北五味子木脂素對多炎癥模型的影響

谷丹丹 趙洪偉 張成義 陳 曦 王 松 (吉林省腫瘤醫(yī)院，吉林 長春 00)

現(xiàn)代研究表明炎癥是機體針對各種損傷因素所發(fā)生的反應。但婦科炎癥往往能加重病情，有些慢性炎癥還會導致腫瘤的發(fā)生。因此，對婦科炎癥的控制和治療具有重要意義〔1〕。北五味子木脂素為木蘭科落葉木質(zhì)藤本植物，是北五味子的主要化學成分〔2〕?，F(xiàn)代藥理學研究表明，北五味子木脂素對心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等有調(diào)節(jié)作用，并且在保護肝臟抗腫瘤、抑制潰瘍、抗氧化衰老和抗炎等方面也具有一定功效〔3〕。本次以婦科常見炎癥為理論依據(jù)設計多種炎癥模型，全面探究北五味子木脂素對炎癥的影響。

1 材料與方法

1.1 材料及試劑 Wistar雄性大鼠(清潔級)，體重180～200 g，合格證號:SCXK-(吉)-2007-0004號;ICR雄性小鼠(清結(jié)級)，體重20～22 g，合格證號:SCXK-(吉)-2007-0004號，所有試驗動物均由吉林大學白求恩醫(yī)學院實驗動物中心提供。北五味子木脂素由北華大學藥學院藥理教研室提供，阿司匹林購自南京白敬宇制藥有限責任公司，角叉菜膠及伊文氏藍購自美國sigma公司，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 大鼠角叉菜膠足跖腫脹試驗 取Wistar雄性大鼠50只，隨機分成五組:陰性對照組(生理鹽水)、陽性對照藥阿司匹林(0.2 g/kg)組、北五味子木脂素低、中、高劑量(0.3、0.6、1.2 g/kg)組，每組各10只。各組大鼠按1 ml/100 g灌胃給藥，1次/d，連續(xù)3 d。末次給藥后1 h，在大鼠右后足跖皮下注射新鮮配制的1%角叉菜膠混懸液0.1 ml致炎。采用大鼠足跖容積測量儀測定致炎前及致炎后0.5、1、2、3、4、6 h大鼠右后足容積。

1.2.2 二甲苯小鼠耳腫脹試驗 ICR雄性小鼠50只，按體重匹配隨機分成陰性對照組(生理鹽水)、陽性對照藥阿司匹林(0.2 g/kg)組、北五味子木脂素低、中、高劑量(0.4、0.8、1.6 g/kg)組，每組各10只。各組小鼠按0.2 ml/10 g灌胃給藥，1次/d，連續(xù)3 d。末次給藥后1 h，將二甲苯(0.03 ml)涂抹在小鼠右耳的前后兩側(cè)致炎，左耳不涂作為對照。在致炎后30 min，將小鼠脫頸處死，用打孔器(直徑6 mm)分別在左右耳同一部位沿耳廓線打下圓耳片，用電子天平稱重，求左右耳片重量之差，作為耳腫脹度。

1.2.3 小鼠腹腔毛細血管通透性試驗 ICR小鼠50只，雌雄各半，按性別、體重匹配隨機分成五組:與二甲苯小鼠耳腫脹試驗處理相同。末次給藥后1 h，小鼠尾靜脈注射伊文氏藍溶液(0.5%)0.1 ml/10 g，同時腹腔注射醋酸溶液(0.8%)0.2 ml/只。20 min后脫頸處死小鼠，用6 ml生理鹽水沖洗小鼠腹腔，收集沖洗液，3 000 r/min離心15 min，取上清液用紫外分光光度計于波長590 nm處測其吸光度值(OD)。根據(jù)小鼠腹腔液中的伊文氏藍含量判斷小鼠腹腔毛細血管通透性。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS13.0軟件進行分析，全部數(shù)據(jù)以±s表示;多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用Dunnett t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 北五味子木脂素對大鼠角叉菜膠足跖腫脹的影響 與陰性對照組相比，在致炎后0.5 h，北五味子木脂素各劑量組與阿司匹林對角叉菜膠引起的大鼠足腫脹沒有明顯的影響(P＞0.05);在致炎后1 h，北五味子木脂素高劑量組對角叉菜膠引起的大鼠足腫脹有抑制作用，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);在致炎后2～6 h，北五味子木脂素各劑量組均可較明顯的抑制角叉菜膠引起的大鼠足腫脹，且該類抗炎作用存在較好的量效關系。見表1。

表1 北五味子木脂素對角叉菜膠致足腫脹大鼠腫脹率的影響(%，n=10，±s)

表1 北五味子木脂素對角叉菜膠致足腫脹大鼠腫脹率的影響(%，n=10，±s)

與模型組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;下表同

組別時間(h)0.5 1 2 346 65 61.94±8.65 65.78±6.11北五味子木脂素低劑量組 13.07±0.78 20.13±2.66 32.10±1.752) 38.25±1.321) 49.55±0.671) 55.44±1.652)北五味子木脂素中劑量組 13.25±2.57 19.83±1.36 27.43±1.062) 35.28±0.812) 42.94±0.931) 52.93±1.442)北五味子木脂素高劑量組 13.63±2.78 17.87±1.241) 22.78±1.813) 34.04±1.392) 40.29±2.192) 50.40±0.872)阿司匹林組 12.31±2.25 18.82±2.611) 22.93±0.473) 35.38±0.682) 40.50±0.932) 51.20±0.452)陰性對照組 14.84±0.81 20.27±1.23 35.19±2.602 47.80±2.

2.2 北五味子木脂素對二甲苯小鼠耳腫脹的影響 與陰性對照組相比，北五味子木脂素各劑量組對小鼠耳腫脹度均有較明顯的抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)，且存在較好的量效關系。見表2。

表2 北五味子木脂素對小鼠耳腫脹及小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(±s，n=10)

表2 北五味子木脂素對小鼠耳腫脹及小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(±s，n=10)

與模型組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01

組別 給藥劑量(g/kg)耳腫脹度(mg)吸收度(OD)－ 13.06±1.40 0.174±0.019北五味子木脂素低劑量組 0.4 9.62±1.181)0.149±0.0182)北五味子木脂素中劑量組 0.8 7.87±1.512)0.141±0.0122)北五味子木脂素高劑量組 1.6 6.60±1.722)0.137±0.0132)阿司匹林組 0.2 5.73±0.741)0.139±0.0152)陰性對照組

2.3 北五味子木脂素對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響 與陰性對照組相比，北五味子木脂素各劑量組能夠較明顯的降低小鼠腹腔毛細血管通透性(P＜0.01)，且北五味子木脂素對該模型的抗炎作用存在一定的量效關系。

3 討論

炎癥是具有血管系統(tǒng)的組織對致炎因子的侵入所發(fā)生的防御反應，在婦科中常常表現(xiàn)為紅、腫、痛和功能障礙，隨著病程進展可引發(fā)其他諸多疾病，嚴重時可造成不孕甚至影響胎兒發(fā)育〔4〕。在一般的炎癥反應過程中，早期以變質(zhì)和滲出為主，病變后期以增生為主，炎癥的發(fā)生、發(fā)展過程分為三個時相〔5〕:第一時相是由于炎癥介質(zhì)的刺激，血管通透性增加引起血管內(nèi)容物滲入到組織間隙所造成，以毛細血管擴張和通透性增高、滲出和組織腫脹主;第二時相是由白細胞從血液滲透到組織間隙所造成的，以白細胞聚集為主;第三時相是肉芽腫的形成、纖維組織增生、炎癥局限為主，而婦科炎癥主要表現(xiàn)為前兩個時相。

由醋酸引起的毛細血管通透性增高和二甲苯所致的水腫屬于炎癥的第一時相，是炎癥過程中的早期病理變化。本次研究結(jié)果說明北五味子木脂素對急性炎癥具有一定的抑制作用，可能與抑制炎癥早期組織液的滲出有關。

角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹模型屬于炎癥的第二時相，中性粒細胞在吞噬角叉菜膠后釋放磷脂酶A2(PLA2)。細胞膜磷脂在PLA2的作用下，產(chǎn)成花生四烯酸(AA)。AA在環(huán)氧合酶(COX)的作用下，形成環(huán)內(nèi)過氧化物PGG2，之后轉(zhuǎn)化成PGH2。PGH2在還原酶和異構(gòu)酶的作用下，分別生成PGE2或PGF2a。此外，PGG2和PGH2還可以在血栓烷合成酶和前列腺素合成酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檠ㄍ锳2(TXA2)和前列環(huán)素(PGI2)。在眾多代謝產(chǎn)物中，PGE2是重要的炎癥介質(zhì)，可使局部毛細血管擴張，通透性增加，并作用于His、BK等炎癥介質(zhì)，導致發(fā)熱、痛覺過敏等，從而促進炎癥的發(fā)展〔6〕。本次研究結(jié)果提示北五味子木脂素的抗炎作用主要與抑制PGE2的合成有關，但同時可能對5-HT、His等炎癥介質(zhì)的釋放也有一定的抑制作用。

綜上所述，北五味子木脂素具有良好的抗炎作用，其抗炎作用機制主要與抑制炎癥介質(zhì)有關。本研究結(jié)果為臨床應用北五味子木脂素治療常見婦科炎癥打下了基礎，為后續(xù)開發(fā)提供了實驗依據(jù)。

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4 辛 穎.東北電力學院女職工婦女病普查情況分析〔J〕.北華大學學報(自然科學版)，2003;4(3):217-8.

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6 王春梅，崔新穎，李 賀.白芷香豆素的抗炎作用研究〔J〕.北華大學學報(自然科學版)，2006;7(4):318-20.