呼氣冷凝液中3種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的價(jià)值研究

馬 倫，詹偉杰，廖紹宗，潘賽英（廣東省深圳市南山人民醫(yī)院.核醫(yī)學(xué)科；.腫瘤科 5805）

肺癌發(fā)病率及增長(zhǎng)速度高居惡性腫瘤之首，在我國(guó)其5年生存率僅為10%［1］。早期得到確診并展開積極治療為提高臨床療效的根本手段［2］。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是臨床肺癌診斷及鑒別診斷廣泛使用的一種常用方法，不同的血清腫瘤標(biāo)志物對(duì)肺癌診斷的敏感性及特異性均不盡相同。本研究中對(duì)本院收治的30例肺癌臨床患者化療前后、同期健康體檢者展開了呼氣冷凝液（EBC）和血清中癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段（CYFRA21－1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）水平檢測(cè)并分析檢測(cè)結(jié)果，旨在探討其在肺癌診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值并進(jìn)行評(píng)價(jià)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2011年1月15日至2012年12月15日收治的30例肺癌臨床患者作為肺癌組，另抽取30例同期健康體檢者作為健康對(duì)照組。肺癌組中男21例，女9例，年齡39～81歲，平均（64.5±12.7）歲，其中非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）15例，鱗癌者9例，腺癌者6例；健康對(duì)照組中男20例，女10例，年齡38～79歲，平均（65.7±13.4）歲。以上研究對(duì)象的一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。所有肺癌患者均采取臨床檢查、X線、纖維支氣管鏡、胸部CT及病理等檢查確診，符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 對(duì)肺癌組患者化療前和化療后以及健康體檢者的EBC、血清中CEA、CYFRA21－1、VEGF水平進(jìn)行檢測(cè)，而后對(duì)比分析各組檢測(cè)結(jié)果。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用生命科學(xué)國(guó)際貿(mào)易有限公司生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)EBC收集器（由取樣管及活塞、三通管和單向閥三部分組成）?；颊叽鞅菉A，通過單向活瓣吸入空氣，呼出氣呼入－10℃冰浴的取樣管中，平靜呼吸15～20min后，收集約3mL的EBC，于－70℃超低溫冰箱中保存待測(cè)［2］。同時(shí)抽取晨起空腹血兩管，各3mL，離心提取血清或血漿，于－70℃超低溫冰箱中保存待測(cè)。CEA、CYFRA21－1采用化學(xué)發(fā)光法，試劑由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司提供，VEGF采用上海朗頓生物科技有限公司的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒［3］。由專人嚴(yán)格按照說明書操作。對(duì)血清中的CEA、CYFRA21－1、VEGF進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)肺癌治療前后的變化值，腺癌、鱗癌、非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）3種患者中的 CEA、CYFRA21－1、VEGF值，并進(jìn)行對(duì)比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果采用進(jìn)行表示，采用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 肺癌組與對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 肺癌組患者中CEA、CYFRA21－1、VEGF在 EBC 中水平較血清中低 （P＜0.05），血清與EBC中檢測(cè)水平均較對(duì)照組高（P＜0.05），且肺癌組中治療后各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果均較治療前發(fā)生明顯降低（P＜0.05）。見表1、2。

表1 血清和EBC中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果比較（）

表1 血清和EBC中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果比較（）

注：－表示無數(shù)據(jù)。

組別 n CEA（μg／mL）CYFRA21－1（μg／mL）VEGF（pg／mL）30 23.15±1.32 14.27±2.01 274.53±23.17 EBC 30 15.47±1.65 9.77±1.43 201.32±19.65 P－ ＜0.05 ＜0.05 ＜血清0.05

表2 肺癌組與對(duì)照組EBC中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（）

表2 肺癌組與對(duì)照組EBC中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（）

注：與對(duì)照組比較，＃P＜0.05；與治療前比較，＊P＜0.05。

組別 n CEA（μg／mL）CYFRA21－1（μg／mL）VEGF（pg／mL）30 0.67±0.22 1.72±0.11 84.52±10.21肺癌治療前 30 17.89±2.13＃ 10.76±2.34＃ 248.33±26.86＃肺癌治療后 30 9.77±2.01＃＊ 3.45±2.57＃＊ 175.46±14.25＃＊健康對(duì)照組

2.2 肺癌組不同病理分型者的CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果 腺癌患者CEA水平（17.89±2.13）μg／mL相對(duì)于其他兩類較高，鱗癌患者 CYFRA21－1水平（10.76±2.34）μg／mL相對(duì)于其他兩類較高，NSCLC患者VEGF水平（248.33±26.86）μg／mL相對(duì)于其他兩類要高，三者間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 肺癌組不同病理分型者的CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（）

表3 肺癌組不同病理分型者的CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（）

注：與腺癌患者比較，＃P＜0.05；與鱗癌患者比較，＊P＜0.05；與NSCLC患者比較，△P＜0.05。

組別 n CEA（μg／mL）CYFRA21－1（μg／mL）VEGF（pg／mL）腺癌患者 15 17.89±2.13 7.45±2.35＊ 199.46±9.97△248.33±26.86鱗癌患者 9 12.21±2.33＃ 10.76±2.34 203.46±11.25△NSCLC患者 6 13.77±2.01＃ 7.51±2.15＊

2.3 EBC和血清中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)在肺癌診斷中的價(jià)值，經(jīng)檢測(cè)對(duì)比，兩組間指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表4。

表4 EBC中和血清中CEA、CYFRA21－1、VEGF檢測(cè)陽性率（%）

3 討 論

EBC在國(guó)內(nèi)研究較多的是炎性標(biāo)志物，如過氧化氫、硝酸鹽／亞硝酸鹽、氨、前列腺素、8－異前列腺素、白三烯、NO、CO等，有關(guān)EBC中腫瘤標(biāo)志物的研究報(bào)道較少，可能與獲取標(biāo)準(zhǔn)的EBC收集器較困難有關(guān)［4－5］。實(shí)際上EBC收集方法簡(jiǎn)單、無創(chuàng)、不會(huì)傷及支氣管黏膜，是下呼吸道和肺實(shí)質(zhì)早期病變的直接信號(hào)來源之一，病變?cè)诰植堪l(fā)生發(fā)展的病理過程中將相關(guān)的標(biāo)志物分泌于黏膜與肺泡表面液體中，可在EBC中測(cè)得。與血清標(biāo)本進(jìn)行聯(lián)合測(cè)定加以對(duì)照，可以提高診斷的陽性率［6－7］。CEA為腫瘤檢測(cè)的一個(gè)首選標(biāo)志物，研究表明 CEA在進(jìn)展的腺癌中的敏感性相對(duì)較高，為肺癌轉(zhuǎn)移診斷的主要標(biāo)志。曾有研究指出肺癌患者血清中CEA陽性率在39%～68%［8］。有學(xué)者對(duì)33例NSCLC患者EBC中CEA進(jìn)行了檢測(cè)，其敏感性和特異性分別為51.5%和93.3%［9］。本研究得出，EBC中CEA檢測(cè)敏感性為83.33%，較文獻(xiàn)報(bào)道水平高，可能與標(biāo)本數(shù)量小有關(guān)。腺癌患者CEA水平高于鱗癌和NSCLC患者。目前認(rèn)為CYFRA21－1是檢測(cè)肺癌的首選腫瘤標(biāo)志物［10］。本研究得出，肺癌患者EBC中的CYFRA21－1陽性率高于對(duì)照組。鱗癌患者CYFRA21－1水平高于另外兩類。目前研究證實(shí)，VEGF為作用最強(qiáng)的一種促血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，同多種腫瘤的血管生成以及生長(zhǎng)有關(guān)，在肺癌組織以及血清中的表達(dá)會(huì)顯著增加，且與肺癌的惡性程度以及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，VEGF水平越高，轉(zhuǎn)移的可能性也就越大［11］。大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血管生成伴隨著肺癌演變的全過程，VEGF在NSCLC組織中表達(dá)的陽性率為72.46%，其表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞分化程度、臨床分期和預(yù)后有關(guān)，是判定NSCLC轉(zhuǎn)移和預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo)［12－13］。本研究得出，NSCLC患者EBC及血清中VEGF表達(dá)陽性率為83.33%，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果接近。VEGF在NSCLC中的水平高于其他兩組。本研究提示肺癌患者的CEA、CYFRA21－1、VEGF水平較對(duì)照組明顯升高，且在治療后檢測(cè)結(jié)果較治療前發(fā)生明顯降低，同時(shí)經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)以上3種標(biāo)志物在腺癌、鱗癌以及NSCLC患者中的檢測(cè)結(jié)果存在差異，這一結(jié)果證實(shí)：對(duì)患者EBC中CEA、CYFRA21－1、VEGF水平的檢測(cè)能夠?qū)Ψ伟┰\斷、鑒別診斷以及病情評(píng)估結(jié)果做出準(zhǔn)確的判斷，且該方法屬無創(chuàng)檢測(cè)手段，操作簡(jiǎn)單，對(duì)于肺癌的診治及療效評(píng)價(jià)工作具有重要的臨床參考價(jià)值。

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