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    阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑(14∶1)的含量均勻度測定和有關(guān)物質(zhì)檢查

    2013-09-14 02:03:46李靜玲李瑞明胡建楣林小鳳范佩冰
    中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2013年7期
    關(guān)鍵詞:維酸鉀懸劑均勻度

    李靜玲 李瑞明 馮 鵬 胡建楣 林小鳳 范佩冰

    1.廣東省廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院藥學(xué)部,廣東廣州 511400;2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部,廣東廣州 510080

    阿莫西林(Amoxicillin)(C16H19N3O5S)是一種最常用的青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素,半衰期約為61.3 min。阿莫西林殺菌作用強(qiáng),穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng),是目前應(yīng)用較為廣泛的口服青霉素之一,其制劑有膠囊、片劑、顆粒劑、分散片等。單獨(dú)用阿莫西林時(shí)容易產(chǎn)生耐藥性而降低藥物的療效;克拉維酸鉀(C8H9NO5)僅有微弱的抗菌活性,但可與多數(shù)的β-內(nèi)酰胺酶牢固結(jié)合,生成不可逆的結(jié)合物,具有強(qiáng)力而廣譜的抑制β-內(nèi)酰胺酶作用。阿莫西林制劑配合克拉維酸鉀使用時(shí)能有效穩(wěn)定阿莫西林,使其降解減少而療效增強(qiáng),且對(duì)革蘭陽性及革蘭陰性細(xì)菌均有效[1-3]。有關(guān)物質(zhì)是藥物中主要療效成分在儲(chǔ)存中產(chǎn)生或在原料制備中引進(jìn)的,說明了藥物對(duì)溫度、濕度、光等外在因素的穩(wěn)定度及藥物本身使用中的安全性。含量均勻度是藥物有效成分含量較小和比例較低時(shí),在制劑的制備中可能引起分布不均勻而影響藥物的質(zhì)量。本文主要針對(duì)制備的三批阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑(14∶1)的含量均勻度和有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測定,根據(jù)測定結(jié)果從而確定阿莫西林和克拉維酸含量均勻度和有關(guān)物質(zhì)符合制劑的控制指標(biāo)[4-5],從而說明其安全性和制劑工藝的可靠合理。

    1 儀器與試劑

    1.1 試驗(yàn)方法

    方法參照《中國藥典》2010年版二部。島津LC-10AT型高效液相色譜儀,SPD-10A 紫外檢測器,浙江大學(xué)N2000 色譜管理系統(tǒng), 色譜柱:Diamonsil C18,5 μm,4.6 mm×200 mm,北京迪馬公司,柱溫:室溫;pHS-10A 數(shù)字酸度計(jì)。

    1.2 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

    用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鈉7.8 g,加水900 mL 溶解,用磷酸或10 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH 值至(4.4±0.1),加水稀釋至1 000 mL)-甲醇(95∶5)為流動(dòng)相;流速:1.0 mL/min;檢測波長為 220 nm。阿莫西林峰與克拉維酸峰的分離度應(yīng)大于3.5,理論板數(shù)按阿莫西林及克拉維酸計(jì)算均應(yīng)不低于2 000。

    1.3 樣品來源

    本品所含的兩種組分阿莫西林和克拉維酸鉀均由江西制藥有限責(zé)任公司提供,批號(hào):200101003,含量:阿莫西林(C16H19N3O5S)為 77.32%;克拉維酸鉀(C8H9NO5K)以克拉維酸計(jì)為5.50%。經(jīng)按《中國藥典》2010年版二部檢驗(yàn)符合規(guī)定。阿莫西林600 mg(以無水物計(jì)):克拉維酸鉀42.9 mg(以克拉維酸計(jì)),樣品批號(hào):010506、010508、010510。阿莫西林對(duì)照品,批號(hào):0409-9907,含量84.5%;克拉維酸對(duì)照品,批號(hào):0429-9902,含量:91.3%,均由中國藥品生物制品檢定所提供。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 樣品含量均勻度

    本品為口服干混懸劑,每小包裝量為2 g,每小包中克拉維酸鉀(以克拉維酸計(jì))僅含42.9 mg,約占裝量的2.15%,按要求,需做含量均勻度檢查,參考《中國藥典》2010年版二部阿莫西林克拉維酸鉀片含量測定方法,制定本品克拉維酸鉀含量均勻度檢查方法如下:

    2.1.1 測定法 取本品1 小包,照含量均勻度測定法(《中國藥典》2010年版二部附錄Х E),置于500 mL 量瓶中,加水使溶解,并稀釋至刻度,搖勻。濾過,精密量取續(xù)濾液20 mL置25 mL 量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。取10 μL 注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取克拉維酸對(duì)照品適量,加水溶解,制成每毫升中約含克拉維酸0.07 mg 的溶液,同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中C5H9NO5的含量。三批樣品中克拉維酸鉀的含量均勻度[6-10],結(jié)果見表1。

    表1 三批克拉維酸鉀含量均勻度測定結(jié)果

    2.2 有關(guān)物質(zhì)

    2.2.1 試驗(yàn)方法 參照《中國藥典》2010年版二部收載品種阿莫西林克拉維酸鉀片的含量測定方法——高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版二部附錄Ⅴ D),確定本品有關(guān)物質(zhì)測定法為高效液相色譜法,其有關(guān)物質(zhì)的考察采用自身對(duì)照法,各種色譜條件同前述。

    2.2.2 測定法 精密吸取對(duì)照溶液10 μL,注入高效液相色譜儀,調(diào)節(jié)儀器靈敏度,使阿莫西林峰高約為滿量程的20%~25%。再精密吸取供試品溶液與對(duì)照溶液各10 μL,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的2.5倍,供試品溶液的色譜圖中各雜質(zhì)峰面積之和與對(duì)照溶液(1%)主峰面積之和相比,計(jì)算出有關(guān)物質(zhì)的量。采用自身對(duì)照法計(jì)算樣品中有關(guān)物質(zhì)的含量,計(jì)算結(jié)果見表2。

    表2 阿莫西林克拉維酸鉀(14∶1)干混懸劑有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果

    結(jié)果顯示,三批阿莫西林克拉維酸鉀(14∶1)干混懸劑的有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果均小于1%,符合要求。

    2.2.2 最低檢出量 取對(duì)照品溶液,逐級(jí)稀釋后,依上述有關(guān)物質(zhì)測定方法檢測,記錄色譜圖,以主峰響應(yīng)信號(hào)為噪聲3倍作為最小可檢測的信號(hào)(S/N≈3),當(dāng)對(duì)照品溶液中的克拉維酸稀釋至3.5 ng/mL 時(shí),得克拉維酸最低檢測量為0.035 ng。繼續(xù)稀釋,當(dāng)對(duì)照品溶液中的阿莫西林稀釋至5 ng/mL 時(shí),得阿莫西林最低檢測量為0.05 ng。色譜見圖1、2。

    圖1 克拉維酸最低檢出量HPLC圖譜

    圖2 阿莫西林最低檢出量HPLC圖譜

    3 討論

    干混懸劑是難溶性藥物與適宜輔料制成,并以干粉形式貯存,使用時(shí)加入溶液后則以混懸液形式供口服,因此特別適于對(duì)水、濕不穩(wěn)定的藥物。在臨床上干混懸劑對(duì)兒童和部分有吞咽困難的成人是值得研發(fā)的一種新劑型,同時(shí)是不穩(wěn)定的藥物在制劑中提高穩(wěn)定性的有效方法[11-12]。干混懸劑中有關(guān)物質(zhì)對(duì)制劑質(zhì)量影響重大,是藥品質(zhì)量穩(wěn)定性的一個(gè)重要指標(biāo)。多數(shù)有關(guān)物質(zhì)有確定的物質(zhì)來源和途徑,因此可以佐證制劑中的其他主要成分的變化。同時(shí)由于其含量微小,檢測方法必須選擇專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好的方法,本文選擇公認(rèn)的HPLC 方法對(duì)阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測。阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑是為了應(yīng)對(duì)阿莫西林的不穩(wěn)定性而制備的劑型,既有固體制劑(顆粒)的特點(diǎn),如方便攜帶,運(yùn)輸方便,穩(wěn)定性好等,又有液體制劑的優(yōu)勢,方便服用。本研究制劑是采用阿莫西林和克拉維酸鉀(14∶1)比例做成的干混懸劑,通過對(duì)其含量均勻度測定和有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行的研究,可以確定本品在制備、貯藏及使用過程中其含量均勻度和有關(guān)物質(zhì)質(zhì)量合格標(biāo)準(zhǔn),確保本品有效性和安全性。本文中所用方法對(duì)阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑(14∶1)中阿莫西林、克拉維酸鉀的含量均勻度和有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果表面制劑質(zhì)量合格,所以在制劑使用中阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑能確保它的有效性和安全性。此外,需要注意本文中干混懸劑放置2 h 后克拉維酸含量會(huì)有下降,所以測定中應(yīng)在樣品配制后2 h 內(nèi)完成。干混懸劑使用時(shí),一經(jīng)配置后也同樣應(yīng)盡快服用,以免溶液中不穩(wěn)定因素影響藥效而帶來不良反應(yīng)[13]。

    [1]國家藥典委員會(huì).中國藥典[S].二部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:230-232.

    [2]The United States Pharmacopeial Convention.United States Plarmacopeia (USP)Ⅺ Ⅻ [S].USP.2005:567.

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