尾葉紫金牛化學(xué)成分研究Ⅰ

龐亞, 鄧赟, 毛艷蘋, 宋川霞, 戴宇, 陳晨

尾葉紫金牛（Ardisia caudata Hemsl.）系紫金?？谱辖鹋僦参?，主要分布于我國(guó)四川、貴州、云南、廣西、廣東（海南島未發(fā)現(xiàn)）。其根被作為民間和民族藥物，稱為尾葉紫金牛、峨眉紫金牛、紅豆子、點(diǎn)抵改房、兩遜（廣西金秀瑤族語(yǔ)譯音），味苦、辛；性寒。入肝、胃、脾、腎四經(jīng)。具有祛風(fēng)濕，解熱毒，止痛的功效；主治風(fēng)濕痹痛，咽喉腫痛，牙痛，胃痛，跌打骨折，淋巴結(jié)腫大[1]。迄今有關(guān)其化學(xué)成分研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為闡述其活性化學(xué)成分，首次對(duì)該植物的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。從尾葉紫金牛石油醚萃取部位分離得到5個(gè)化合物，經(jīng)理化性質(zhì)及波譜學(xué)鑒定依次為棕櫚酸⑴，谷甾醇⑵，菠甾醇⑶，紫金牛素E⑷，3-[(Z)-13-十七碳烯基]-2-羥基-5-甲氧基-對(duì)苯醌⑸?；衔?-5均為首次從該植物中分離得到?；衔?為帶長(zhǎng)脂肪鏈的苯酚類化合物，化合物5為帶長(zhǎng)脂肪鏈的苯醌類化合物。該兩類化合物均為紫金牛屬植物中具有特征性的化合物。

1 儀器與材料

Bruker Avance 600 spectrometer 核磁共振儀；X-4顯微測(cè)定熔點(diǎn)儀；UPT超純水器（成都超純科技有限公司）；TG16-W微量高速臺(tái)式離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；BP211D型電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；Sephadex LH-20（美國(guó)Pharmacia公司）；柱層析硅膠、薄層層析硅膠（青島海洋化工集團(tuán)有限公司）；試劑均為分析純(成都科龍化工試劑廠)。

尾葉紫金牛藥材于2011年6月采自四川峨眉山，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)峨眉學(xué)院祝世杰教授鑒定為紫金?？浦参镂踩~紫金牛(Ardisia caudate Hemsl.)全株。

2 提取與分離

自然陰干藥材全株 (2.50 kg)，粉碎過(guò)二號(hào)篩，80%乙醇滲濾提取，減壓回收溶劑后用水分散，依次用石油醚（沸程60-90 ℃）、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，減壓回收溶劑后得石油醚萃取物50 g，乙酸乙酯萃取物20 g，正丁醇萃取物65 g，水層200 g。石油醚萃取物經(jīng)硅膠柱色譜石油醚-乙酸乙酯(100:0-90:10)梯度洗脫后合并為6個(gè)部分。Fr5經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-丙酮(15:1-12:1-10:1)洗脫，合并得到3個(gè)部分；Fr5-1經(jīng)CH2Cl2重結(jié)晶得化合物1(7 mg)；Fr5-2經(jīng)薄層硅膠柱層析（CH2Cl2為洗脫劑）得到化合物2(100 mg)、化合物3(20 mg)；Fr5-3經(jīng)Sephadex LH-20(CHCl3∶MeOH=1∶1)純化得化合物4(780 mg)；Fr6放置后析出黃色結(jié)晶，用石油醚多次洗滌后經(jīng)石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到黃色片狀結(jié)晶化合物5(900 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色簇晶(MeOH)，mp59～60℃。溴甲酚綠試劑反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示為有機(jī)酸類物質(zhì)。ESI-MS: m/z 255[M-H]-。1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ2.34 (2H, t, J = 7.5 Hz, H-2)，1.63 (2H, m, H-3)，1.26 (brs, 24H, 4～15-H)，0.88 (3H, t, J = 7.0 Hz,H-16)。13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ179.68(C-1)，33.98(C-2)，31.92(C-3)，29.68，29.66，29.58，29.42，29.35，29.23，29.06，24.68(C-14)，22.68(C-15)，14.09(C-16)。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2]報(bào)道一致，故鑒定為棕櫚酸。

化合物2 白色結(jié)晶(CH2Cl2)，mp l36～137 ℃。5%香草醛濃硫酸顯紫紅色，放置變綠。該化合物與谷甾醇對(duì)照品共薄層檢測(cè)，其薄層行為與顯色反應(yīng)均與對(duì)照品完全一致，且混合熔點(diǎn)不下降，故確定為谷甾醇。

化合物3 無(wú)色針晶(CH2Cl2)，mp170～171℃。5%香草醛濃硫酸顯紫紅色，放置呈淺粉色。1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ5.16(2H, dd, J=14.6, 8.9Hz,22, 23-H)，5.03 (IH, dd, J=14.9, 8.6Hz, 7-H)，3.59(1H,m, 3-OH)，1.03(3H, d, J=6.6 Hz, 21-Me)，0.85(3H,d, J = 6.1 Hz, 27-Me)，0.81(9H, 3×Me)，0.55(3H, s,18-Me)。13C-NMR(151 MHz, CDCl3) δ139.56(C-8)，138.16(C-22)，129.44(C-23)，117.46(C-7)，71.07(C-3)，55.91(C-17)，55.14(C-14)，51.24(C-24)，49.46(C-9)，43.30(C-13)，40.81(C-20)，40.27(C-5)，39.47(C-12)，38.00(C-4)，37.14(C-1)，34.23(C-10)，31.87(C-25)，31.48(C-2)，29.62(C-6)，28.49(C-16)，25.39(C-28)，23.01(C-15)，21.56(C-11)，21.37(C-21)，21.08(C-27)，19.00(C-26)，13.04(C-19)，12.23(C-29)，12.05（C-18）。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]比較，基本一致，故鑒定為α-菠甾醇。

化合物4 白色蠟狀固體(CH2Cl2)，mp38～39℃。FeCl3乙醇溶液呈紫色，5%香草醛-濃硫酸呈深紅色，久置呈藍(lán)綠色。ESI-MS: m/z 395[M-H]-。結(jié)合碳譜數(shù)據(jù)推斷分子式可能為C24H40O2。從1H-NMR和13C- NMR可知分子中含有兩個(gè)化學(xué)環(huán)境相同的芳香質(zhì)子[δ6.23(s, 2H)，107.78(4, 6-C)]，兩個(gè)酚羥基[δ4.83(brs, 2H)，154.55(1, 3-C)]，一個(gè)甲基[δ2.10(s,3H)，7.72(2-Me)]及一條帶有不飽和雙鍵[5.34(m, 2H)]的長(zhǎng)鏈烯基。由ESI-MS: m/z 395 [M-H]-，可知該長(zhǎng)鏈為十七碳烯不飽和脂肪鏈。該長(zhǎng)鏈烯基的一端為端基甲基[δ0.88(t, 3H, J=6.8Hz)，14.10(17′-Me)]，另一端是連接苯環(huán)的亞甲基δ2.44(t, 2H, J=7.8Hz)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]比較，基本一致，故鑒定為Ardisin E。

化合物核磁數(shù)據(jù)如下：1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ6.23(2H, s, 4-H and 6-H)，5.34(2H, m, CH=CH)，4.83(2H, brs, 1-OH and 3-OH)，2.44(2H, t, J=7.8Hz,1′-H)，2.10(3H, s, 2-Me)，2.01(4H, dd, J=6.4, 12.5Hz,7′ and 10′-H)，1.55 (2H, m, 2′-H)，1.32-1.25(20H, m,3′～6′, 11′～14′,15′ and 16′-H），0.88(3H, t, J=6.8Hz,17′- Me)；13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ154.55(1,3-C)，141.98(5-C)，129.98(8′-C)，129.84(9′-C)，107.78(4, 6-C)，107.38(2-C)，35.51(1′-C)，31.91(15′-C)，31.17(2′-C)，27.20-29.77(3′～6′-C and 11′～14′-C)，27.20(7′-C,10′-C)，22.68(16′-C)，14.10(17′- C)，7.72(2-Me)。

化合物5 黃色片狀結(jié)晶(石油醚-丙酮)，黃色條狀結(jié)晶(CH3OH)，mp76～78 ℃。5%香草醛-濃硫酸呈紫色。ESI-MS: m/z 389 [M-H]-。結(jié)合1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)分析可知，該化合物為一個(gè)三取代的苯醌類化合物。δC181.66，182.81分別對(duì)應(yīng)兩個(gè)羰基碳信號(hào)。δ7.24(s, 1H)為芳香質(zhì)子，δ5.83( s, 1H)為芳環(huán)上取代的羥基質(zhì)子，[δ3.86(s, 3H)，δ56.72(6-MeO)]為芳環(huán)上的甲氧基取代，由一組數(shù)據(jù)δ5.34(m, 2H,CH=CH)，2.44(t, 2H, J=7.5 Hz)，2.01(q, 4H)，1.45(m,2H)，1.31-1.25(brs, 20H)，0.88(m, 3H)可知此為連接苯環(huán)的一條含不飽和雙鍵的長(zhǎng)鏈脂肪烴，并由質(zhì)譜推斷該脂肪長(zhǎng)鏈為十七碳烯。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]比較，可初步判斷母核為3-十七碳烯基-2-羥基-5-甲氧基-1,4-苯醌。由ESI-MS: m/z 389 [M-H]-，361 [M-H-C2H2]-片段可知，具不飽和雙鍵的長(zhǎng)鏈脂肪烴發(fā)生了一次β裂解，由此推斷雙鍵位置位于C13, 14位，故鑒定為3-[(Z)-13-heptadecenyl]-2-hydroxy-5-methoxy-p-benzoquinone。

化合物核磁數(shù)據(jù)如下：1H-NMR(600MHz, CDCl3)δ7.24(1H, s, 2-OH)，5.83(1H, s, 6-H)，5.34(2H, m,CH=CH)，3.86(3H, s, 5-MeO)，2.44(2H, t, J=7.5Hz，1′-H)，2.01(4H, q, 12′-H and 15′-H)，1.45(2H, m, 2′-H)，1.31-1.25(20H, brs, 3′～11′-H and 16′-H)，0.88(3H, m,17′-Me)。13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ182.81(C-1)，181.66(C-4)，161.16(C-6)，151.52(C-3)，129.90(C-14′)，129.84(C-13′)，119.26(C-2)，102.17(C-5)，56.72(6-MeO)，31.96-26.90(C2′～12′and C-15′)，22.62(C-16′)，22.33(C-1′)，13.96(C-17′)。

4 討論

紫金牛屬植物含有皂苷、苯酚、苯醌、香豆素等多種活性成分，其中苯酚及苯醌類化合物一般具有長(zhǎng)脂肪鏈等取代。現(xiàn)在研究表明，紫金牛屬植物中所含有的帶有長(zhǎng)脂肪鏈的苯酚及苯醌類的某些化合物具有抗腫瘤的活性。本實(shí)驗(yàn)中分離得到的化合物4為帶長(zhǎng)脂肪鏈的苯酚類化合物，化合物5為帶長(zhǎng)脂肪鏈的苯醌類化合物，有可能具有抗腫瘤活性，有待于進(jìn)一步研究。

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