十雄角果木樹皮的化學成分研究

王 慧 ，鄒 坤，吳 軍

（1.三峽大學 天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點實驗室，湖北 宜昌 443002；2.暨南大學 藥學院 海洋藥物研究中心，廣州 510632）

角果木屬（Ceriops）植物為生長在熱帶、亞熱帶海岸潮間帶的紅樹科（Rhizophoraceae）真紅樹植物.該屬植物全球有5 個種，即角果木（Ceriops tagal）、十雄角果木（C.decandra）、澳洲角果木（C.australis）、C.zippeliana和C.pseudodecandra.角果木和十雄角果木廣泛分布于非洲、馬達加斯加、南亞的沿海及南太平洋島嶼上；澳洲角果木僅分布于澳洲的中部地區(qū)；C.zippeliana分布于東南亞；而C.pseudodecandra主要分布于澳大利亞、新幾內(nèi)亞和斯蘭島［1－4］.該屬植物在我國有一個物種，即角果木，僅分布于海南島［5－6］.在我國，角果木的葉子煎熬后用于治療瘧疾［3－4］；在印度，十雄角果木作為一種民間草藥用于治療腹瀉、阿米巴病、出血和惡性潰瘍［5］.研究表明，二萜和三萜為角果木屬植物C.decandra的主要次級代謝產(chǎn)物類型［7－11］.為了深入地研究十雄角果木的化學成分，本實驗首次對該植物樹皮的95%乙醇提取物進行了研究，從其氯仿萃取部位共分離鑒定了6個化合物，分別 為：（－）－丁 香樹脂 酚（1），（－）－松脂酚（2），β－谷甾醇（3），豆甾醇（4），棕櫚酸（5）和3，4－二羥基苯甲酸乙酯（6）.

1 儀器與材料

Bruker AV－400核磁共振儀，Bruker AV－500核磁共振儀（TMS 為內(nèi)標，瑞士Bruker 公司）；SHMADZU LC－6AD控制器；SPD－20A檢測器，日本島津公司；色譜柱為YMC－Pack ODS－5－A（250mm×10mm i.d.，5μm，半制備型；250mm×4.5mm i.d.，5μm，分析型）；AB API 2000液質(zhì)聯(lián)用儀；Perkin－Elmer Model 341旋光測定儀；薄層硅膠GF254和柱色譜硅膠（100～200目）為青島海洋化工廠產(chǎn)品；ODS反相硅膠為日本YMC公司產(chǎn)品；高效液相色譜所用試劑為色譜純，其余均為分析純.

實驗材料于2009年采集于印度Godavari河口紅樹林濕地，并經(jīng)由印度紅樹植物分類學家Mr.Tirumani Satyanandamurty鑒定為十雄角果木Ceriopsdecandra（Griff.）Ding Hou的樹皮.該植物標本編號為NO.CD001，存放于暨南大學藥學院海洋藥物研究中心.

2 提取與分離

干燥十雄角果木樹皮7.4kg粉碎后，用95%乙醇浸提5次，每次48h.提取液合并后減壓蒸干.提取物經(jīng)水混懸后，分別用醋酸乙酯、正丁醇萃取3次.取醋酸乙酯部位浸膏加水混懸，氯仿萃取得到氯仿萃取部位浸膏65.2g.該部位浸膏經(jīng)正相硅膠柱色譜分離，石油醚－丙酮系統(tǒng)［100∶0（10.0 L），100∶1（10.0L），50∶1（10.0L），30∶1（10.0L），20∶1（10.0L），10∶1（10.0L），5∶1（10.0L），3∶1（10.0L），2∶1（10.0L），1∶1（10.0L），1∶2（10.0L），V／V］梯度洗脫得到285個流分.流分78～113合并后，經(jīng)反相硅膠柱色譜［丙酮－水系統(tǒng)，30∶70（3.5L），45∶55（3.5 L），60∶40（3.5L），75∶25（3.5L），90∶10（3.5L），100∶0（4.0L），V／V］和重結(jié)晶（氯仿），得到化合物3（5.4mg）和4（5.3mg）.流分173～204合并后，經(jīng)反相硅膠柱色譜［丙酮－水系統(tǒng)，45∶55（1.0L），60∶40（1.0L），75∶25（1.0L），90∶10（1.0L），100∶0（1.5L），V／V］和重結(jié)晶（丙酮），得到化合物5（4.6 mg）.流分214～238合并后，經(jīng)反復HPLC 制備（YMC－Pack 250×10 mm i.d.，YMC－Pack 250×4.6mm i.d.，32∶68的乙腈－水；40∶60的甲醇－水，V／V）得到化合物1（5.2mg，22 min），2（4.9 mg，26 min）和6（3.5 mg，45min）.化合物1～化合物6 的結(jié)構(gòu)如圖1所示.

圖1 化合物1～6的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structures of compounds 1～6

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色固體，［α］25D－28.4（c0.38，丙酮），分子式：C22H26O8.ESIMS（m／z）：441.0［M＋Na］＋，417.3［M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）：δH6.59 （4H，s，H－2，2’，6，6’），5.50（2H，s，－OH），4.74（2H，d，J＝4.4 Hz，H－7，7’），4.29（2H，dd，J＝8.8，6.8 Hz，H－9e，9’e），3.91（2H，dd，J＝6.8，4.0Hz，H－9a，9’a），3.91 （12H，s，3，3’，5，5’－OMe），3.10（2H，m，H－8，8’）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）：δC147.2（C－3，3’，5，5’），134.3（C－4，4’），132.1（C－1，1’），102.8（C－2，2’，6，6’），86.1（C－7，7’），71.8（C－9，9’），56.4（3，3’，5，5’－OMe），54.4（C－8，8’）.以上數(shù)據(jù)與文獻［12］報道一致，故鑒定化合物1為（－）－丁香樹脂酚.

化合物2：無色固體，［α］25D－14.0（c0.35，丙酮），分子式：C20H22O6.ESIMS（m／z）：381.0［M＋Na］＋，357.2［M－H］－.1H NMR（400 MHz，CDCl3）：δH6.90（2H，d，J＝2.0Hz，H－2，2’），6.88（2H，s，H－5，5’），6.82（2H，dd，J＝8.0，2.0Hz，H－6，6’），5.60（2H，s，－OH），4.74（2H，d，J＝4.4Hz，H－7，7’），4.25（2H，dd，J＝9.0，6.8Hz，H－9e，9’e），3.88（2H，dd，J＝9.2，3.6Hz，H－9a，9’a），3.91（12H，s，3，3’，5，5’－OMe），3.10（2H，m，H－8，8’）.13C NMR（100 MHz，CDCl3）：δC146.7（C－3，3’），145.3（C－4，4’），133.0（C－1，1’），119.0（C－6，6’），114.3（C－5，5’），108.6（C－2，2’），85.9（C－7，7’），71.7（C－9，9’），56.0（3，3’－OMe），54.2（C－8，8’）.以上數(shù)據(jù)與文獻［13］報道一致，故鑒定化合物2為（－）－松脂酚.

化合物3：無色針狀晶體（氯仿），分子式：C30H52O.薄層色譜檢識，其Rf值在多個溶劑系統(tǒng)中與β－谷甾醇標準品一致，且1H NMR （500 MHz，CDCl3）：δH5.35（1H，br s，H－6），3.52（1H，m，H－3），1.01（6H，s，H3－19，26），0.98（3H，s，H3－21），0.88 （3H，J＝6.7 Hz，H3－28），0.85（3H，s，H3－22），0.82（3H，J＝6.7 Hz，H3－29）.以上數(shù)據(jù)與文獻［14］報道一致，故鑒定化合物3為β－谷甾醇.

化合物4：無色針狀晶體（氯仿），分子式：C30H50O.薄層色譜檢識，其Rf值在多個溶劑系統(tǒng)中與豆甾醇標準品一致，且1H NMR （500 MHz，CDCl3）：δH5.35（1H，br s，H－6），5.15（1H，dd，J＝15.0，8.5 Hz，H－22），5.12（1H，dd，J＝15.0，8.5 Hz，H－23），3.55（1H，m，H－3），1.01（6H，s，H3－19，26），0.98（3H，s，H3－21），0.83（3H，s，H3－22），0.80 （3H，s，H3－28），0.70（3H，s，H3－29）.以上數(shù)據(jù)與文獻［14］報道一致，故鑒定化合物4為豆甾醇.

化合物5：無色片狀晶體（丙酮），分子式：C16H32O2.ESIMS（m／z）：255.3 ［M－ H］－.1H NMR（400MHz，CDCl3）：δH0.88（3H，m，H3－16），1.63（2H，m，H－15），2.35（2H，m，H－2）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）：δC179.9（C－1），34.0（C－2），24.7（C－3），31.9（C－14），22.7（C－15），14.1（C－16）.以上數(shù)據(jù)與文獻［15］報道一致，故鑒定化合物5為棕櫚酸.

化合物6：無色固體，分子式：C9H10O4.ESIMS（m／z）：181.1 ［M－ H］－，217.0 ［M ＋Cl］－.1H NMR（400 MHz，DMSO－d6）：δH7.35（d，J＝2.1 Hz，H－3），7.30（dd，J＝8.2，2.1 Hz，H－5），6.79 （d，J＝8.2 Hz，H－6），4.22（2H，dd，J＝14.2，7.1 Hz，OCH2CH3），1.28（3H，t，J＝7.1 Hz，OCH2CH3）.以上數(shù)據(jù)與文獻［16］報道一致，故鑒定化合物6為3，4－二羥基苯甲酸乙酯.

4 結(jié)語

本實驗首次對十雄角果木樹皮的化學成分進行了研究.從其95%乙醇提取物的氯仿萃取部位共分離鑒定了6個化合物，包括2個木脂素類化合物，2個甾體類化合物，1個脂肪酸和1個苯甲酸酯衍生物.所有化合物均為首次從該屬植物中分離得到.

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