血必凈注射液的抗炎作用機(jī)制研究進(jìn)展

吳江瑩綜述，劉曉新審校（.天津市環(huán)湖醫(yī)院重癥科 300060；.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院針灸科，天津 30093）

血必凈注射液由我國中西醫(yī)結(jié)合急救醫(yī)學(xué)奠基人王今達(dá)教授基于古方，根據(jù)菌、毒、炎并治理論研制，已用于臨床多年，其含有從多種中藥中提取的紅花黃色素A、川芎嗪、阿魏酸、丹參素、芍藥苷、原兒茶醛等有效成分，可治療由感染引發(fā)的多器官功能障礙綜合征（MODS）等多種急危重病，療效滿意。大量的臨床實踐表明該藥有抗炎、改善微循環(huán)等作用，近年來對其抗炎作用機(jī)制的研究已較為深入，現(xiàn)將其抗炎作用機(jī)制研究進(jìn)展綜述如下。

1 血必凈注射液的抗炎有效成分研究

血必凈注射液是復(fù)方中藥制劑，由紅花、赤芍、川芎、丹參、當(dāng)歸5味中藥組成，其主要有效成分包括紅花色素、酚酸、黃酮苷和苯乙基苷類等。冀蘭鑫等［1］基于該注射液復(fù)方組成的5味中藥的化學(xué)成分，最終確定了血必凈注射液中11種主要化學(xué)成分：尿苷、沒食子酸、鳥苷、丹參素鈉、芍藥苷、原兒茶醛、阿魏酸、丹酚酸B、紅花黃色素A、洋川芎內(nèi)酯I和洋川芎內(nèi)酯H，其中許多成分具有抗炎作用。研究顯示口服和腹膜腔內(nèi)注射沒食子酸，可顯著阻止四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠急性肝損害，推測沒食子酸抵抗四氯化碳誘導(dǎo)肝炎的作用機(jī)制可能是超氧化物歧化酶（SOD）類似活性和／或?qū)?xì)胞膜的保護(hù)作用［2］；丹參素亦具有很強的抗脂質(zhì)過氧化及清除自由基的能力；芍藥苷可阻斷一氧化氮毒性損傷及細(xì)胞內(nèi)鈣超載；原兒茶醛可抗炎、改善微循環(huán)等，作用的基礎(chǔ)機(jī)制可能和原兒茶醛對白細(xì)胞趨化游走和外周血單個核細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素（IL）－8的抑制作用相關(guān)［3］。阿魏酸也具有抗炎作用，其抗炎作用機(jī)理可能涉及對抗炎性介質(zhì)等多個方面［4］。紅花黃色素同樣具有抑制血小板活化因子活性的抗炎作用。

2 血必凈注射液的抗炎作用機(jī)制

2.1 血必凈注射液對細(xì)胞釋放的炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子的作用機(jī)制研究 炎性反應(yīng)中細(xì)菌、毒素將刺激機(jī)體單核／巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞造成大量炎性介質(zhì)“瀑布樣”釋放［5］。腫瘤壞死因子（TNF）－α是炎性的啟動因子，不但可以自身激活，還可以通過炎性反應(yīng)因子級鏈反應(yīng)激活、釋放更多炎性介質(zhì)，形成“瀑布效應(yīng)”，最終會導(dǎo)致 MODS的發(fā)生［6］。IL－6就是由 TNF－α誘導(dǎo)產(chǎn)生并參與機(jī)體炎性反應(yīng)。明自強等［7］研究證明血必凈注射液可以抑制內(nèi)源性炎性介質(zhì)TNF－α、IL－6的失控釋放。中性粒細(xì)胞是主要的炎性細(xì)胞，林福清等［8］研究了血必凈注射液對全身炎性反應(yīng)綜合征（SIRS）患者中性粒細(xì)胞功能的影響，發(fā)現(xiàn)治療7d后，外周血中性粒細(xì)胞的趨化、吞噬、氧化呼吸爆發(fā)功能及臨床表現(xiàn)等較對照組明顯改善，且MODS的發(fā)生率大大降低。說明血必凈注射液可改善中性粒細(xì)胞、單核－巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，減少炎性介質(zhì)的釋放，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能。李湘民［9］研究了血必凈注射液對重度急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者SIRS的保護(hù)作用及其機(jī)制，以在正規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用血必凈注射液，結(jié)果血必凈治療組患者白細(xì)胞計數(shù)、C反應(yīng)蛋白、TNF－α、IL－6及IL－8明顯降低。張淑文等［10］觀察了血必凈注射液對膿毒癥時促炎／抗炎免疫功能的影響，測定血中IL－10和TNF－α水平并檢測全血細(xì)胞中輔助性T細(xì)胞1／2（Th1／Th2）比值，結(jié)果血必凈組Th1／Th2僅在72h才明顯升高，且血必凈組TNF－α和IL－10的水平明顯降低，表明其機(jī)制可能是血必凈注射液能提高機(jī)體特異性免疫功能，降低炎性反應(yīng)，減少細(xì)胞因子及炎性介質(zhì)釋放等。朱志強等［11］、王藹卿和曹書華［12］的研究也有類似結(jié)果。

進(jìn)一步的研究觀察了血必凈注射液對TNF－α等炎性物質(zhì)作用的分子機(jī)制。李銀平等［13］探討了血必凈注射液對膿毒癥大鼠蛋白C（PC）及TNF－α基因表達(dá)的影響，觀察到血必凈注射液可有效延緩肝組織PC mRNA表達(dá)下調(diào)時間及降低其下調(diào)幅度，減輕膿毒癥對組織PC mRNA表達(dá)的負(fù)向影響，提示血必凈注射液可以降低局部組織TNF－α基因表達(dá)，阻斷TNF－α介導(dǎo)的失控性炎性反應(yīng)，其機(jī)制可能是通過促進(jìn)肝組織PC的合成而影響TNF－α基因表達(dá)。

2.2 血必凈注射液的抗氧化作用機(jī)制研究 目前認(rèn)為膿毒血癥、SIRS等炎性病癥是由于嚴(yán)重的氧化應(yīng)激，導(dǎo)致氧化還原失衡，使大量的活性氧（ROS）包括氧自由基、脂性自由基產(chǎn)生，造成細(xì)胞主要分子的損害所致。抗氧化治療能提高重癥患者機(jī)體的抗氧化能力，減輕氧化損傷，可發(fā)揮抗炎作用。孫軍平等［14］在一項對內(nèi)毒素致兔急性肺損傷（ALI）模型的研究中發(fā)現(xiàn)：內(nèi)毒素致傷組的肺丙二醛（MDA）明顯高于對照組，而SOD明顯低于對照組。這表明在內(nèi)毒素導(dǎo)致肺損傷時有大量的脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)生，同時機(jī)體清除氧自由基的能力明顯下降。血必凈注射液干預(yù)組肺中MDA明顯降低，SOD明顯升高，據(jù)此認(rèn)為血必凈注射液起到了抗氧自由基的作用。何國鑫等［15］研究了血必凈注射液對ALI大鼠氧自由基變化的影響，結(jié)果顯示血必凈注射液干預(yù)可顯著降低ALI大鼠MDA濃度，顯著升高ALI大鼠降低的SOD濃度，減輕肺組織形態(tài)學(xué)損傷，認(rèn)為血必凈注射液可抑制氧自由基產(chǎn)生，減少了機(jī)體細(xì)胞膜受氧自由基攻擊和破壞。楊春燕等［16］觀察了血必凈注射液對急性百草枯中毒大鼠MDA、SOD和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）的影響也得出類似結(jié)果，血必凈注射液可以明顯降低急性百草枯中毒大鼠MDA的生成，并增加SOD、GSH－Px的活力，可使急性百草枯中毒大鼠引起的脂質(zhì)過氧化損害得到改善，具有抗氧化治療的作用。馬俊清等［17］將肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)后，使用百草枯制成損傷模型，加入不同濃度血必凈溶液，觀察細(xì)胞培養(yǎng)上清液中SOD、MDA等含量及肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞成活率。結(jié)果顯示不同濃度的血必凈在各時間點上均具有不同程度SOD活性上升，MDA含量降低，細(xì)胞成活率增加，同樣證實了血必凈注射液對SOD、MDA的作用，因而具有較強的清除氧自由基、抗氧化能力。

2.3 血必凈注射液對NO的作用及機(jī)制研究 炎性反應(yīng)過程中NO與體內(nèi)的抗炎作用密切相關(guān)。NO可以抑制白細(xì)胞的黏附、細(xì)胞外摻和趨化性，調(diào)節(jié)多種與炎性反應(yīng)有關(guān)的細(xì)胞因子、化學(xué)因子的產(chǎn)物和功能，因此NO調(diào)控著炎性的發(fā)生發(fā)展。謝穎光等［18］探討了血必凈注射液對于重癥監(jiān)護(hù)室患者血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及對血漿中NO水平的影響，患者分為2組，常規(guī)治療組患者給予常規(guī)西醫(yī)綜合治療，血必凈組在常規(guī)西醫(yī)治療的同時，在診斷明確后應(yīng)用血必凈注射液。對所有患者在治療前后檢測血中循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)（CEC）和內(nèi)皮素（ET）－1、NO水平。結(jié)果血必凈注射液治療組更能顯著降低患者血中CEC和ET－1、NO水平，表明血必凈注射液可以保護(hù)重癥患者的內(nèi)皮細(xì)胞，降低循環(huán)中NO水平，改善重癥患者的病情。

其機(jī)制目前研究與NO的合成有關(guān)。NO的合成以左旋精氨酸和分子氧為底物由NO合成酶（NOS）催化啟動。NOS有誘導(dǎo)型NO合酶（iNOS）等3種同工酶，iNOS為炎性過程關(guān)鍵酶。當(dāng)細(xì)胞受到細(xì)胞因子或免疫微生物刺激時，iNOS催化產(chǎn)生大量NO，引起炎性反應(yīng)。朱海云等［19］觀察了血必凈注射液對膿毒癥大鼠iNOS表達(dá)的影響，觀察到血必凈治療組iNOS蛋白表達(dá)較對照組顯著降低，表明血必凈注射液能抑制膿毒癥大鼠iNOS的表達(dá)。趙光舉等［20］研究了血必凈注射液對創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠肺組織iNOS活性和NO含量的影響，結(jié)果血必凈組肺組織NO含量與同時間點模型組比較均明顯下調(diào)，表明血必凈注射液干預(yù)治療能顯著下調(diào)肺組織iNOS活性及NO生成，這和謝穎光等［18］、朱海云等［19］的研究結(jié)果一致。

2.4 其他抗炎作用機(jī)制研究 血必凈注射液還具有其他抗炎作用機(jī)制。茅堯生等［21］聯(lián)合應(yīng)用血必凈、烏司他丁治療重癥膿毒癥患者，治療后，血必凈＋烏司他丁組、單一血必凈治療組、單一烏司他丁治療組和對照組脂多糖、IL－6、TNF－α、血清降鈣素原水平均下降，其中血必凈＋烏司他丁治療組在第4、8天下降幅度顯著大于單一血必凈治療組、單一烏司他丁治療組和對照組，認(rèn)為作用機(jī)制可能除了與抑制促炎因子釋放外，還具有拮抗脂多糖、阻斷Toll樣受體和影響血清降鈣素原水平有關(guān)。呂杰等［22］觀察了盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)制備的膿毒癥大鼠模型，在膿毒癥發(fā)生初期，內(nèi)毒素及各種致炎因子引起組織血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，進(jìn)一步可引起凝血及纖溶系統(tǒng)的紊亂，在膿毒癥早期使用血必凈注射液對大鼠纖溶系統(tǒng)的激活有一定的促進(jìn)作用，這可能在一定程度上改善膿毒癥早期機(jī)體的高凝狀態(tài)，減少微血栓的形成，改善微循環(huán)，從而起到抗炎作用。

3 結(jié) 語

目前炎性反應(yīng)發(fā)病機(jī)制不是完全清楚。在炎性反應(yīng)發(fā)生和發(fā)展中，多個過程相互結(jié)合，多種物質(zhì)相互作用。因此，單一作用的抗炎制劑往往難以取得令人滿意的療效，血必凈注射液是成分復(fù)雜的中藥制劑，其機(jī)制不能以拮抗單一致病因素的理論來解釋，而是同時具有多靶點作用，具有此類機(jī)制的藥物正是目前研究的熱點方向。

血必凈注射液抗炎機(jī)制研究目前雖較為深入，但仍然存在一些不足。例如，該領(lǐng)域的研究已發(fā)展到分子水平但具體途徑不明。血必凈注射液含有數(shù)百種化學(xué)成分，阿魏酸、丹參素、川芎嗪等成分均具有清除氧自由基的作用，上述成分或其他成分也可能通過其他途徑發(fā)揮類似的作用。因此，血必凈注射液抗炎作用，到底是通過哪些成分、哪些途徑發(fā)揮效應(yīng)，彼此之間是否有協(xié)同作用或拮抗作用尚不清楚。再如抗炎構(gòu)效關(guān)系研究欠缺，大規(guī)模臨床研究匱乏等。以上均需進(jìn)一步深入研究與探討。

綜上所述，血必凈注射液具有較強抗炎作用，進(jìn)一步整體闡明其作用深層機(jī)制，將更加深刻地揭示其本質(zhì)，為開發(fā)新的適應(yīng)證、指導(dǎo)臨床用藥提供依據(jù)，具有深遠(yuǎn)現(xiàn)實意義。

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