滇黃芩根化學(xué)成分的研究

付勝男，李欣坪，王蒙蒙，方瓊蓮，潘 蕊，林玉萍

（云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南 昆明 650500）

滇黃芩Scutellaria amoena C.H.Wright 為唇形科黃芩屬植物的干燥根，是云南道地藥材，藥用歷史悠久，為彝族、白族、納西族、僳僳族、藏族等少數(shù)民族的藥用資源［1-2]，據(jù)明朝地方本草《滇南本草》 和彝醫(yī)古籍《聶蘇諾期》 《啟谷署》 記載，其性寒，味苦，歸肺、肝、膽、胃、大腸路，具有清肺胃熱，燥濕氣、消炎、解毒、安胎、止血等功效［3-4]。劉海鷗等［5]發(fā)現(xiàn)，滇黃芩總黃酮具有較強(qiáng)的抗氧化活性；何曉山等［6-7]發(fā)現(xiàn)，滇黃芩總黃酮具有抗心律失常和阻滯豚鼠心肌細(xì)胞鈉通道作用，可作為穩(wěn)定的豚鼠心肌組織鈉通道阻斷劑。為進(jìn)一步開發(fā)民族藥用資源，闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實驗對滇黃芩地下部分90%乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行研究，并運用多種色譜學(xué)分離手段和波譜學(xué)鑒定方法，從其根部分離鑒定20 個黃酮類化合物，其中化合物4、12為首次從滇黃芩根莖中得到，5、8、10、13、15～18為首次從該植物中得到。

1 材料

AV-400MHz 型超導(dǎo)核磁共振譜儀（瑞士Bruker 公司）；顯微熔點儀（溫度未校正，日本Yanaco 公司）；Mat-95 質(zhì)譜儀（美國Finnigan 公司）；Sephadex LH-20 柱（瑞典Pharmacia 公司）；柱層析硅膠（200～300、300～400 目）、薄層層析硅膠H（青島海洋化工廠）；氘代試劑（美國CIL公司）。所用試劑均為分析純（中國天津市化學(xué)試劑一廠）或工業(yè)純（云南汕滇藥業(yè)有限公司）。

滇黃芩于2017 年采自云南省新平縣，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)普春霞副教授鑒定為唇形科植物滇黃芩Scutellaria amoena C.H.Wright 的根部。

2 提取與分離

滇黃芩地下部分粗粉（4.9 kg）以90%乙醇加熱回流提取4 次，回收溶劑得醇提浸膏（901.5 g），醇提浸膏溶解懸浮于水溶液中，用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，回收溶劑，得Fr.A 乙酸乙酯部分浸膏（150 g）；剩余水液繼續(xù)用正丁醇萃取3次，合并3 次萃取液，回收溶劑，得Fr.B 正丁醇浸膏（225 g）。

Fr.A 經(jīng)硅膠柱，以石油醚、石油醚-乙酸乙酯（100∶1～5∶1）、三氯甲烷-甲醇（100∶1～1∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC 檢查合并為15 個流分A-1～A-15。其中A-4 流分經(jīng)硅膠柱，石油醚-乙酸乙酯（30∶1～10∶1）梯度洗脫得8 個流分，流分1 經(jīng)硅膠柱，石油醚-乙酸乙酯（30∶1）洗脫，得化合物18（7.3 mg）；流分3 經(jīng)Sephadex LH-20 柱純化，丙酮洗脫得化合物15（21 mg）；流分5 經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（20∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物5（15.2 mg）；流分8 經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（20∶1）洗脫，再經(jīng)Sephadex LH-20 純化，丙酮洗脫得化合物1（20.5 mg）。其中A-7 流分經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（40∶1～10∶1）梯度洗脫得11 個流分，流分4 經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（10∶1）洗脫，再經(jīng)Sephadex LH-20 純化，三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫得化合物12（48.1 mg）；流分5 經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（20∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物8（35.2 mg）；流分9 經(jīng)硅膠柱，石油醚-乙酸乙酯（30∶1）洗脫，經(jīng)Sephadex LH-20 柱純化，丙酮洗脫得化合物3（24.3 mg）；流分10 經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（10∶1）洗脫，再重結(jié)晶純化，得化合物6（18.4 mg）。其中A-9 流分經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（50∶1～10∶1）梯度洗脫得7 個流分，流分2 經(jīng)Sephadex LH-20 純化丙酮洗脫，再經(jīng)硅膠柱，環(huán)己烷-乙酸乙酯（20∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物9（26.2 mg）。其中A-12 流分經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（20∶1～3∶1）梯度洗脫得5 個流分，流分1 經(jīng)Sephadex LH-20 純化三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫，得化合物4（20.4 mg）；流分3 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（8∶1），再經(jīng)Sephadex LH-20 純化三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫，重結(jié)晶得化合物13（12.8 mg）；流分5 經(jīng)Sephadex LH-20 純化三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫，再經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（10∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物2（36.2 mg）。

Fr.B 組分經(jīng)硅膠柱，以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇（100∶1～1∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC 檢查合并劃分為8 個流分B-1～B-8。其中B-1 流分經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（80∶1～30∶1）梯度洗脫得6個流分，流分2 經(jīng)Sephadex LH-20 柱丙酮洗脫，再經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（50∶1）純洗脫得化合物11（14.2 mg）。其中B-3 流分經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（60∶1～1∶1）梯度洗脫得9 個流分，流分4 經(jīng)Sephadex LH-20 和硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（40∶1）洗脫純化，得化合物17（22.5 mg）；流分6 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（40∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物19（19.6 mg）；流分8 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（20∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物14（30.6 mg）。其中B-5 流分經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（40∶1～5∶1）梯度洗脫得4 個流分，流分3 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（30∶1）洗脫純化，再Sephadex LH-20 純化，三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫得化合物10（17.4 mg）。其中B-7 流分經(jīng)硅膠柱，三氯甲烷-甲醇（30∶1～2∶1）梯度洗脫得8 個流分，流分1 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物16（13.1 mg）；流分5 經(jīng)硅膠柱三氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脫純化，再經(jīng)Sephadex LH-20 純化，三氯甲烷-甲醇（3∶2）洗脫，重結(jié)晶得化合物12（11.8 mg）；流分7 經(jīng)硅膠，三氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脫純化和重結(jié)晶，得化合物20（8.9 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色結(jié)晶（丙酮），EI-MS m/z：270.2［M]+，分子式 C15H10O5。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.90（2H，m，H-2′，6′），7.30（3H，m，H-3′～5′），7.19（1H，s，H-3），6.55（1H，s，H-8）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：164.3（C-2），105.4（C-3），183.5（C-4），147.2（C-5），131.4（C-6），154.9（C-7），95.0（C-8），150.8（C-9），104.1（C-10），133.1（C-1′），127.0（C-2′，6′），129.3（C-3′，5′），132.4（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8] 基本一致，故鑒定為黃芩素。

化合物2：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：446.4［M]+，分子式C21H18O11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：8.09（2H，m，H-2′，6′），7.58（3H，m，H-3′～5′），7.06（1H，s，H-3），6.81（1H，s，H-8），5.26（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.05～3.18（6H，m，H-2″～6″）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：163.4（C-2），108.5（C-3），183.7（C-4），152.5（C-5），131.2（C-6），155.8（C-7），94.7（C-8），152.0（C-9），103.4（C-10），132.4（C-1′），127.2（C-2′，6′），130.0（C-3′，5′），132.1（C-4′），100.5（C-1″），74.1（C-2″），76.8（C-3″），72.5（C-4″），76.9（C-5″），170.2（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4] 基本一致，故鑒定為黃芩苷。

化合物3：黃色粉末（氯仿），EI-MS m/z：284.3［M]+，分子式 C16H12O5。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.88（2H，m，H-2′，6′），7.34（3H，m，H-3′～5′），6.57（1H，s，H-3），6.55（1H，s，H-8），3.94（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：162.3（C-2），108.6（C-3），183.4（C-4），154.3（C-5），130.4（C-6），157.2（C-7），93.8（C-8），152.4（C-9），105.6（C-10），131.3（C-1′），119.4（C-2′，6′），128.3（C-3′，5′），132.4（C-4′），59.5（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) ［9] 基本一致，故鑒定為千層紙素A。

化合物4：白色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：460.4［M]+，分子式C22H20O11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.86（2H，d，J=7.8 Hz，H-2′，6′），7.58（3H，m，H-3′～5′），6.58（1H，s，H-3），6.14（1H，s，H-8），4.63（1H，d，J=7.6 Hz，H-1″），4.50～4.13（4H，m，H-2″～5″），3.76（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：161.4（C-2），100.6（C-3），182.8（C-4），153.2（C-5），133.9（C-6），155.9（C-7），94.7（C-8），157.0（C-9），104.7（C-10），131.8（C-1′），122.5（C-2′，6′），129.6（C-3′，5′），133.4（C-4′），100.7（C-1″），73.8（C-2″），77.3（C-3″），70.1（C-4″），77.7（C-5″），169.0（C-6″），60.4（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10] 基本一致，故鑒定為千層紙素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物5：淺黃色結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：474.4［M]+，分子 式C23H22O11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.90（2H，d，J=8.1 Hz，H-2′，6′），7.43（3H，m，H-3′～5′），6.95（1H，s，H-3），6.10（1H，s，H-8），4.93（1H，d，J=7.6 Hz，H-1″），4.53～4.20（4H，m，H-2″～5″），3.78（3H，s，6-OCH3），3.45（3H，s，6″-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：169.6（C-2），101.6（C-3），182.9（C-4），153.0（C-5），132.9（C-6），156.6（C-7），94.4（C-8），157.3（C-9），106.4（C-10），132.9（C-1′），120.9（C-2′，6′），129.0（C-3′，5′），133.5（C-4′），99.8（C-1″），73.3（C-2″），76.1（C-3″），71.8（C-4″），75.7（C-5″），169.6（C-6″），60.8（6-OCH3），52.4（6″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11] 基本一致，故鑒定為千層紙素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷甲酯。

化合物6：白色結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：488.5［M]+，分子 式C24H24O11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.83（2H，m，H-2′，6′），7.45（3H，m，H-3′，4′，5′），6.88（1H，s，H-3），6.20（1H，s，H-8），4.95（1H，d，J=7.8 Hz，H-1″），4.47～4.64（4H，m，H-2″～5″），4.21（2H，q，6″-OCH2CH3），4.04（3H，s，6-OCH3），1.10（3H，t，6″-OCH2-CH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：163.1（C-2），104.6（C-3），182.6（C-4），152.4（C-5），133.2（C-6），153.8（C-7），94.7（C-8），155.8（C-9），106.4（C-10），132.0（C-1′），125.8（C-2′，6′），128.9（C-3′，5′），132.0（C-4′），100.8（C-1″），74.5（C-2″），76.8（C-3″），73.1（C-4″），78.3（C-5″），169.2（C-6″），60.7（6-OCH3），60.3（6″-OCH2），13.9（6″-OCH2-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11] 基本一致，故鑒定為千層紙素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷乙酯。

化合物7：黃色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：284.3［M]+，分子式 C16H12O4。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.90（2H，m，H-2′，6′），7.57（3H，m，H-3′～5′），6.90（1H，s，H-3），6.72（1H，s，H-6），3.95（3H，s，8-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：164.1（C-2），104.1（C-3），182.6（C-4），156.9（C-5），99.4（C-6），157.6（C-7），127.6（C-8），150.0（C-9），104.6（C-10），131.8（C-1′），126.0（C-2′，6′），128.9（C-3′，5′），131.88（C-4′），60.8（8-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12] 基本一致，故鑒定為漢黃芩素。

化合物8：白色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：474.4［M]+，分子式C23H22O11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：8.02（2H，d，J=5.2 Hz，H-2′，6′），7.47（3H，m，H-3′～5′），7.01（1H，s，H-3），5.99（1H，s，H-6），4.85（1H，d，J=7.6 Hz，H-1″），4.61～4.34（4H，m，H-2″～5″），4.07（3H，s，8-OCH3），3.65（3H，s，6″-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：163.8（C-2），105.7（C-3），183.1（C-4），156.7（C-5），99.3（C-6），156.9（C-7），129.4（C-8），156.7（C-9），105.8（C-10），132.4（C-1′），126.4（C-2′，6′），129.5（C-3′，5′），132.1（C-4′），101.6（C-1″），73.9（C-2″），76.8（C-3″），72.5（C-4″），77.3（C-5″），169.4（C-6″），61.3（8-OCH3），52.0（6″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11] 基本一致，故鑒定為漢黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷甲酯。

化合物9：黃色粉末（氯仿），EI-MS m/z：270.2［M]+，分子式 C15H10O5。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.90（2H，m，H-2′，6′），7.40（3H，m，H-3′～5′），7.01（1H，s，H-3），6.93（1H，s，H-6）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：163.1（C-2），105.8（C-3），183.2（C-4），154.1（C-5），99.3（C-6），154.5（C-7），126.0（C-8），157.6（C-9），104.3（C-10），119.4（C-1′），156.4（C-2′），117.2（C-3′），132.5（C-4′），119.1（C-5′），129.6（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4] 基本一致，故鑒定為去甲漢黃芩素。

化合物10：黃色粉末（氯仿），EI-MS m/z：460.4［M]+，分子式C22H20O11。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.24（1H，s，5-OH），8.80（1H，s，8-OH），8.14（2H，dd，J=7.8，1.7 Hz，H-2′，6′），7.62（3H，m，H-3′～5′），7.61（1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6″），7.02（1H，s，H-3），6.65（1H，s，H-6），5.48（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），5.48（1H，d，J=5.5 Hz，2″-OH），5.31（2H，d，J=5.0 Hz，3″-OH），5.23（2H，d，J=7.4 Hz，4″-OH），4.20～3.38（3H，m，H-3″～5″），3.68（3H，s，6″-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：163.5（C-2），105.0（C-3），182.5（C-4），151.0（C-5），98.3（C-6），152.3（C-7），127.0（C-8），144.8（C-9），105.4（C-10），130.8（C-1′），126.5（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），132.1（C-4′），100.2（C-1″），72.8（C-2″），74.9（C-3″），71.3（C-4″），75.1（C-5″），169.0（C-6″），52.0（6″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13] 基本一致，故鑒定為去甲漢黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷甲酯。

化合物11：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：254.2［M]+，分子式 C15H10O4。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.83（1H，s，5-OH），10.94（1H，s，7-OH），8.07（2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，6′），7.60（3H，m，H-3′～5′），6.98（1H，s，H-3），6.53（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.75（1H，d，J=2.1 Hz，H-6）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：163.2（C-2），105.2（C-3），181.9（C-4），161.5（C-5），99.0（C-6），164.4（C-7），94.1（C-8），157.5（C-9），104.0（C-10），136.7（C-1′），126.4（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），132.0（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14] 基本一致，故鑒定為白楊素。

化合物12：白色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：430.4［M]+，分子式C21H18O10。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.90（2H，m，H-2′，6′），7.46（3H，m，H-3′～5′），7.03（1H，s，H-3），6.90（1H，d，J=1.6 Hz，H-8），6.07（1H，d，J=1.6 Hz，H-6），5.33（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.75～4.46（4H，m，H-2″～5″）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：164.0（C-2），109.3（C-3），183.0（C-4），162.3（C-5），99.8（C-6），163.4（C-7），94.4（C-8），155.8（C-9），106.8（C-10），132.9（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.0（C-3′，5′）133.5（C-4′），101.5（C-1″），74.5（C-2″），77.7（C-3″），73.0（C-4″），77.8（C-5″），169.7（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) ［10]基本一致，故鑒定為白楊素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物13：白色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：444.6［M]+，分子式C22H20O10。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：8.01（2H，m，H-2′，6′），7.62（3H，m，H-3′，4′，5′），6.92（1H，s，H-3），6.87（1H，d，J=1.6 Hz，H-8），6.05（1H，d，J=1.6 Hz，H-6），4.93（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.62～4.60（4H，m，H-2″～5″），3.77（3H，s，6″-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：164.3（C-2），106.1（C-3），183.5（C-4），162.4（C-5），100.3（C-6），164.3（C-7），95.1（C-8），156.4（C-9），106.0（C-10），131.1（C-1′），127.0（C-2′，6′），129.6（C-3′，5′），132.3（C-4′），100.4（C-1″），73.4（C-2″），77.2（C-3″），72.0（C-4″），76.4（C-5″），170.3（C-6″），52.3（6″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11]基本一致，故鑒定為白楊素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷甲酯。

化合物14：黃色針狀結(jié)晶（甲醇），EI-MS m/z：300.4［M]+，分子式 C16H12O6。1H-NMR（400 MHz，C5D5N） δ：7.88（1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6′），7.35（2H，t，J=7.6 Hz，H-4′，5′），7.19（1H，s，H-8），7.00（1H，t，J=7.6 Hz，H-3′），6.55（1H，s，H-3），3.88（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：162.2（C-2），108.6（C-3），183.3（C-4），153.5（C-5），132.4（C-6），158.2（C-7），93.8（C-8），153.9（C-9），105.3（C-10），117.6（C-1′），156.8（C-2′），116.4（C-3′），132.4（C-4′），119.4（C-5′），128.3（C-6′），59.5（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15] 基本一致，故鑒定為5，7，2′-三羥基-6-甲氧基黃酮。

化合物15：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：476.4［M]+，分子式C22H20O12。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.89（1H，s，5-OH），10.88（1H，s，2′-OH），7.91（1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′），7.44（1H，ddd，J=8.6，8.0，1.8 Hz，H-4′），7.11（1H，s，H-3），7.09（1H，s，H-8），7.08（1H，m，H-5′），7.02（1H，d，J=8.0 Hz，H-3′），5.62（1H，d，J=5.1 Hz，2″-OH），5.50（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），5.36（2H，dd，J=13.3，6.1 Hz，3″，4″-OH），4.23～3.39（4H，m，H-2″～5″），3.77（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N） δ：162.0（C-2），108.8（C-3），182.5（C-4），152.5（C-5），132.4（C-6），156.1（C-7），93.9（C-8），152.3（C-9），105.9（C-10），117.2（C-1′），156.8（C-2′），117.2（C-3′），133.0（C-4′），119.4（C-5′），128.5（C-6′），99.3（C-1″），72.8（C-2″），75.7（C-3″），71.3（C-4″），75.2（C-5″），169.2（C-6″），60.3（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16] 基本一致，故鑒定為韌黃芩素Ⅱ-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物16：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：462.4［M]+，分子式C22H22O11。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.98（1H，s，5-OH），10.78（1H，s，7-OH），7.89（1H，dd，J=7.8，1.7 Hz，H-6′），7.57（1H，m，H-4′），7.41（1H，m，H-5′），7.22（1H，d，J=7.6 Hz，H-2′），7.03（1H，s，H-3），6.52（1H，s，H-8），5.10～3.39（5H，m，H-1″～5″），3.76（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：161.3（C-2），109.9（C-3），183.2（C-4），152.6（C-5），131.1（C-6），158.2（C-7），95.0（C-8），152.6（C-9），104.2（C-10），120.4（C-1′），155.9（C-2′），115.4（C-3′），132.7（C-4′），122.1（C-5′），129.2（C-6′），100.3（C-1″），73.4（C-2″），76.8（C-3″），69.4（C-4″），77.2（C-5″），173.2（C-6″），60.1（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16] 基本一致，故鑒定為韌黃芩素Ⅱ-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物17：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：300.4［M]+，分子式 C16H12O6。1H-NMR（400 MHz，CD3OD） δ：7.90（2H，m，H-2′，6′），6.99（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.56（1H，s，H-3），6.50（1H，s，H-8），3.90（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD） δ：167.0（C-2），106.0（C-3），184.9（C-4），155.1（C-5），134.0（C-6），158.4（C-7），95.4（C-8），154.1（C-9），110.2（C-10），121.0（C-1′），129.8（C-2′），118.0（C-3′），163.8（C-4′），118.0（C-5′），129.8（C-6′），61.1（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17] 基本一致，故鑒定為高車前素。

化合物18：無定型粉末（氯仿），EI-MS m/z：280.4［M]+，分子式 C18H32O2。1H-NMR（400 MHz，CDCl3） δ：10.96（1H，s，-COOH），5.31～5.36（4H，m，H-9，10，12，13），2.79（2H，m，H-11），2.33（2H，m，H-2），2.07（4H，m，H-8，14），1.65（2H，m，H-3），1.36（6H，m，H-7，15，17），1.31（8H，m，H-4～6，16），0.92（3H，t，J=7.6 Hz，H-18）；13CNMR（100 MHz，CDCl3） δ：180.1（C-1），31.9（C-2），24.8（C-3），27.2（C-4），29.0（C-5），29.3（C-6），29.4（C-7），29.9（C-8），130.0（C-9），128.0（C-10），34.0（C-11），128.0（C-12），130.0（C-13），29.9（C-14），29.2（C-15），29.6（C-16），22.9（C-17），14.1（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) ［18] 基本一致，故鑒定為亞油酸。

化合物19：黃色粉末（甲醇），EI-MS m/z：490.5［M]+，分子式 C23H22O12。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.88（1H，s，5-OH），10.87（1H，s，2′-OH），7.89（1H，dd，J=8.0，1.7 Hz，H-6′），7.43（1H，m，H-4′），7.11（1H，s，H-3），7.07（1H，s，H-8），7.05（1H，br.d，J=7.4 Hz，H-3′），7.03（1H，m，H-5′），5.61（1H，d，J=5.1 Hz，2″-OH），5.49（1H，d，J=5.5 Hz，H-1″），5.35（2H，dd，J=7.3，5.0 Hz，3″，4″-OH），4.21～3.35（3H，m，H-3″～5″），3.76（3H，s，6-OCH3），3.66（3H，s，6″-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：162.0（C-2），108.8（C-3），182.5（C-4），152.5（C-5），132.4（C-6），156.1（C-7），93.9（C-8），152.4（C-9），105.9（C-10），117.2（C-1′），156.8（C-2′），117.2（C-3′），113.0（C-4′），119.4（C-5′），128.5（C-3′），99.3（C-1″），72.8（C-2″），75.7（C-3″），71.3（C-4″），75.2（C-5″），169.2（C-6″），60.3（6-OCH3），52.0（6″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16] 基本一致，故鑒定為韌黃芩素Ⅱ-7-O-β-D-葡萄吡喃糖醛酸甲酯。

化合物20：C15H10O4，黃色粉末（甲醇），EIMS m/z：462.4［M]+，分子式C22H22O11。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：13.00（1H，s，5-OH），10.75（1H，s，7-OH），7.88（1H，ddd，J=11.5，7.9，1.6 Hz，H-6′），7.55（1H，m，H-4′），7.38（1H，dd，J=8.3，1.7 Hz，H-3′），7.20（1H，t，J=7.6 Hz，H-5′），7.01（1H，s，H-3），6.58（1H，s，H-8），5.11～3.48（7H，m，H-1″～6″），3.76（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：160.9（C-2），109.7（C-3），182.3（C-4），152.7（C-5），131.3（C-6），157.5（C-7），94.2（C-8），152.8（C-9），104.2（C-10），120.3（C-1′），155.4（C-2′），129.2（C-3′），115.5（C-4′），132.9（C-5′），122.0（C-6′），100.2（C-1″），73.3（C-2″），76.8（C-3″），69.6（C-4″），77.2（C-5″），60.6（C-6″），60.0（6-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17]基本一致，故鑒定為韌黃芩素Ⅱ-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

4 討論

本研究從民族藥滇黃芩中分離鑒定了20 個化合物，主要是黃酮苷元（化合物1、3、7、9、11、14、17）、黃酮苷（化合物2、4、12、15～16、20）和黃酮葡萄糖醛酸酯（化合物5～6、8、10、13、19）等，其中化合物4、12為首次從滇黃芩根莖中分離得到，5、8、10、13、15～18為首次從該植物中分離得到。研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗氧化、抗炎、抗菌、調(diào)節(jié)脂代謝、抗腫瘤等作用，且毒性較小，近年來受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注［19-23]。其中化合物（1）具有抗病毒、抗菌、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用［24]；化合物（2）具有抑菌、抗炎、降壓、抗變態(tài)反應(yīng)等藥理作用［25]；化合物（3）具有抗炎、抗腫瘤、保護(hù)血管與神經(jīng)細(xì)胞、改善記憶障礙、抗病毒等作用［26]；化合物（7）具有較強(qiáng)的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用［27]；化合物（9）具有抗氧化和耐缺氧等作用［28]；化合物（11）具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、防治心腦血管疾病等作用［29]；化合物（17）具有抗炎、抗氧化、抗突變、抗驚厥、抗骨質(zhì)疏松、抗腫瘤和神經(jīng)保護(hù)等作用［30]，尚有很多化合物的藥理活性不明確。以期本研究豐富此類化學(xué)成分，并能在后續(xù)展開相關(guān)的活性篩選工作，有助于明確該民族藥的物質(zhì)基礎(chǔ)，為民族藥的研究與開發(fā)提供參考。