Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀纖維蛋白原兩種測(cè)定方法的應(yīng)用比較

馮彩蓮，康志君，李詩(shī)韻，黃瑜璇（廣東省廣州市新海醫(yī)院 510300）

纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB）是人體凝血系統(tǒng)的重要成分之一，在體內(nèi)經(jīng)凝血酶作用轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白發(fā)揮其凝血及止血功能［1］。目前實(shí)驗(yàn)室使用的自動(dòng)化血凝儀測(cè)FIB的方法有Von Clauss法和PT－der法。纖維蛋白原增高可見于糖尿病、急性心肌梗死、急性傳染病、結(jié)締組織病、急性腎炎、手術(shù)及感染等，降低見于先天性低或無(wú)纖維蛋白原血癥、遺傳性纖維蛋白原異常、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎及肝硬化等［2］。也見于降纖藥治療（如抗栓酶、去纖酶）和溶血栓治療，是它們的監(jiān)測(cè)指標(biāo)之一［3］。作者對(duì)Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀上FIB的兩種檢測(cè)方法（Von Clauss法和PT－der法）進(jìn)行比較，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 門診及住院患者167例。

1.2 儀器與試劑 日本東亞Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀，纖維蛋白原測(cè)定試劑（批號(hào)：537999）及標(biāo)準(zhǔn)物、質(zhì)控品（Dade Ci－Troll批號(hào)：548175）。

1.3 方法

1.3.1 分析前方法 抽取靜脈血1.8mL，加入含109 mmol／L枸櫞酸鈉0.2mL的一次性抗凝硅化管中，3 000r／min離心15min，2h內(nèi)檢測(cè)完成。排除溶血、黃疸、脂血、重度貧血、紅細(xì)胞明顯增多的情況。質(zhì)控品用1mL蒸餾水復(fù)溶，輕輕顛倒混勻，室溫平衡30min后進(jìn)行測(cè)定。

1.3.2 測(cè)定方法 分別用Von Clauss法和PT－der法測(cè)定，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行試驗(yàn)。

2 結(jié) 果

用Von Clauss法和PT－der法對(duì)167例患者FIB測(cè)定結(jié)果比較，將標(biāo)本同時(shí)用Von Clauss法和PT－der法測(cè)定，將測(cè)得的FIB含量按PT－der法結(jié)果分為3組，結(jié)果見表1。

表1 FIB不同濃度兩種方法測(cè)定結(jié)果比較（g／L）

結(jié)果顯示，PT－der法與Von Clauss法測(cè)定FIB含量進(jìn)行比較，當(dāng)FIB濃度在2.0～4.0g／L時(shí)，兩組結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。當(dāng)FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時(shí)，兩組結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討 論

FIB是血漿中含量最高的一種凝血蛋白，其分子為一個(gè)對(duì)稱性二聚體，含有3對(duì)多肽鏈（Aα、Bβ和γ）。目前血漿FIB的測(cè)定方法分為三大類：凝固法、物理化學(xué)法及免疫法。Von Clauss法為凝固法中最常用的一種，是臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）推薦的常規(guī)方法，屬于功能測(cè)定，能反映纖維蛋白原的凝血功能［4］。

Von Clauss法（凝血酶法）檢測(cè)FIB的工作原理是根據(jù)纖維蛋白原與凝血酶作用最終形成纖維的原理，以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用凝血酶來(lái)測(cè)定血漿凝固酶時(shí)間，所得凝固時(shí)間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而得到纖維蛋白原的含量［3］。PT－der法的工作原理是根據(jù)PT測(cè)定完成時(shí)，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白其形成的濃度與FIB的含量成正比而算出FIB含量，因此無(wú)需另加任何試劑，即可根據(jù)產(chǎn)生的濁度，用終點(diǎn)法或速率法算出FIB含量［5］。

根據(jù)本文的測(cè)定結(jié)果比較分析，當(dāng)PT－der法測(cè)得FIB濃度在2.0～4.0g／L時(shí)，兩種方法結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而當(dāng)PT－der法測(cè)得FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時(shí)，兩種方法結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所以，在日常工作中，在用Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀進(jìn)行FIB測(cè)定時(shí)，可以先用PT－der法測(cè)定，得出Fib結(jié)果在濃度在2.0～4.0g／L時(shí)可直接報(bào)告結(jié)果，當(dāng)PT－der法測(cè)得FIB＞4.0g／L或＜2.0g／L時(shí)，再進(jìn)一步用Von Clauss法復(fù)查報(bào)告結(jié)果。兩種方法聯(lián)合使用，在保證檢測(cè)的速度和結(jié)果的準(zhǔn)確性的前提下，可以最大限度地節(jié)約試劑成本，提高工作效率。另外，必須注意的是，PT－der法原理是以血漿凝固起點(diǎn)和終點(diǎn)濁度之差與FIB含量成正比，所以檢測(cè)易受標(biāo)本的黃疸、溶血、乳糜等因素的影響，使結(jié)果偏高，故在工作中有遇到上述情況的標(biāo)本時(shí)應(yīng)直接使用Von Clauss法測(cè)定FIB，溶血標(biāo)本盡量要求護(hù)士重新抽血，乳糜標(biāo)本應(yīng)盡量早晨空腹時(shí)重新抽取標(biāo)本檢測(cè)。由于這些標(biāo)本用Von Clauss法測(cè)定FIB也存在一定的干擾，故發(fā)報(bào)告時(shí)應(yīng)注明標(biāo)本狀態(tài)。

總之，Von Clauss法準(zhǔn)確性高，特異性強(qiáng)，快速簡(jiǎn)便，但試劑昂貴，而PT－der法不需另行獨(dú)立測(cè)定，可節(jié)省試劑成本。建議實(shí)驗(yàn)室兩種方法結(jié)合，這樣既能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，又保證檢測(cè)速度，提高工作效率，節(jié)約成本［6］。

［1］ 彭裕輝，方裕森.Von Clauss法與PT－der法測(cè)定纖維蛋白原在全自動(dòng)血凝儀的應(yīng)用比較［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，12（8）：84－86.

［2］ 朱忠勇.凝血機(jī)制研究與臨床檢測(cè)的若干進(jìn)展［J］.臨床檢驗(yàn)信息導(dǎo)報(bào)，1996，3（1）：73.

［3］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：215－216.

［4］ National Committee－for clinical Laboratory Standards.H30－A procedure for the determination of fibrinogen in plasma；Approved Guideline［M］.Wanye，PA，USA：CLSI，1999：99.

［5］ 陳喻，鐘輝秀.CA1500全自動(dòng)血凝儀測(cè)定纖維蛋白原兩種方法比較［J］.醫(yī)學(xué)信息，2011，24（8）：3801－3803.

［6］ 蘇奶助，溫燕芳.全自動(dòng)血液凝固分析儀兩種纖維蛋白原測(cè)定方法的評(píng)價(jià)及其應(yīng)用［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6（24）：2104－2105.