大麻素受體2 參與神經(jīng)病理性疼痛的研究進(jìn)展

黃 晶，阮懷珍 (第三軍醫(yī)大學(xué):.學(xué)員旅7 隊(duì);.基礎(chǔ)部神經(jīng)生物學(xué)教研室，重慶400038)

神經(jīng)病理性疼痛(Neuropathic Pain)是由于軀體感覺系統(tǒng)產(chǎn)生疾病或受到者損傷后，機(jī)體受到的有害或者無害的刺激被病理性的放大后所致。周圍神經(jīng)性痛是起源于周圍神經(jīng)系統(tǒng)受到機(jī)械創(chuàng)傷、代謝性疾病、神經(jīng)化學(xué)毒物等影響。而中樞神經(jīng)性痛一般都是由于脊髓損傷、中風(fēng)或者多發(fā)性硬化引起的［1］。然而到目前為止，神經(jīng)病理性痛確切的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，臨床上治療神經(jīng)病理性疼痛的措施仍停留在對于原發(fā)疾病或損害的處理上，而現(xiàn)有的一些藥物治療(如阿片類藥物、抗抑郁藥和抗驚厥藥物等)，存在疼痛緩解不足或一些有害的副作用，藥物用量受到限制，治療效果一直不佳。近年來有研究表明大麻素受體2 (cannabinoid receptor 2，CB2)在選擇性激動(dòng)劑激活下能夠有效地抑制急性、炎性疼痛而不產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的副作用［2-5］，因此其可能作為未來治療神經(jīng)病理性疼痛的一個(gè)治療靶點(diǎn)。關(guān)于大麻素受體2 在神經(jīng)病理性疼痛中的作用的報(bào)道也越來越多，本文對其近幾年的研究進(jìn)展綜述如下。

1 大麻素受體

目前已知大麻素受體亞型有2 種，屬于G 蛋白耦連受體視紫質(zhì)家族 A 綱，大麻素受體1(cannabinoid receptor 1，CB1 受體)在1990 年被克隆，含有360 個(gè)氨基酸。大麻素受體2(cannabinoid receptor 2，CB2 受體)則在 1993 年被克隆，含有 473 個(gè)氨基酸，氨基酸克隆序列研究表明它們的完整氨基酸序列有著44%的同源性，跨膜區(qū)序列的同源性更是高達(dá)68%。大麻素受體主要被3 種配體激活:①內(nèi)源性大麻素(哺乳動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生);②植物來源大麻素;③人工合成大麻素。然而也有證據(jù)表明在內(nèi)皮細(xì)胞以及CNS 可能存在新型的大麻素受體［6］。

2 CB2 受體的分布

CB2 受體最開始發(fā)現(xiàn)存在于許多循環(huán)免疫細(xì)胞，尤其是B細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞，在巨噬樣的細(xì)胞中也有CB2 受體的表達(dá)，如小膠質(zhì)細(xì)胞、循環(huán)巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和肝Kupffer 細(xì)胞等，因此被認(rèn)為起到免疫調(diào)節(jié)的作用。CB2 受體的表達(dá)也見于腦和脊髓部位活化的小膠質(zhì)細(xì)胞［4，7］。在胃腸道系統(tǒng)以及周圍神經(jīng)系統(tǒng)也能見到CB2 受體的表達(dá)，最近有藥理學(xué)證據(jù)支持CB2 受體存在于人和豚鼠的迷走神經(jīng)［8］。有文獻(xiàn)報(bào)道在對新生大鼠的背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion，DRG)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的過程中也檢測到了CB2 受體的免疫反應(yīng)性，CB2 受體在某些組織病理過程中會(huì)反應(yīng)性的上調(diào)表達(dá)［9］，這說明其有著可能成為治療靶點(diǎn)的前景。

3 CB2 受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

3.1 環(huán)磷酸腺苷-蛋白激酶A 信號通路

CB2 受體屬于G 蛋白偶聯(lián)受體超家族，被其相應(yīng)的激動(dòng)劑激活后，在轉(zhuǎn)染CB2 受體的CHO 細(xì)胞以及COS 細(xì)胞內(nèi)以濃度依賴性的方式抑制腺苷酸環(huán)化酶的活性［10］，這些作用對百日喉毒素敏感，可見CB2 受體通過結(jié)合Gi/Go 亞基，抑制腺苷酸環(huán)化酶(adenylyl cyclase，AC)的活性，導(dǎo)致胞內(nèi)第二信使cAMP生成減少，通過蛋白激酶A，進(jìn)而影響胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。

3.2 絲裂原激活的蛋白激酶信號通路

絲裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinases，MAPK)是調(diào)節(jié)許多細(xì)胞功能(細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)化及凋亡)的關(guān)鍵信號分子，CB2 受體激動(dòng)劑活化CB2 受體，激活MAPK 的2 種主要通路:ERK1/2 以及p38MAPK。CB2 受體通過結(jié)合Gi/Go蛋白導(dǎo)致MAPK 磷酸化，進(jìn)而激活下游信號通路。有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)使用了CB2 受體選擇性激動(dòng)劑HU308 后，不僅在免疫細(xì)胞中，CNS 細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了MAPK 的激活［11-12］，同樣的在大鼠的RTMGL1 小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，CB2 受體被2-AG 激活可引起p42MAPK活化和細(xì)胞增殖［13］。

3.3 Ca2+信號通路

CB2 受體活化后能引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平的改變，鈣成像研究顯示在正常、神經(jīng)病理性(脊神經(jīng)結(jié)扎)以及假手術(shù)大鼠的DRG 神經(jīng)元中［14］，CB2 受體激動(dòng)劑 JWH133 與 CB2 受體結(jié)合后能減弱辣椒素引起的鈣反應(yīng)，這種作用能被CB2 選擇性拮抗劑SR144528 抑制。牛肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或重組CHO 細(xì)胞上CB2 受體被其激動(dòng)劑激活后，引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上Ca2+釋放通道的去極化，導(dǎo)致庫容性鈣離子內(nèi)流以及胞漿內(nèi)鈣離子濃度升高。這種效應(yīng)也可以被CB2 選擇性拮抗劑SR144528 抑制［13］。

4 CB2 在神經(jīng)病理性疼痛中的作用機(jī)制分析

在多種創(chuàng)傷性神經(jīng)損傷(如部分坐骨神經(jīng)縮窄、脊神經(jīng)結(jié)扎、慢性縮窄模型等)以及化學(xué)藥物導(dǎo)致的神經(jīng)病理性疼痛中，CB2 選擇性激動(dòng)劑通過結(jié)合CB2 受體發(fā)揮抑制傷害性感受信息傳遞的作用。

4.1 神經(jīng)病理性疼痛脊神經(jīng)結(jié)扎模型

在脊神經(jīng)結(jié)扎模型(spinal nerve ligation，SNL)中，L5和L6脊神經(jīng)結(jié)扎后能引起神經(jīng)病理性疼痛，導(dǎo)致對機(jī)械刺激以及熱刺激的敏化，痛閾的降低，在結(jié)扎的脊神經(jīng)同側(cè)脊髓也發(fā)現(xiàn)有CB2 受體 mRNA 的表達(dá)增高［4，15］，然而在全身性給予 CB2 受體激動(dòng)劑AM1241 后，產(chǎn)生了CB2 受體特異的劑量依賴性的抗敏化作用，從而減輕疼痛，而且這種作用能被CB2 受體拮抗劑AM630 所阻斷，可見CB2 受體通過結(jié)合其選擇性激動(dòng)劑，抑制了傷害性感受信息的傳導(dǎo)，起了抗痛覺增敏的作用。AM1241的這種作用在CB1 + / +野生型及CB1 - / -小鼠中都存在，而在CB2 - / -的小鼠中是檢測不到［16］，即其抗痛覺增敏作用是通過與CB2 受體的結(jié)合而產(chǎn)生，并且不需要CB1 受體的活化。

4.2 神經(jīng)病理性疼痛慢性縮窄模型

神經(jīng)病理性疼痛慢性縮窄(chronic constrictive injury，CCI)模型大鼠能導(dǎo)致異常性疼痛，對神經(jīng)的損傷程度低于SNL 模型和PSL 模型。Brownjohn 等［17］在對大鼠進(jìn)行坐骨神經(jīng)CCI 模型誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛中發(fā)現(xiàn)，全身使用CB2 受體部分激動(dòng)劑GW405833 能有效的減輕異常性疼痛。在縮窄神經(jīng)同側(cè)的脊髓也發(fā)現(xiàn)了CB2 受體表達(dá)的增強(qiáng)，他們也推測神經(jīng)病理性疼痛的模型不同，CB2 受體在脊髓的表達(dá)以及其激動(dòng)劑的效能也不一樣。這提示我們在治療異常性疼痛時(shí)需要根據(jù)和CB2 受體靶點(diǎn)結(jié)合后發(fā)揮的效能來選擇其合適的激動(dòng)劑藥物。

4.3 化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛

CB2 受體除了在組織和神經(jīng)損傷所致的神經(jīng)病理性疼痛模型中抑制傷害性感受信息傳導(dǎo)以及抑制中樞敏化以外，在應(yīng)用化療藥物所誘發(fā)的病理性持續(xù)疼痛過程中也起到了重要的抗傷害作用?；熞鸬纳窠?jīng)性疼痛和神經(jīng)創(chuàng)傷引起的神經(jīng)性疼痛不同，它可能發(fā)生在外周神經(jīng)變性缺失處，同時(shí)引起非典型線粒體功能的改變而導(dǎo)致細(xì)胞的鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)［18］，可能出現(xiàn)異常信息的傳遞而導(dǎo)致異常性疼痛。如使用化療藥物長春生物堿安可平治療白血病、淋巴瘤以及固態(tài)腫瘤時(shí)，則會(huì)引起在對熱刺激保護(hù)這種條件下的機(jī)械性異常疼痛［19］，注射AM1241 也能局部的消除這種疼痛，而且能被CB2 受體拮抗劑阻斷也說明CB2 激動(dòng)劑能作為CB2 受體在神經(jīng)性疼痛中的鎮(zhèn)痛機(jī)制之一。有研究指出，使用紫杉酚誘發(fā)的機(jī)械性痛覺異常后，全身使用CB2 受體激動(dòng)劑(R，S)-AM1241 后，產(chǎn)生了劑量相關(guān)的痛覺的抑制性，這種效應(yīng)可以通過提前使用CB2 受體拮抗劑SR144528 而非CB1 受體拮抗劑SR141716 來阻斷，有趣的是單獨(dú)使用CB1 或CB2 受體拮抗劑并不會(huì)增強(qiáng)紫酚誘發(fā)的痛覺異常。這種高選擇性提示我們CB2 受體可以作為治療因化療藥物引起的神經(jīng)病變中的一個(gè)重要的靶點(diǎn)。

5 展望

本篇綜述目的在于總結(jié)近幾年關(guān)于 CB2 受體在緩解或抑制神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)機(jī)制及用藥方面的研究進(jìn)展。CB2 受體與激動(dòng)劑結(jié)合后能有效的緩解神經(jīng)病理性疼痛且不伴有中樞神經(jīng)系統(tǒng)的不良反應(yīng)，對此的進(jìn)一步研究可以為臨床上神經(jīng)病理性疼痛的治療提供新的思路。尤其是在對腫瘤進(jìn)行化療過程中所產(chǎn)生的慢性難治性疼痛，CB2 受體可能成為一個(gè)有效的治療靶點(diǎn)，其緩解化療導(dǎo)致的慢性疼痛的具體機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

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