（0.08mmol／L）＜σwithin（0.14mmol／L），s total（0.09mmol／L）＜σtotal（0.35mmol／L）；Glu濃度在11.00 mmol／L處的s within（0.14mmol／L）＜σwithin（0.55mmol／L），s total（0.17mmol／L）＜σtotal（0.22mmol／L）。2個(gè)醫(yī)學(xué)水平濃度均符合廠家給定的標(biāo)準(zhǔn)。

在日立7600上評(píng)價(jià)的線性分析數(shù)據(jù)無明顯離群值，3種多項(xiàng)式的相關(guān)系數(shù)的平方（決定系數(shù)，r2）均大于0.99。一次多項(xiàng)式和二次多項(xiàng)式的P＝0.001，三次多項(xiàng)式的P＝0.001，3種多項(xiàng)式比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。線性分析的F值分別為4 031.500、1 531.800、1 377.400，但其中一次多項(xiàng)式的F值最大，說明一次多項(xiàng)式對(duì)數(shù)據(jù)的擬合程度最好（圖1，表1）。

圖1 曲線擬合圖

2.2 儀器比對(duì)及偏倚性評(píng)估 數(shù)據(jù)經(jīng)過匯總，先進(jìn)行離群點(diǎn)檢查。Glu檢測(cè)結(jié)果在日立7600和羅氏c311上的絕對(duì)偏差限值分別為0.30、0.20，相對(duì)偏差限值分別為0.04、0.02；兩系統(tǒng)間的絕對(duì)偏差限值為1.36，相對(duì)偏差限值為0.17。本實(shí)驗(yàn)中均無離群點(diǎn)數(shù)據(jù)存在。

表1 相關(guān)分析結(jié)果

在整個(gè)測(cè)量范圍內(nèi)，Glu結(jié)果的均值在比對(duì)方法與實(shí)驗(yàn)方法r2為0.999 9，r2＞0.95說明相關(guān)性很好，而實(shí)驗(yàn)方法相對(duì)比對(duì)方法的偏倚也較?。▓D2A、B）。兩方法個(gè)體值間的r2也達(dá)到0.999 9，并且實(shí)驗(yàn)方法相對(duì)比對(duì)方法個(gè)體值間的偏倚也很?。▓D2C、D）?？梢哉J(rèn)為比對(duì)方法取值范圍合適。

圖2 比對(duì)分析圖

分析了線性和偏倚之后，作者選擇了Glu的3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平濃度2.80、7.00、11.10mmol／L，分別進(jìn)行Bc分析。其Bc的95%可信區(qū)間分別為2.68～2.73mmol／L、6.72～6.80 mmol／L、10.59～10.63mmol／L，均小于相應(yīng)的允許濃度范圍（表2）。

表2 比對(duì)分析結(jié)果（mmol／L）

3 討 論

糖尿病（DM）的早期診斷和良好的干預(yù)治療是減少患者嚴(yán)重并發(fā)癥，提高患者生活質(zhì)量，減少醫(yī)保支出方面的關(guān)鍵。而作為其診斷性指標(biāo)的血清Glu在臨床檢測(cè)中的重要性就顯得尤為重要。因此，本實(shí)驗(yàn)室通過在不同生化分析儀上檢測(cè)血糖項(xiàng)目，以構(gòu)建一個(gè)模式，為其他項(xiàng)目的比對(duì)分析奠定基礎(chǔ)。

NCCLS EP15－A、EP6－A、EP9－A2文件作為性能驗(yàn)證的指導(dǎo)性文件，近年來被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用［4－7］。而在進(jìn)行比對(duì)實(shí)驗(yàn)前，先要保證比對(duì)系統(tǒng)具有良好的精密度，這樣檢測(cè)結(jié)果才具有可比的前提。同時(shí)為比對(duì)系統(tǒng)選擇合適濃度的標(biāo)本，需要檢測(cè)比對(duì)儀器測(cè)定的線性范圍。因試劑廠家已明確給出性能參數(shù)，故實(shí)驗(yàn)室只需要進(jìn)行驗(yàn)證［8］。目前EP15－A提供了用戶驗(yàn)證精密度方案，此方案只需5d，每天每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定4次，而EP5－A2方案則需20d［9］。考慮到標(biāo)本保存的不穩(wěn)定性可能對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響以及成本問題，所以選用EP15－A方案。

美國糖尿病協(xié)會(huì)（ADA）糖尿病最新的診斷標(biāo)準(zhǔn)：空腹血糖（FPG）大于或者等于7.00mmol／L；或口服葡萄糖耐量（OGTT）2h血糖大于或等于11.10mmol／L；或隨機(jī)血糖大于或等于11.10mmol／L。參照此標(biāo)準(zhǔn)，筆者在進(jìn)行精密度、線性范圍評(píng)價(jià)及隨后比對(duì)分析的Bc時(shí)均選擇Glu濃度為7.00 mmol／L和11.00mmol／L 2個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平的標(biāo)本用來檢測(cè)，以期更加貼近臨床工作的需要。

在精密度和線性范圍評(píng)價(jià)過程中，作為比對(duì)系統(tǒng)的日立7600的s within、s total及線性范圍均達(dá)到廠家聲明的檢測(cè)性能，綜合分析日立7600實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)可靠，可作為比對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行進(jìn)一步的比對(duì)實(shí)驗(yàn)。

本實(shí)驗(yàn)在評(píng)價(jià)兩種檢測(cè)系統(tǒng)可對(duì)性的過程中，并未檢測(cè)到離群值。結(jié)果表明，羅氏c311的Glu結(jié)果較日立7600結(jié)果均有所偏低，說明存在一定的負(fù)偏倚，但兩系統(tǒng)相關(guān)性很好（圖2）。進(jìn)一步的回歸分析表明，Glu濃度在2.80、7.00、11.10 mmol／L 3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平處Bc的95%可信區(qū)間均小于1／3 CLIA′88的總誤差?？梢哉J(rèn)為，羅氏c311就Glu檢測(cè)項(xiàng)目而言，與日立7600具有較好的一致性。此項(xiàng)研究為本實(shí)驗(yàn)室全面開展檢測(cè)項(xiàng)目?jī)x器間的比對(duì)分析工作奠定了基礎(chǔ)。

［1］National Committee for Clinical Laboratory Standards.User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy；Approved Guideline EP15－A［S］.Wayne，PA：NCCLS，2001.

［2］National Committee for Clinical Laboratory Standards.E－valuation of the linearity of quantitative measurement procedures：a statistical approach；approved guideline EP6－A［S］.Wayne，PA：NCCLS，2003.

［3］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples；approved guideline EP9－A2［S］.2nd ed.Wayne，PA：NCCLS，2002.

［4］De Koninck AS，De Decker K，Van Bocxlaer J，et al.Analytical performance evaluation of four cartridge－type blood gas analyzers［J］.Clin Chem Lab Med，2012，50（6）：1083－1091.

［5］He M，Zhang J.Evaluation of four commercial biuret reagent kits of serum total protein by the American Association for Clinical Chemistry reference measurement procedure［J］.Clin Chem Lab Med，2011，49（6）：989－992.

［6］Soldin SJ，Hardy RW，Wians FH，et al.Performance evaluation of the new ADVIA Centaur system cyclosporine assay（single－step extraction）［J］.Clin Chim Acta，2010，411（11／12）：806－811.

［7］Jia KK，Zhang J.Evaluation of five routine glucose methods on an Olympus AU5400analyzer using the CDC hexokinase reference method［J］.Clin Chem Lab Med，2010，48（3）：361－364.

［8］畢波，呂元.定量檢測(cè)方法學(xué)性能驗(yàn)證的系統(tǒng)設(shè)計(jì)［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007，30（2）：143－145.

［9］National Committee for Clinical Laboratory Standards.E－valuation of precision performance of quantitative measurement methods；approved guideline EP5－a2［S］.2nd ed.Wayne，PA：NCCLS，2004.