家兔靜脈注射左氧氟沙星后的眼內(nèi)組織分布及其藥動(dòng)學(xué)研究

鄒 澤，李 飛，黃曉宏，謝 飛，袁建平（重慶市黔江中心醫(yī)院，重慶 409000）

左氧氟沙星（Levofloxacin，LOX）是臨床應(yīng)用中不良反應(yīng)報(bào)道相對(duì)較少、抗菌活性較高的一種安全、有效、經(jīng)濟(jì)的氟喹諾酮類藥物，目前在臨床應(yīng)用較廣泛。其滴眼液局部應(yīng)用的眼組織分布及藥動(dòng)學(xué)已有文獻(xiàn)[1-2]報(bào)道；筆者在前期也對(duì)家兔灌服LOX后的眼內(nèi)各組織中的分布及藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行了研究[3]。在本文中，筆者將研究家兔靜脈注射LOX后在眼內(nèi)各組織的分布及其藥動(dòng)學(xué)情況，為其臨床合理使用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

1100系列高效液相色譜（HPLC）儀，包括泵系統(tǒng)、可調(diào)波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器和工作站（美國(guó)Agilent公司）。

1.2 藥品與試劑

乳酸LOX氯化鈉注射液（以下簡(jiǎn)稱LOX注射液，浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，批號(hào)：100550，規(guī)格：100ml∶0.2g）；內(nèi)標(biāo)環(huán)丙沙星（CF，重慶藥友制藥有限公司，批號(hào)：1101010，純度：99%，使用時(shí)用甲醇溶解并制備成336μg/ml的貯備液及33.6μg/ml的工作液）；甲醇、磷酸二氫鉀、四丁基溴化銨為分析純，二氯甲烷為色譜純，水為三蒸水。

1.3 動(dòng)物

健康合格新西蘭家兔27只，體質(zhì)量2.5～3.0kg，♀♂兼用，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）2002-0001。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與色譜行為

色譜柱：Phenomenex C18（250mm×4.6mm，10μm）；固定進(jìn)樣環(huán)體積：100μl；流動(dòng)相：甲醇-0.008mol/L磷酸鹽緩沖液-0.5mol/L四丁基溴化銨（25∶75∶4），流速：1.0ml/min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm；柱溫：室溫；內(nèi)標(biāo)：CF。

按“2.2”項(xiàng)下方法制備未給藥的空白組織勻漿，并取此勻漿及空白組織勻漿+LOX（1.952μg/ml）+CF（0.672μg/ml）及靜脈注射后2h樣品勻漿進(jìn)樣分析。結(jié)果，在本實(shí)驗(yàn)條件下，LOX與CF及眼組織中雜峰分離良好，見圖1。

2.2 標(biāo)本制備

選取27只家兔，無眼疾，隨機(jī)分為9組，每組3兔6眼。參照文獻(xiàn)[4]，按人體用量換算得各組家兔靜脈注射LOX 24mg/kg，分別于注射后0.125、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0h空氣栓塞處死，迅速摘取眼球，用生理鹽水反復(fù)沖洗。抽取房水、玻璃體，然后刨開眼球，取出角膜、虹膜-睫狀體、晶體，經(jīng)濾紙吸干后稱質(zhì)量，置于試管中剪碎、勻漿。取勻漿1ml，置于10ml試管中，依次加CF 20μl、二氯甲烷4ml，振蕩1min，離心1min（4500r/min）。取二氯甲烷層3.0ml，置于5ml離心管中，50℃水浴下氮?dú)獯蹈桑?00μl流動(dòng)相復(fù)溶，即制作得進(jìn)樣樣品。

圖1 高效液相色譜圖A.空白組織；B.空白組織+LOX+CF；C.樣品；1.LOX；2.CFFig 1 HPLC chromatogramsA.blank tissue；B.blank tissue+LOX+CF；C.samples；1.LOX；2.CF

2.3 含量測(cè)定方法學(xué)考察[4]

本實(shí)驗(yàn)中，以LOX峰面積與CF峰面積之比為縱坐標(biāo)（Y），以LOX濃度為橫坐標(biāo)（X），得眼組織混合勻漿標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y＝1.8710X－0.04383（r＝0.9994），LOX檢測(cè)線性范圍為0.03904～3.904μg/ml，低、中、高濃度平均回收率為（93.26±1.99）%（n＝15）；日內(nèi)RSD為1.92%～6.72%（n＝15），日間RSD為4.09%～7.29%（n＝15）；凍融穩(wěn)定性良好（RSD＝3.15%，n＝5），最低定量限為0.03904μg/ml（RSD＝19.51%，n＝5）。

2.4 LOX在眼內(nèi)各組織中含量測(cè)定結(jié)果

家兔單劑量靜脈注射LOX（24mg/kg）后不同時(shí)間取樣測(cè)定房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體中藥物含量，結(jié)果見表1。

表1 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內(nèi)各組織中平均藥物含量Tab 1 Mean concentration of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after single dose of LOX by iv.

表1結(jié)果表明，家兔眼內(nèi)各組織中LOX的含量均在1.0h達(dá)峰，8.0h內(nèi)均保持較高含量，其中角膜和虹膜-睫狀體含量較高。

2.5 LOX在各組織中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

將所測(cè)得的LOX含量（質(zhì)量濃度）-時(shí)間數(shù)據(jù)經(jīng)3p97自動(dòng)擬合得藥動(dòng)學(xué)參數(shù)值。藥-時(shí)曲線見圖2，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)值見表2（表中“＊”表示實(shí)測(cè)值）。

從圖2可見，家兔單劑量靜脈注射LOX后，藥物除在房水中呈二室模型分布外，其余均呈一室模型分布。從表2可見，各組織中LOX的t1/2β均為3.0h左右，表明藥物在組織中保留時(shí)間相對(duì)較短，尤其是房水和晶體較為明顯。

3 討論

圖2 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內(nèi)各組織平均藥-時(shí)曲線Fig 2 Mean concentration-time cures of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after iv.single dose of levofloxacin

文獻(xiàn)[5]報(bào)道，LOX對(duì)眼內(nèi)各組織常見細(xì)菌的90%最低抑菌濃度（MIC90）為金黃色葡萄球菌0.25～0.5μg/ml、表皮葡萄球菌 0.25～0.41μg/ml、肺炎球菌 0.06～1.0μg/ml、大腸桿菌0.12～0.39μg/ml、綠膿桿菌1.0～4.0μg/ml；而本研究結(jié)果表明，LOX靜脈注射后在房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體的cmax均明顯高于上述菌的MIC90。提示LOX對(duì)眼內(nèi)各組織中的常見菌均有較強(qiáng)的抗菌作用，因此靜脈注射LOX對(duì)眼內(nèi)感染有較好的防治作用。

表2 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內(nèi)各組織藥動(dòng)學(xué)參數(shù)結(jié)果Tab 2 Pharmacokinetic parameters of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after iv.single dose of LOX

此外，本研究結(jié)果表明，LOX靜脈注射給藥后與局部點(diǎn)眼給藥后比較[6]，前者房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體各組織中的tmax較短，表明達(dá)峰時(shí)間快；AUC在角膜和虹膜-睫狀體中最高，并與灌服給藥后結(jié)果一致[3]，表明本品靜脈注射給藥后對(duì)眼內(nèi)各組織感染具有較好的防治作用。

綜上所述，LOX靜脈注射給藥后在眼內(nèi)各組織有較高的藥物濃度、達(dá)峰時(shí)間快，可用于眼內(nèi)各組織嚴(yán)重感染的治療。

[1] 王文彤，陶遵威，張娜，等.鹽酸左氧氟沙星滴眼液在兔眼房水內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2011，42（2）：115.

[2] 高靜，儲(chǔ)藏，丁雪鷹，等.鹽酸左氧氟沙星眼用即形凝膠在兔眼房水內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)[J].中國(guó)醫(yī)療前沿，2007（22）：1723.

[3] 鄒澤，岳建農(nóng)，蘇學(xué)勤.家兔灌服左氧氟沙星后眼內(nèi)組織分布及其藥動(dòng)學(xué)研究[J].中國(guó)藥房，2012，23（37）：3493.

[4] 曾洋，肖明朝，周遠(yuǎn)大，等.鹽酸特拉唑嗪對(duì)細(xì)菌性前列腺炎模型大鼠血漿中左氧氟沙星濃度的影響[J].中國(guó)藥房，2011，22（5）：408.

[5] Fiscella RG，Nguyen TK，Cwik MJ，et al.Aqueous and vitreous penetration of levofloxacin after oral administration[J].Ophthalmology，1999，106（12）：2286.

[6] 蔡鴻生，羅順德，劉強(qiáng)，等.乳酸左氧氟沙星滴眼液在兔眼中的藥動(dòng)學(xué)[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2001，21（7）：391.