不同硒源及硒水平對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫功能和甲狀腺激素水平的影響

福 建 農(nóng) 林 大 學(xué) 林長(zhǎng)光 鄭金貴＊

福建光華農(nóng)牧科技開(kāi)發(fā)有限公司 林金玉 詹桂蘭 林棗友 陳文煥

廣 州 博 仕 奧 集 團(tuán) 劉東霞

硒是動(dòng)物機(jī)體的必需微量元素，具有提高機(jī)體抗氧化能力、免疫力，促進(jìn)生長(zhǎng)，改善肉質(zhì)等功能。硒的生物學(xué)功能主要通過(guò)各種硒蛋白（硒酶）表現(xiàn)出來(lái)。仔豬缺硒會(huì)引起白肌病、肝壞死、食欲下降和生長(zhǎng)遲緩。生產(chǎn)實(shí)踐中通常在日糧中添加一定量的外源硒來(lái)滿足仔豬健康的需要。但日糧硒在最佳濃度和致毒濃度之間的安全劑量較為狹窄，因此開(kāi)發(fā)低毒、高效的硒源一直是硒營(yíng)養(yǎng)研究的重點(diǎn)（徐輝碧和黃開(kāi)勛，1993）。目前主要有無(wú)機(jī)硒、有機(jī)硒及納米硒三種形式，但無(wú)機(jī)硒在使用中具有較強(qiáng)的毒性和較低的生物利用率，對(duì)動(dòng)物和環(huán)境可造成不良影響，因此一些國(guó)家已限制使用。與無(wú)機(jī)硒相比，有機(jī)硒（主要有蛋氨酸硒、酵母硒等）的吸收利用率較高，能更好地存留在動(dòng)物體內(nèi)（Manhan等，1999）。而納米硒是以大分子物質(zhì)（蛋白質(zhì)、糖類(lèi)等）為分散劑的納米級(jí)別的單質(zhì)硒，具有較高的生物活性、安全性、抗氧化性和高吸收率等特點(diǎn)，在動(dòng)物生產(chǎn)中具有廣泛的應(yīng)用前景。本試驗(yàn)在日糧中分別添加不同水平的納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉，研究不同硒源及硒水平對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、機(jī)體免疫能力和甲狀腺激素水平的影響，為合理利用各種硒源提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)動(dòng)物為杜長(zhǎng)大三元雜交斷奶仔豬。納米硒由廣州博仕奧生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，為納米級(jí)的單質(zhì)硒，淡紅色粉末，單質(zhì)硒含量為0.5%。酵母硒由北京奧特奇生物制品有限公司生產(chǎn)，有機(jī)硒含量為0.20%。亞硒酸鈉（Na2SeO3）由衡陽(yáng)市石鼓區(qū)華地飼料添加劑廠生產(chǎn)，飼料級(jí)，硒含量1%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)于2013年3月在福建光華農(nóng)牧科技開(kāi)發(fā)有限公司大湖豬場(chǎng)進(jìn)行。

選擇（28±3.5）日齡、平均初始體重為（8.50±0.52）kg健康的杜長(zhǎng)大三元雜交斷奶仔豬600頭，隨機(jī)分為10組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20頭仔豬，公母各半。

將試驗(yàn)豬個(gè)體稱(chēng)重，掛耳牌，分組，預(yù)飼期為7 d，預(yù)飼期結(jié)束時(shí)個(gè)體空腹稱(chēng)重，進(jìn)入試驗(yàn)期，試驗(yàn)期46 d。預(yù)飼期間，進(jìn)行必要的免疫、驅(qū)蟲(chóng)、保健。豬舍為雙列式，南北敞開(kāi)，水泥漏縫地面，每欄面積15 m2。日投喂料2次，每次投料以略有余料為準(zhǔn)，自由采食粉料，自動(dòng)飲水。每日清掃圈舍地面兩次，保持干凈。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)設(shè)10個(gè)組，1組為對(duì)照組，飼喂不添加硒源的日糧，2～10組為試驗(yàn)組，分別以亞硒酸鈉、酵母硒和納米硒為硒源，添加水平分別為 0.3、0.5、0.7 mg/kg（以硒計(jì)）。 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo) 預(yù)飼及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)豬只空腹16 h（只給飲水）后，于第二天上午逐只稱(chēng)重。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)統(tǒng)計(jì)各重復(fù)（欄）的耗料量和豬只的生長(zhǎng)情況。計(jì)算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.4.2 血清樣品采集 試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束稱(chēng)重后，于每個(gè)重復(fù)中選擇體重相近的1頭公豬和1頭母豬，前腔靜脈采血10 mL，置于空白離心管，經(jīng)3500 r/min離心15 min，分離獲得血清，-20℃條件下貯存，待測(cè)。

1.4.3 血清免疫球蛋白測(cè)定 血清中IgG、IgA、IgM含量采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定。血清中IgG、IgA、IgM與抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，洗滌，在酶的催化下顯色。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中IgG、IgA、IgM的濃度（試劑盒購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司）。

1.4.4 血清甲狀腺激素的測(cè)定 血清中3，5，3’-三碘甲腺原氨酸（T3）、3，5，3’，5’-四碘甲腺原氨酸（T4）含量的測(cè)定，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），血清中T3/T4與抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，洗滌，在酶的催化下顯色，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中T3/T4的濃度（試劑盒購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司）。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel整理，并采用SPSS 16.0軟件包中的ANOVA程序進(jìn)行方差分析，采用Duncan’s法對(duì)各組平均數(shù)進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響從表2可以看出，不同硒源及硒水平的各組間仔豬平均日采食量差異不顯著（P＞0.05），但納米硒組中0.3、0.5 mg/kg硒水平和酵母硒組0.5 mg/kg硒水平的試驗(yàn)組日增重分別比對(duì)照組提高10.24%、13.08%和 10.45%，差異顯著（P ＜0.05），另外0.5 mg/kg納米硒組與0.7 mg/kg亞硒酸鈉組相比，日增重高了10.60%，差異顯著（P＜0.05）。0.3、0.5 mg/kg酵母硒添加組和納米硒各水平組的平均料重比均顯著低于對(duì)照組和0.7 mg/kg亞硒酸鈉組（P ＜ 0.05）。

表2 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬血清免疫球蛋白含量的影響 由表3可見(jiàn)，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各組仔豬血清中IgA含量與對(duì)照組相比差異均不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，硒源對(duì)仔豬血清IgA含量影響極顯著（P＜0.01），硒水平、硒源和水平間的交互作用對(duì)IgA無(wú)顯著影響 （P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組仔豬血清IgA含量較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)有所升高，尤其是納米硒組和酵母硒組升高較明顯。納米硒組和酵母硒組仔豬血清IgA含量分別高于對(duì)照組23.15%和17.28%，高于亞硒酸鈉組21.36%和15.57%，均差異極顯著（P＜0.01），納米硒組和酵母硒組間差異不顯著（P＞0.05）。從不同硒源和水平分析，納米硒組各水平組和0.5、0.7 mg/kg酵母硒組仔豬血清IgA含量顯著高于對(duì)照組和亞硒酸鈉各水平組（P＜0.01）。納米硒組和酵母硒組中，0.5 mg/kg硒水平組和0.7 mg/kg硒水平組間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各組間仔豬血清中IgG含量及其與對(duì)照組間均無(wú)顯著差異（P ＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，硒源對(duì)仔豬血清IgG含量影響極顯著 （P ＜0.01），硒水平、硒源和水平間的交互作用對(duì)IgG無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，納米硒組和酵母硒組仔豬血清IgG含量比對(duì)照組分別提高10.79%（P ＜ 0.01）和 7.79%（P ＜ 0.05），比亞硒酸鈉組分別提高14.14%和11.06%，差異極顯著（P ＜0.01）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組和亞硒酸鈉各水平組仔豬血清IgG含量較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)均有所下降，而納米硒組和酵母硒組在保持血清IgG含量的基礎(chǔ)上均有所升高，尤其是0.5 mg/kg硒水平的納米硒組仔豬血清IgG含量極顯著升高，較對(duì)照組提高 14.11%（P＜0.01）。

試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各組間仔豬血清中IgM含量及其與對(duì)照組間均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，硒源、硒水平、硒源和水平間的交互作用對(duì)仔豬血清IgM含量均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，納米硒組和酵母硒組仔豬血清IgM含量分別較對(duì)照組高12.32%（P＜0.01）和10.13%（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，除納米硒各水平組和0.3、0.5 mg/kg硒水平的酵母硒組仔豬血清IgM含量較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)略有升高外，其余各組均略有下降，其中0.3、0.5 mg/kg硒水平的納米硒組和0.5 mg/kg硒水平的酵母硒組與對(duì)照組相比，分別提高了16.69%、14.11%和 15.48%，差異顯著（P ＜0.05）。

2.3 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬血清甲狀腺激素水平的影響 由表4可見(jiàn)，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各組間仔豬血清中T3含量及其與對(duì)照組間均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，硒源、硒水平對(duì)仔豬血清T3含量影響極顯著（P＜0.01），硒源和水平間的交互作用對(duì)血清T3含量無(wú)顯著影響 （P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，除對(duì)照組外，各組仔豬血清T3含量均較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)略有提高。納米硒組仔豬T3含量與對(duì)照組、亞硒酸鈉組和酵母硒組相比，分別高了18.92%、17.07%和 5.74%，差異極顯著（P＜0.01）。從硒水平分析，隨著硒水平的提高，仔豬血清T3含量也隨著升高，與0.3 mg/kg硒水平組相比，0.5 mg/kg硒水平組提高了 8.46%（P＜0.05），0.7 mg/kg硒水平組提高了9.89%（P＜0.01）。從不同硒源和水平分析，納米硒組中，0.5、0.7 mg/kg硒水平組仔豬血清T3含量與對(duì)照組相比，分別提高了23.08%和24.08%，差異極顯著（P＜0.01）；與亞硒酸鈉各水平組相比差異極顯著（P＜0.01）。

表3 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬血清免疫球蛋白含量的影響

試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各組間仔豬血清中T4含量及其與對(duì)照組間均無(wú)顯著差異 （P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，硒源、硒水平、硒源和水平間的交互作用對(duì)仔豬血清T4含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，納米硒組中0.5、0.7 mg/kg硒水平組仔豬血清T4含量較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)有明顯的下降，但與對(duì)照組相比差異不顯著 （P＞0.05）。酵母硒各水平組仔豬血清T4含量較試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)無(wú)明顯變化。

3 討論

3.1 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響硒可調(diào)節(jié)甲狀腺素、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的活性，能增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體對(duì)糖原、蛋白質(zhì)、脂肪的分解，有利于機(jī)體能量的供給，促進(jìn)生長(zhǎng)（倪銀星，2002）。另外，硒還能提高動(dòng)物機(jī)體抗應(yīng)激、抗氧化及免疫功能，間接地達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)作用（Raymond和Burk，2002）。 張乙山等（2008）報(bào)道，將納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉三種硒源分別以 0.3、0.5、0.8 mg/kg三個(gè)水平飼喂生長(zhǎng)育肥豬，其生長(zhǎng)性能差異不顯著（P＞0.05），但酵母硒和納米硒的添加提高了日增重并降低料重比，有提高生長(zhǎng)性能的趨勢(shì)。王秀娜等（2010）將納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉三種硒源分別以0.1、0.3、0.5 mg/kg三個(gè)水平添加到斷奶仔豬日糧中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.3 mg/kg和0.5 mg/kg的納米硒組和0.3 mg/kg酵母硒組的平均日增重和日采食量均顯著高于無(wú)機(jī)硒組，0.5 mg/kg納米硒組和0.3 mg/kg酵母硒組的料重比顯著低于無(wú)機(jī)硒組；納米硒組中0.3、0.5 mg/kg硒水平和酵母硒組0.5 mg/kg硒水平的試驗(yàn)組日增重分別高于對(duì)照組10.24%、13.08%和 10.45%，差異顯著（P ＜ 0.05）；酵母硒源0.3、0.5 mg/kg硒水平組和納米硒源各硒水平組的平均料重比均顯著低于對(duì)照組和0.7 mg/kg亞硒酸鈉組（P＜0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果與報(bào)道相符，可見(jiàn)日糧中添加酵母硒或納米硒能夠提高仔豬的日增重，降低料肉比，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。

表4 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬血清甲狀腺激素水平的影響

3.2 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬免疫球蛋白含量的影響 由漿細(xì)胞產(chǎn)生具有免疫功能的球蛋白（抗體）是體液免疫的關(guān)鍵，研究發(fā)現(xiàn)硒能增強(qiáng)體液免疫功能，刺激免疫球蛋白形成。大量試驗(yàn)研究表明，硒能提高畜禽體內(nèi)的吞噬細(xì)胞數(shù)量、促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖及畜禽抗體和免疫球蛋白的合成，提高畜禽機(jī)體的免疫機(jī)能。Julian等（1973）研究證明，鼠日糧里添加亞硒酸鈉提高了IgG、IgM抗體滴度。高學(xué)云等（2000）研究表明，納米硒高劑量組小鼠的細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能和巨噬細(xì)胞吞噬功能明顯升高，而亞硒酸鈉各劑量組的上述免疫指標(biāo)無(wú)明顯變化，表明納米硒對(duì)小鼠免疫功能有明顯的調(diào)節(jié)作用。胥保華（2003）報(bào)道，納米硒添加水平為 0.2、0.3、0.4、0.5 mg/kg 的各組血清IgG、IgM含量顯著高于硒代蛋氨酸組和亞硒酸鈉組（P＜0.05）。王秀娜等（2010）在斷奶仔豬日糧中分別添加納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉三種硒源，添加水平并分別為 0.1、0.3、0.5 mg/kg，結(jié)果表明，血清中IgA、IgG、IgM和C3的水平均以0.5 mg/kg的納米硒組最高，且顯著高于納米硒、酵母硒、亞硒酸鈉的0.1 mg/kg水平添加組，也顯著高于0.5 mg/kg的亞硒酸鈉組及對(duì)照組。袁施彬等（2008）研究報(bào)道，在日糧中添加0.6 mg/kg的硒，能使豬日增重提高，料肉比降低；IgG、IgA和IgM水平提高，豬瘟抗體滴度隨著試驗(yàn)期的延長(zhǎng)，幾乎呈直線上升，在免疫后28 d，陽(yáng)性保護(hù)率達(dá)到100%。本試驗(yàn)研究表明，納米硒和酵母硒能有效提高血清中IgA、IgG、IgM抗體滴度，高于或顯著高于對(duì)照組和亞硒酸鈉組，與相關(guān)試驗(yàn)報(bào)道一致，說(shuō)明日糧中添加硒可提高動(dòng)物機(jī)體的免疫性能，且納米硒和酵母硒的效果要優(yōu)于亞硒酸鈉。

3.3 不同硒源和硒水平對(duì)仔豬血清甲狀腺激素水平的影響 硒是甲狀腺原氨酸脫碘酶I（ID-I）的主要組成成分，控制著機(jī)體甲狀腺激素、T3的活性。ID-I主要存在于肝、腎組織中，能催化T4脫碘轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚詮?qiáng)的T3。缺硒導(dǎo)致脫碘酶Ⅰ活性下降，降低了T4向T3的轉(zhuǎn)化速度，使血液中T3下降而T4上升，引起動(dòng)物生長(zhǎng)受阻。熊莉等（2004）報(bào)道，硒添加濃度為0.3～1.0 mg/kg時(shí)，納米硒組脫碘酶Ⅰ活性和血清T3水平顯著高于亞硒酸鈉組（P＜0.05），血清T4水平顯著低于亞硒酸鈉組（P＜0.05）。本試驗(yàn)研究表明，隨著硒水平的升高，T3濃度也隨著升高，納米硒組中，0.5、0.7 mg/kg硒水平組仔豬血清T3含量分別高于對(duì)照組23.08%和24.08%，差異極顯著（P＜0.01），和亞硒酸鈉各組相比，差異極顯著（P＜0.01）；T4濃度隨著硒水平的升高而降低，但納米硒組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P ＞ 0.05）。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加硒可以提高仔豬的免疫功能，且納米硒和酵母硒的效果優(yōu)于亞硒酸鈉。隨著日糧中硒水平的提高，血清中T3濃度也隨著升高，而T4濃度隨之下降，促進(jìn)了仔豬的生長(zhǎng)。綜合各項(xiàng)指標(biāo)分析納米硒和酵母硒的添加水平為0.5 mg/kg和0.7 mg/kg效果較好。

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