王金晶,周 敏,劉春鳳,李 崎
(江南大學工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,江蘇 無錫 214122)
蠶豆醬口味咸鮮,帶有極微弱的甜味,能促進消化、增進食欲、驅(qū)風散寒、減少有毒物的產(chǎn)生和吸收;另一方面,食品蠶豆醬能促進機體代謝、調(diào)節(jié)腸道益生菌的生態(tài)平衡、消食化滯、促進腸道蠕動、有預防動脈硬化和高血壓等效用[1-3]。
蠶豆醬的香氣成分多且成香機制復雜,研究發(fā)現(xiàn)蠶豆醬香氣成分主要由四類物質(zhì)產(chǎn)生:由原料成分帶入產(chǎn)生;由米曲霉代謝產(chǎn)物生成;由耐鹽酵母、細菌的代謝產(chǎn)物互相作用生成;由非酶化學反應(yīng)產(chǎn)物產(chǎn)生[4-5]。傳統(tǒng)發(fā)酵生產(chǎn)的蠶豆醬具有良好風味,但由于其屬于微生物自然發(fā)酵,發(fā)酵周期長達4個月,具有非常強的季節(jié)性,導致生產(chǎn)效率較低。為縮短發(fā)酵周期許多豆醬生產(chǎn)廠家采用高溫發(fā)酵技術(shù),此法可縮短發(fā)酵周期至1個月,但生產(chǎn)的豆醬風味卻不如傳統(tǒng)發(fā)酵豐富醇厚。蠶豆醬由于其加工藝的不同,會對風味物質(zhì)形成造成不同程度影響[6]。因此,分析不同發(fā)酵工藝條件下發(fā)酵生產(chǎn)過程中風味物質(zhì)的變化,可為蠶豆醬生產(chǎn)工藝改良提供重要信息。此外,發(fā)酵過程中的微生物群落變化是風味物質(zhì)形成的基礎(chǔ),大多數(shù)豆醬中都含有霉菌、酵母菌等真菌和乳酸菌等細菌。米曲霉(Aspergillus oryzae)是蠶豆醬制作的主要原料之一,而酵母菌尤其是魯氏酵母(Saccharomyces rouxii)是主要的真菌種類之一[4-5]。不同的豆醬中含有的細菌群落有較大差異,而該差異可能是引起豆醬風味各異的主要原因[6]。固相微萃?。╯olid phase micro.extraction,SPME)技術(shù)是20世紀90年代初興起的一種樣品前處理技術(shù),最初由加拿大Waterloo大學的Pawlizyn等人提出[7],是一種快速、無溶劑的新技術(shù)。經(jīng)過不斷的改進,近年來該技術(shù)已經(jīng)在食品風味分析方面得到廣泛應(yīng)用[8-9]。
SPME技術(shù)具有操作方便、線性好、重現(xiàn)性好、靈敏性高等優(yōu)點,能夠有效快速地檢測樣本中的微量揮發(fā)性風味物質(zhì)。美國國家環(huán)境保護局也已應(yīng)用該技術(shù)作為測定水中揮發(fā)性化合物和半揮發(fā)性化合物的標準方法[10]。
高溫發(fā)酵極大地縮短了蠶豆醬的生產(chǎn)周期,降低了成本,但是在醬香和風味等方面卻不及傳統(tǒng)發(fā)酵蠶豆醬。因此,本文以安徽省A廠蠶豆醬作為對象,采用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用(HS-SPMEGC-MS)技術(shù),研究傳統(tǒng)發(fā)酵和高溫發(fā)酵兩種不同工藝不同時間點醬醅中的揮發(fā)性風味物質(zhì),比較兩種工藝揮發(fā)性風味物質(zhì)組成的異同,同時從豆醬發(fā)酵過程中微生物群落變化對其獨特風味形成作初步探索,為工業(yè)化生產(chǎn)高品質(zhì)蠶豆醬提供參考。
醬醅樣品收集于安徽省A蠶豆醬生產(chǎn)車間。固相微萃?。⊿PME)裝置:萃取頭CAR/PDMS 75 μm(碳分子篩/聚二甲基硅氧烷)美國Supelco公司;Shimadzu GC-2010氣相色譜儀(日本島津Shimadzu公司);Trance氣質(zhì)聯(lián)用儀(美國Finnigan公司);GSP-9050 MBE隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海博迅);樣品處理柱Sep-Pak C18 Cartridge(美國Waters公司);PCR儀(美國Bio-rad公司);DNA Quant TM 200濃度儀(Hoefer Pharmacia Biotech);Bio-rad D Code電泳系統(tǒng)(美國Bio-rad公司)。
1.2.1 頂空固相微萃取法(HS-SPME)萃取揮發(fā)性風味物質(zhì)
萃取頭在使用時需進行老化,在氮氣保護下于270℃老化30 min,以確保脫去其可能吸附的揮發(fā)性成分。取新鮮蠶豆醬醬醅樣品裝入15 mL樣品瓶,用聚四氟乙烯隔墊密封,置于55℃水浴中保溫30 min,設(shè)定溫度下頂空吸附預制時間,氣相進樣器內(nèi)250℃下解吸2 min。固相微萃取裝置見圖1。
圖1 HS-SPME固相微萃取裝置Fig.1 The HS-SPME device
1.2.2 質(zhì)譜條件確定
電離模式:EI+,發(fā)射電流(μA):200,驅(qū)電壓(V):0.5,電子能量(eV):70,鏡片1(V):4,鏡片2(V):35,離子能量(eV):1.8,離子能量斜坡(mV·amu-1):0.0,界面溫度(℃):250,源溫度(℃):200,低質(zhì)量分辨率:18.0,高質(zhì)量分辨率:12.6,探測器電壓(V):350。
1.2.3 色譜條件確定
初始溫度(℃):40,初始時間(min):3.00,坡道數(shù)量:2,利率#1(deg·min-1):5.0最終溫度#1(℃):60,持續(xù)時間#1(min):0.00,利率#2(deg·min-1):10.0,最終溫度#2(℃):230,持續(xù)時間#1(min):8.00,最高溫度(℃):280,平衡時間(min):0.2。
1.2.4 數(shù)據(jù)處理
醬醅樣品中各風味物質(zhì)的種類分析由Xcalibur軟件系統(tǒng)完成,未知化合物經(jīng)計算機檢索同時與NIST譜庫(1071<compounds)和 Wiley譜庫(320 k Compounds,version 6.0)相匹配,正反匹配度均>800(最大值為1000)的鑒定結(jié)果對予以采納。對于計算機沒有積分的峰,則采取手動積分,同時與NIST譜庫和Wiley譜庫相匹配,正反匹配度均>800(最大值為1000)的鑒定結(jié)果予以采納。
1.2.5 PCR-DGGE分析細菌群落
根據(jù)細菌16S rDNA V3區(qū)設(shè)計引物P2(5'-ATT ACC GCG GCT GCT GG-3')、 P3(5'-CGC CCG CCG CGC GCG GCG GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG GCC TAC GGG AGG CAG CAG-3')擴增 16S rDNA V3區(qū)約196 bp的片段。PCR產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測并用測定DNA濃度,取200 ng PCR產(chǎn)物進行變性梯度凝膠電泳(DGGE),電泳條件為:8%聚丙烯酰胺凝膠,細菌PCR產(chǎn)物凝膠變性梯度為 30%~50%,電泳緩沖液為1×TAE,60℃,200 V電壓電泳4 h,SYBR GreenⅠ染色45 min,UVI凝膠成像系統(tǒng)(UVItec)成像。PCR產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠電泳分離檢驗,電壓約11 V/cm,電泳時間30 min。將DGGE電泳后得到的條帶回收進行測序并鑒定菌種。
應(yīng)用HS-SPME-GC-MS分別對傳統(tǒng)發(fā)酵和高溫發(fā)酵兩種工藝不同時間點醬醅中的揮發(fā)性風味物質(zhì)進行檢測。取傳統(tǒng)發(fā)酵10 d、30 d、50 d、70 d、80 d的醬醅及高溫發(fā)酵7 d、14 d、21 d的醬醅,進行質(zhì)譜檢測,得到揮發(fā)性風味成分的總離子流圖(圖2),其中圖A到E為傳統(tǒng)發(fā)酵不同時間點醬醅總離子流圖,圖F到H為高溫發(fā)酵不同時間點醬醅總離子流圖。選取相對含量較大并有完整質(zhì)譜數(shù)據(jù)的組分為分析對象,通過計算機檢索,并與NIST質(zhì)譜庫提供的標準質(zhì)譜圖對照,報道匹配度最大的結(jié)果。
圖2 不同發(fā)酵工藝條件下蠶豆醬醅總離子流Fig.2 Total Ion Chromatorgraphy of broad bean paste under different fermentation technology
兩種發(fā)酵工藝中,醇類,酯類、醛類、烴類、烴類物質(zhì)的相對峰面積較大,說明這幾種物質(zhì)的含量較高。從揮發(fā)性風味物質(zhì)組分的相對含量來看,傳統(tǒng)發(fā)酵和高溫發(fā)酵蠶豆醬成熟醬醅中醇類、醛類以及酸類化合物的相對含量較高,三者之和分別占總量的70.3%、80.94%,而酯類、酮類以及烴類化合物含量相對較低。比較兩種工藝的風味物質(zhì),醇類的相對含量最大。在傳統(tǒng)發(fā)酵過程中,醇類化合物大約占總量的52.39%~60.14%,其含量在整個發(fā)酵過程中波動不大,除乙醇外,3-甲基-1-丁醇、1-辛烯-3-醇、2,3-丁二醇、苯乙醇是含量較多的醇類化合物。然而在高溫發(fā)酵過程中則發(fā)現(xiàn)發(fā)酵初期醇類物質(zhì)大量積累,占總量的50.57%,隨著發(fā)酵的進行,醇類物質(zhì)含量逐漸降低,在成熟醬醅中醇類物質(zhì)的含量占揮發(fā)性風味物質(zhì)總量的37.56%,除乙醇外主要的醇類化合物包括糠醇、1-辛烯-3-醇、3-甲基-1-丁醇、沉香萜醇、苯乙醇,其中糠醇和沉香萜醇是高溫發(fā)酵中特有的醇類,而且糠醇也是除乙醇外含量最高的醇類化合物。兩種發(fā)酵工藝條件下醛類化合物的含量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢,傳統(tǒng)發(fā)酵醛類化合物含量從發(fā)酵初期的6.30%上升到成熟醬醅中的14.44%,10~50 d的醬醅中沒有檢測到糠醛,而在70 d的醬醅中檢測到占化合物總量3.83%的糠醛;高溫發(fā)酵醛類物質(zhì)含量從發(fā)酵初期的16.69%上升到成熟醬醅中的34.07%,同時在發(fā)酵7 d的醬醅中就能夠檢測到一定含量的糠醛,并且該含量在發(fā)酵后期保持基本不變。此外,傳統(tǒng)發(fā)酵工藝條件產(chǎn)生的酮類化合物約占總量的7.23%,而高溫發(fā)酵工藝條件下產(chǎn)生的酮類化合物占總量的4.97%。傳統(tǒng)發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酚類化合物如4-乙烯基愈創(chuàng)木酚、丁香油酚在高溫發(fā)酵過程中一直沒有檢出。在高溫發(fā)酵過程中,酯的種類最為豐富,這將給高溫發(fā)酵蠶豆醬帶來更濃郁的酯香味。同時,醚類物質(zhì)在高溫發(fā)酵成熟醬醅中含量相對較低,在14 d時,醬醅中已檢測不到醚類物質(zhì)。此外,在高溫發(fā)酵揮發(fā)性風味物質(zhì)中檢測出其中含有甲基仲乙胺,可能對高溫發(fā)酵蠶豆醬風味有不好的影響。
對不同發(fā)酵工藝條件生產(chǎn)的成熟蠶豆醬醅進行揮發(fā)性物質(zhì)種類的分析(見表1),傳統(tǒng)發(fā)酵及高溫發(fā)酵的醬醅中主要揮發(fā)性風味物質(zhì)包括醇、醛、酯、酮、烴、雜環(huán)、腈、酸、醚、酚等。與高溫發(fā)酵相比,傳統(tǒng)發(fā)酵每類揮發(fā)性風味物質(zhì)的種類更多。在傳統(tǒng)發(fā)酵中有較多種類的醇類物質(zhì),雖然對口味的貢獻不大,但是許多高級醇是蠶豆醬香味的主要來源。比較傳統(tǒng)發(fā)酵與高溫發(fā)酵成熟醬醅中的風味物質(zhì),在傳統(tǒng)發(fā)酵的成熟醬醅中,酯類、酮類、酚類和氰類物質(zhì)種類與高溫發(fā)酵醬醅中相差不大,而傳統(tǒng)發(fā)酵比高溫發(fā)酵醬醅中含有更多種類的烴類、酸類和雜環(huán)類物質(zhì)。
表1 兩種不同工藝成熟醬醅中風味物質(zhì)種類比較Table 1 Volatile flavor compounds from the matured broad bean paste under different fermentation technology
對兩種工藝條件發(fā)酵成熟醬醅中的揮發(fā)性風味物質(zhì)進行鑒定,結(jié)果如表2所示。兩種工藝發(fā)酵的成熟醬醅檢出的所有化合物中有32種是兩種醬醅中共有的,分別是乙醇、丁醇、戊醇、糠醇、4-甲基-1-戊醇、己醇、3-甲基硫-1-丙醇、3-乙氧基-1-丙醇、苯甲醇、苯乙醇、3-甲基-2-丁烯醛、糖醛、壬醛、苯乙醛、乙酸乙酯、油酸乙酯、亞油酸乙酯、丙酮、2-甲基四氫呋喃-3-酮、3-羥基-2-丁酮、1-環(huán)丙烷基戊烷、6-甲基-5-庚烯-2-酮、2,2-二甲基-3-辛酮、甲苯、1,6-辛二烯、3-甲基丁酸、反式-鄰羥基肉桂酸、苯酚、丙二醇甲醚、2-乙酰吡咯、異戊腈、苯乙氰。在高溫發(fā)酵成熟醬醅中,乙醇和戊醇是兩種最主要的醇類物質(zhì),而在傳統(tǒng)發(fā)酵成熟醬醅中,占主要的醇類物質(zhì)是戊醇和糠醇,乙醇的含量僅為5.12%,是高溫發(fā)酵成熟醬醅的三分之一。比較兩種發(fā)酵工藝,傳統(tǒng)發(fā)酵生產(chǎn)的醬中檢出一些醇類化合物但在高溫發(fā)酵醬醅中沒有檢出,其中含量較多的醇有戊烷基乙烯基醇(7.75%)、2,3-丁二醇(4.45%)、苯乙醇(2.33%)、沉香萜醇(1.25%)。傳統(tǒng)發(fā)酵醬醅中的醛類物質(zhì)不如高溫發(fā)酵醬醅豐富,但其酯類物質(zhì)的種類卻比高溫發(fā)酵醬醅豐富許多。酯類物質(zhì)是蠶豆醬香味的主要貢獻因素,因此豐富的酯類物質(zhì)為傳統(tǒng)發(fā)酵蠶豆醬帶來獨特的醬香味。值得注意的是在高溫發(fā)酵醬醅中檢出吡嗪類化合物而未在傳統(tǒng)發(fā)酵醬醅中檢出。吡嗪類化合物具有典型的可可香味,其口味閾值低,高溫發(fā)酵醬醅中含有這類物質(zhì)可能給豆醬帶來特有的風味。
對傳統(tǒng)發(fā)酵 10、20、30、40、50、60、70、80天的醬醅和高溫發(fā)酵7、14、21 d的醬醅進行細菌群落分析,結(jié)果如圖3所示。
從圖上可以看出,無論是在傳統(tǒng)發(fā)酵還是高溫發(fā)酵中,條帶d、e所代表的菌群種類始終貫穿整個發(fā)酵過程,代表了醬醅細菌群落中的優(yōu)勢菌。經(jīng)鑒定d為嗜熱鏈球菌(Staphylococcus thermophilus),e為融合乳桿菌(Weissella confusa),不同發(fā)酵時間點醬醅的這兩種優(yōu)勢細菌基本處于穩(wěn)定狀態(tài),同時也說明這兩種菌的代謝對蠶豆醬風味的貢獻必不可少,正是由于這些關(guān)鍵細菌穩(wěn)定存在的代謝作用,才保證了蠶豆醬的基本風味。在傳統(tǒng)發(fā)酵中,條帶h代表的菌群(金黃色葡萄球菌,Staphylococcus succinus)在發(fā)酵過程前期處于優(yōu)勢,后期逐漸降低,而在高溫發(fā)酵中一直不屬于優(yōu)勢菌群。傳統(tǒng)發(fā)酵中條帶i(地衣芽孢桿菌,Bacillus licheniformis)、j(嗜鹽四聯(lián)球菌,Tetragenococcus halophilus)所代表的菌群在發(fā)酵前期濃度較低,后期逐漸轉(zhuǎn)為優(yōu)勢菌群,而在高溫發(fā)酵中,其優(yōu)勢隨時間的推移而逐漸減弱。細菌的代謝產(chǎn)物隨菌落數(shù)量的變化而變化,從而影響著不同工藝蠶豆醬最終不同風味的形成。另外,傳統(tǒng)發(fā)酵中具有m(馬里乳桿菌,Lactobacillus acidipiscis)、n(乳酸片球菌,Pediococcus acidilactici)菌群而高溫發(fā)酵中沒有,蠶豆醬發(fā)酵過程中,這些傳統(tǒng)發(fā)酵中獨有細菌的代謝作用可能與其獨特風味的形成有關(guān)。
表2 不同發(fā)酵工藝成熟醬醅中鑒定出的揮發(fā)性化合物Table 2 Identified volatile compounds and their relative contents in different broad bean pastes
續(xù)表
圖3 細菌16S rDNA V3區(qū)域PCR-DGGE分析Fig.3 PCR-DGGE analysis of bacteria 16S rDNA V3 region
蠶豆醬的風味主要來自于發(fā)酵過程中微生物的代謝,前期研究發(fā)現(xiàn),醬醅中典型的酵母菌株屬魯氏酵母,在醬醅發(fā)酵前期,由于醬醅中糖含量較高且pH適宜酵母生長,因此產(chǎn)生大量酒精,生成少量甘油、琥珀酸以及其他多元醇[5]。醬品中醇類化合物主要是由酵母產(chǎn)生[5],因此醇類物質(zhì)在兩種醬醅中含量所占比例最大。但醇化合物閾值普遍較大,對蠶豆醬風味貢獻較小。醇類化合物中糠醇是蠶豆醬中一類揮發(fā)性風味物質(zhì)[11],研究發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)主要是由嗜鹽片球菌與魯氏酵母共同作用生成,能夠賦予蠶豆醬獨特香氣。酮類、醛類以及酚類物質(zhì)則是在蠶豆醬的后熟過程中產(chǎn)生。在后熟過程中,游離氨基酸和羰基會發(fā)生羰氨反應(yīng),以及Strecker氨基酸反應(yīng),其產(chǎn)物大都為醛、酮和酚類化合物[12-13]。酮類化合物是醛類化合物的前體物質(zhì),而醛類化合物能賦予蠶豆醬以堅果香、果香的芳香味[14]。兩種發(fā)酵工藝條件下醛類化合物的含量都呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢,其中糠醛是傳統(tǒng)豆醬中特征性揮發(fā)性風味物質(zhì)之一[14],在蠶豆醬后熟過程中逐漸產(chǎn)生,高溫發(fā)酵工藝加快豆醬的發(fā)酵過程,使其能夠更早形成,縮短了后熟時間。由于高溫發(fā)酵條件下溫度較傳統(tǒng)發(fā)酵高出許多,而Maillard反應(yīng)在高溫條件下更加劇烈,因此推測由于發(fā)酵溫度升高,在成熟醬醅中檢測到含量較高的醛類和酮類化合物。酯類化合物主要是由魯式酵母、米曲霉等真菌與細菌共同作用產(chǎn)生,賦予蠶豆醬特殊的芳香味。對比兩種不同發(fā)酵工藝,傳統(tǒng)發(fā)酵過程中蠶豆醬中檢出酯的種類始終多于高溫發(fā)酵蠶豆醬,其酯類化合物占總量的比例也高于高溫發(fā)酵蠶豆醬,這也是傳統(tǒng)發(fā)酵豆醬口感風味較豐富的原因之一。酚類化合物具有典型的醬香味,能調(diào)節(jié)鹽分的成味作用[14],雖然這類物質(zhì)在蠶豆醬中含量不高,閾值較低,對豆醬風味貢獻較大。4-乙烯基愈創(chuàng)木酚、丁香油酚兩種在傳統(tǒng)發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酚類具有獨特的香味,乙烯基愈創(chuàng)木酚具有強烈香辛料和發(fā)酵香氣,丁香油酚則具有強烈的丁香香氣,這些酚類化合為傳統(tǒng)發(fā)酵蠶豆醬提供了更獨特的風味。在兩種不同工藝條件下均發(fā)現(xiàn)吡嗪化合物的含量相對較少,吡嗪類化合物的呈味閾值非常小,在許多食品中具有特征性的呈味特性[15],可能是蠶豆醬中的獨特風味組成部分,對蠶豆醬醇厚風味的形成有較大影響[16]。
豆醬的鮮味主要來源于微生物(如米曲霉)分解蠶豆蛋白質(zhì)形成的氨基酸與鈉鹽相互作用而產(chǎn)生,而稍稍偏酸的口感則來源于豆醬發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酸類物質(zhì),一般由乳酸菌產(chǎn)生,與蠶豆醬風味形成有密切關(guān)系的細菌為大多為乳酸菌。據(jù)報道,在傳統(tǒng)的豆醬發(fā)酵過程中,醬醅中總酸含量呈現(xiàn)出先升后降、而后又上升的趨勢,在60 d內(nèi)總酸含量會從1.89%增加至6.26%[17-18]。雖然高溫發(fā)酵過程中總酸呈現(xiàn)的趨勢與傳統(tǒng)發(fā)酵一致,但是傳統(tǒng)發(fā)酵醬醅中酸類風味物質(zhì)的種類明顯高于高溫發(fā)酵豆醬。蠶豆醬中主要的揮發(fā)性酸類物質(zhì)為醋酸、丁酸、脂肪酸等。醋酸主要是由醋酸菌將酒精氧化而來;丁酸也具有特殊香氣;而高級脂肪酸則是由某些細菌如嗜熱鏈球菌代謝產(chǎn)生。相較而言,高級脂肪酸對蠶豆醬的香味的貢獻有限,而有機酸則更多地參與酯化反應(yīng),構(gòu)成“酯”香風味。適量的有機酸對醬呈香、增香、增味均有重要作用。
此外,生物胺類有毒物質(zhì)在高溫發(fā)酵過程中有微量檢出,由微生物生成的胺有腐胺、尸胺、苯基乙胺、亞精胺、精胺、色胺、組胺、酪胺、胍丁胺。生物胺如N-亞硝胺被認為是致癌物質(zhì),是豆類發(fā)酵過程中由于微生物的作用形成,而且已見報道[11]。因此,在高溫發(fā)酵的工藝中,應(yīng)采取一定措施避免胺類物質(zhì)的產(chǎn)生。
對傳統(tǒng)發(fā)酵和高溫發(fā)酵工藝中不同時期醬醅揮發(fā)性風味物質(zhì)進行檢測,得到揮發(fā)性風味成分有腈、醛、酯、醇、酮、雜環(huán)、烴、酸、醚、酚等,其中醇類、醛類、酯類、酮類物質(zhì)相對含量較高。兩種工藝的風味物質(zhì)中,醇類相對含量最高,但其閾值較高,對豆瓣醬的風味貢獻較小。酮類、醛類和酚類與蠶豆醬后熟過程相關(guān),其含量呈逐漸上升趨勢,并且高溫發(fā)酵蠶豆醬中醛類物質(zhì)形成較傳統(tǒng)發(fā)酵早。此外,雜環(huán)類中吡嗪化合物的相對比例較小,但該類物質(zhì)具有獨特呈味特性,推測其對發(fā)酵豆制品的獨特風味有一定貢獻,對蠶豆醬醇厚風味的形成有影響。發(fā)酵過程中生成的糠醇則賦予豆醬獨特香氣。對不同發(fā)酵過程中的細菌群落進行初步分析,傳統(tǒng)發(fā)酵中存在一些區(qū)別于高溫發(fā)酵的菌群。
[1] Ross R P,Morgan S,Hill C.Preservation and fermentation foods:past,present and future[J].International Journal of Food Microbiology,2002,79:3-16.
[2] Minamiyama Y,Takemura S,Yoshikawa T.Fermented grain products,production,properties and benefits to health[J].Pathphysiology,2003(9):221-227.
[3] 閆惠麗,張永忠,丁莉莎.摩爾吸光系數(shù)法測定醬渣餅和大豆異黃酮產(chǎn)品中總異黃酮含量的研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學學報,2009,40(11):7-10.
[4] Hong K J,Lee C H,Kim S W.Aspergillus oryzae GB-107 fermentation improves nutritional quality of food soybeans and feed soybean meals[J].Journal of Medicinal Food,2004,7:430-435.
[5] 劉春鳳,劉金霞,李崎.傳統(tǒng)發(fā)酵成熟期豆瓣醬醅中的微生物群落分析[J].食品工業(yè)科技,2012,13:122-126.
[6] 雷宏杰,劉金霞,李崎.豆醬生理功能性物質(zhì)研究進展及其現(xiàn)存質(zhì)量問題[J].中國釀造,2008,13:1-4.
[7] 田紅玉,孫寶禺,張慧麗.香成分分析中的樣品制備技術(shù)[J].北京工商大學學報:自然科學版,2006,24(5):1-5.
[8] Rowe V J.Chemistry and technology of flavors and fragrances[M].UK Oxford:Blackwell Publishing Ltd.2005.
[9] Marsili R T.Shelf-life prediction of processed milk by solid·phase microextraction,mass spectrometry,and multivariate analysis[J].Journal of Food Chemistry,2000,48:3 470-475.
[10] 徐琳娜,王璋,許時嬰.固相微萃取技術(shù)在豆瓣風味物質(zhì)分析中的應(yīng)用[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32:114-l 16.
[11] 徐琳娜,王璋,許時嬰.豆瓣醬后熟過程中氨基酸和風味物質(zhì)的變化[J].中國調(diào)味品,2006(9):21-25.
[12]Zibell S F.Firma willhelm Tette Gm-bh[P].US:5221543,1993.
[13] 孫君社,吳小華.傳統(tǒng)調(diào)味料的超微粉化及其表征[J].農(nóng)業(yè)工程學報,2000,16:88-90.
[14] 趙建新,顧小紅,劉楊岷.傳統(tǒng)豆醬揮發(fā)性風味化合物的研究[J].食品科學,2006,27(12):684-687.
[15] 肖天鵬,鄭曉峰,呂吉鴻.頂空-固相微萃取-氣相色譜法檢測可可麥汁中吡嗪類化合物[J].分析化學,2012,40(10):1589-1592.
[16] 竇炳義.我國調(diào)味品的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢[J].中國調(diào)味品,1999(4):2-4.
[17] 劉志偉,譚興和,姚曙光.豆瓣醬的研究進展及發(fā)展方向[J].中國調(diào)味品,2011,36:13-16.
[18] 高秀芝,王小芬,李獻梅.傳統(tǒng)發(fā)酵豆醬發(fā)酵過程中養(yǎng)分動態(tài)及細菌多樣性[J].微生物學通報,2008(5):748-753.