使用熒光定量PCR檢測孕婦Uu和Ct感染情況分析

吳玉霞

(北海市第二人民醫(yī)院檢驗科，廣西 北海536000)

解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum，Uu)和沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis，Ct)是可寄居于人體并能引起疾病的病原體。在婦女懷孕期間可導(dǎo)致母嬰傳播，對母體本身、胎兒及新生兒均可造成明顯的不良后果[1]?？焖贉?zhǔn)確診斷非常重要，采用實時熒光定量PCR(Real-time quantity PCR)方法檢測臨床收集的2348份孕婦標(biāo)本的Uu和Ct，分析孕婦Uu和Ct的感染情況，取得較好效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2006年7月至2013年1月在我常規(guī)產(chǎn)前檢查的孕婦2348例,年齡18～38歲。所有被檢查者在此研究前30d均無局部或全身使用抗菌素史。

1.2 標(biāo)本處理 用無菌棉拭子輕輕擦取患者生殖道宮頸分泌物密閉送檢。將棉拭子放入0.5ml無菌生理鹽水中浸泡10min,充分擠壓洗脫棉簽,吸取200μl放置-20℃保存待檢。

1.3 方法

1.3.1 PCR法 儀器使用杭州博日Line Gene9620自動熒光PCR擴增儀，試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)達安基因診斷中心提供，操作嚴(yán)格按說明書。以Uu或Ct-DNA≥103copies/ml作為判斷陽性的標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控物由廣西臨床檢驗中心提供。

1.3.2 培養(yǎng)法 Uu培養(yǎng)、鑒定試劑盒由珠海浪峰生物技術(shù)有限公司提供，Ct培養(yǎng)試劑盒由珠海浪峰生物技術(shù)有限公司提供，操作嚴(yán)格按說明書。

1.3.3 統(tǒng)計分析 將得到的結(jié)果應(yīng)用卡方χ2檢驗分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

檢測的2348例孕婦中，使用實時熒光定量PCR法檢出Uu陽性者920例 (39.18%),Ct陽性者286例 (12.18%)，Uu和 Ct混合陽性者 11例(0.47%)，合計檢出陽性者1217例(51.83%)。培養(yǎng)法檢出Uu陽性者406例 (17.29%)，CT陽性者44例(1.87%)，Uu和 Ct混合陽性者 9例 (0.38%)， 合計459例(19.54%)，結(jié)果實時熒光定量PCR法陽性檢出率明顯高于培養(yǎng)法(P<0.05)，見表1。

表1 PCR與培養(yǎng)法的陽性檢出率比較[n(%)]

3 討論

Uu、Ct是介于細菌和病毒之間的病原微生物，是人類泌尿生殖道最常見的寄生菌之一[2]。均能引起女性生殖道感染，相當(dāng)部分為無癥狀攜帶者，因此令感染者未能引起重視而及時就醫(yī)。當(dāng)孕婦感染時雖沒有不適，但Uu是引起自然流產(chǎn),而Ct是引起先兆流產(chǎn)的危險因素。且孕婦感染Uu和Ct可引起胎膜早破[3]產(chǎn)生不良的妊娠結(jié)局 ,還可通過母嬰的垂直傳播使新生兒發(fā)病 ,如新生兒肺炎、結(jié)膜炎、中耳炎、陰道炎及腦膜炎等。有文獻報道20~40歲年齡組患者感染率為85.80%是發(fā)病的高危人群[4]，而此年齡段也是最佳生育期。本文檢測的2348例孕婦中，1017陽性占43.31，高于國內(nèi)報道[5]，說明孕婦感染Uu和Ct的幾率相當(dāng)高。

本文就目前Uu和Ct檢測常用的兩種方法實時熒光定量PCR法和培養(yǎng)法做比較，結(jié)果實時熒光定量PCR法陽性檢測率顯著高于培養(yǎng)法法 (P<0.05)。因此本文建議孕期應(yīng)重視生殖道Uu和Ct感染的檢測，在產(chǎn)科門診建卡時對宮頸分泌物行Uu和Ct常規(guī)篩查，且選用實時熒光定量PCR法，及時發(fā)現(xiàn)及早治療無癥狀攜帶者，達到預(yù)防胎膜早破、早產(chǎn)，降低母嬰病率，提高圍產(chǎn)保健質(zhì)量，達到優(yōu)生優(yōu)育目的。

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