• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    VDR基因FokⅠ多態(tài)性與不同嚴重程度前列腺炎發(fā)生的關聯(lián)性分析

    2013-06-20 08:10:10李正明
    吉林大學學報(醫(yī)學版) 2013年3期
    關鍵詞:頻數關聯(lián)性中度

    阮 黎,華 興,李正明

    (1.廣東省廣州市紅十字會醫(yī)院,暨南大學醫(yī)學院附屬廣州紅十字會醫(yī)院泌尿外科,廣東 廣州 510220,2.廣東省廣州市紅十字會醫(yī)院病理科,廣東 廣州 510220)

    VDR基因FokⅠ多態(tài)性與不同嚴重程度前列腺炎發(fā)生的關聯(lián)性分析

    阮 黎1,華 興2,李正明1

    (1.廣東省廣州市紅十字會醫(yī)院,暨南大學醫(yī)學院附屬廣州紅十字會醫(yī)院泌尿外科,廣東 廣州 510220,2.廣東省廣州市紅十字會醫(yī)院病理科,廣東 廣州 510220)

    目的:研究維生素D受體(VDR)基因啟動子FokⅠ單核苷酸多態(tài)性(SNP)與不同嚴重程度前列腺炎(HP)的關聯(lián)性,探討遺傳學因素在HP發(fā)病中的作用。方法:選擇169例良性前列腺增生(BPH)并發(fā)HP患者,采用常規(guī)病理學檢查將患者分為輕度組79例,中度組52例,重度組38例,應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法進行FokⅠSNP檢測,分析3組患者基因型和等位基因頻數分布情況。結果:輕、中度HP患者FokⅠ位點3種基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05),重度HP患者中FokⅠ位點3種基因型的分布不符合Hardy-Weinberg平衡定律(P<0.05)。FF、Ff和ff基因型在輕度和中度HP患者的分布為32%(25/79),46%(36/79);22%(18/79),23%(12/52);40%(21/52),37%(19/52);組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。F基因頻率在輕度和中度 HP患者組分別為54%(86/158)和43%(45/104),f基因頻率在2組間分別為46%(72/158)和57%(59/104),組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論:VDR基因FokⅠSNP可能與不同嚴重程度HP發(fā)生無關聯(lián)。

    組織學前列腺炎;單核苷酸多態(tài)性;維生素D受體

    維生素D是一種多種生物效應的激素類載體,通過維生素D受體(vitamin D receptor,VDR)發(fā)揮生理作用[1]。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)是一種常見的遺傳學類型。國外研究[2]發(fā)現(xiàn):基因SNP與組織學前列腺炎(histological prostatitis,HP)的發(fā)生有一定的關聯(lián)性。而VDR基因與HP的發(fā)生也有一定的關聯(lián)性[3],VDR基因啟動子上存在FokⅠ位點SNP。本文作者前期研究[4]發(fā)現(xiàn):VDR基因FokⅠ位點SNP與HP的發(fā)生有一定的關聯(lián)性,而SNP作為遺傳因素在導致不同嚴重程度非特異性炎癥的發(fā)生中有不同的作用[5]。目前尚未見VDR基因SNP與不同嚴重程度HP關聯(lián)性的報道。本研究主要分析VDR基因FokⅠ位點SNP與不同嚴重程度HP發(fā)生的關聯(lián)性,從而探討遺傳學因素在HP發(fā)病中的作用。

    1 資料與方法

    1.1 研究對象 收集2008年8月—2011年12月在本院泌尿外科治療的良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)并發(fā)HP患者169例,按照病理檢查結果分為輕度組79例,中度組52例,重度組38例。HP的診斷標準:以國際HP組織學分類診斷標準[6]為依據。輕度:前列腺組織中出現(xiàn)散在的炎性細胞浸潤;中度:前列腺組織中出現(xiàn)炎性細胞的聚集,但不伴有腺體上皮組織的破壞或淋巴樣小結形成;重度:前列腺組織中出現(xiàn)炎性細胞的聚集,同時伴有腺體上皮組織的破壞或淋巴樣小結形成。3組患者的年齡[(73.9±2.7)歲、(73.6±2.7)歲、(74.1±2.1)歲]差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。其中重度組與輕度組前列腺體積[(42.4±2.7)mL、(41.5±5.2)mL]和前列腺特異性抗原(prostate specific antigen,PSA)的表 達 水 平 [(3.0±0.7)μg· L-1、 (2.6±0.9)μg·L-1]差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。3組患者最大尿流率[(10.1±1.5)mL·s-1、(9.7±2.0)mL·s-1、(9.1±0.7)mL·s-1]差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。所有患者前列腺標本均為經尿道前列腺電切(TURP)獲得。本研究經本院倫理委員會批準,參試者均簽署知情同意書。病理檢查均經過2名病理醫(yī)師確診。

    1.2 主要試劑及儀器 無水乙醇、高速離心機(Eppendorf公司,德國);PCR儀(ABI公司,美國);凝膠成像分析系統(tǒng)(Syngene公司,美國)。

    1.3 DNA的提取 抽取研究對象肘靜脈血2mL,經EDTA抗凝,采用TIANamp Genomic DNA Kit試劑盒(深圳晶美公司)提取基因組。

    1.4 PCR擴增 通過GenBank檢索到VDR基因序列[gi:29745161],Genefisher設計引物:上游,5′-ACTGACTCTGGCTCTGAC-3′; 下 游, 5′-CACCTTGCTTCTTCTCCC-3′,引物合成由深圳晶美公司完成。擴增VDR包含起始密碼FokⅠ的DNA片段,預期產物片段長度為246bp。PCR反應體系:反應總體積為50μL,含2μL模板DNA,8μL上、下游引物,2μL dNTPs,0.7μL Taq DNA聚合酶和相應的緩沖液。反應條件為:預變性96℃、8min;94℃、45s,52℃、60s,72℃、30s,共40個循環(huán);72℃延伸10min。

    1.5 聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCRRFLP)分析 對起始密碼多態(tài)位進行PCR擴增后,取10μL PCR產物加入限制性內切酶FokⅠ(深圳晶美公司)0.5μL和10×buffer 1μL,牛血清白蛋白1μL,DNA 7.5μL,總反應體系為20μL,37℃過夜,采用2%瓊脂糖凝膠對酶切產物行電泳分析,自動凝膠成像儀成像,檢測基因型。

    1.6 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。VDR基因型頻數分布組間比較采用χ2檢驗。

    2 結 果

    2.1 基因型的PCR-RFLP分析 目的片段產物經FokⅠ 酶切后,檢測到3種基因型:①等位基因上存在2個酶切位點的ff基因型,電泳顯示為199bp和59bp 2條帶;②無酶切位點的FF基因型,電泳顯示為246bp 1條帶;③有1個酶切位點的Ff基因型,電泳顯示為246、199和59bp 3個條帶。見圖1。

    2.2 不同嚴重程度HP患者VDR基因FokⅠ位點基因型頻數分布 輕度和中度HP患者FokⅠ位點等位基因頻數分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,說明在遺傳學上輕度和中度HP患者具有代表性;重度HP患者FokⅠ位點等位基因頻數分布不符合Hardy-Weinberg平衡定律,說明重度HP患者不具有遺傳代表性,不能納入分析。見表1。

    2.3 輕度和中度HP患者中3種基因型頻數分布的差異 FF、Ff和ff基因型及等位基因F和f在輕度組與中度組之間的分布差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。提示FokⅠ位點SNP與HP的嚴重程度無關聯(lián)性。見表2。

    圖1 VDR基因經FokⅠ酶切后的PCR-RFLP電泳圖Fig.1 Electrophoregram of PCR-RFLP results of VDR gene digested by FokⅠ

    表1 各組FokⅠ位點基因型頻數的分布Tab.1 The distribution of genotypic frequency of FokⅠsite in various groups

    表2 輕度與中度HP組患者FokⅠ位點基因型和等位基因頻數分布Tab.2 The distribution of genotypic and allelic frequencies of FokⅠsite of patients in mild and moderate HP groups[n(η/%))

    3 討 論

    HP的發(fā)病原因未完全闡明,HP對BPH的影響亦不明確。目前有研究[7-8]發(fā)現(xiàn):HP與BPH以及前列腺癌的發(fā)生和進展有一定的關聯(lián)性。因此,有必要對HP的發(fā)生發(fā)展進行進一步研究。

    VDR是介導1,25(OH)2D3發(fā)揮生物效應的核受體,為核受體超家族的成員之一。VDR在本質上是一種配體依賴性的核轉錄因子。目前已經發(fā)現(xiàn)的VDR基因上存在的與疾病發(fā)生有關的基因多態(tài)性位點有BsmⅠ、TaqⅠ和FokⅠ等酶切位點[9]。以往主要研究這些多態(tài)性位點與腸癌[10]、乳腺癌[11]和基底細胞癌[12]等惡性腫瘤之間的關聯(lián)性,目前研究[13-15]發(fā)現(xiàn):這些位點與特異性炎癥如結核或非特異性炎癥均有一定的關聯(lián)性,從而導致疾病的不同轉歸。

    本研究采用PCR-RFLP方法檢測了VDR基因啟動子上存在的FokⅠ位點的SNP與不同嚴重程度HP發(fā)生之間的關系。雖然VDR基因啟動子上存在的FokⅠ位點SNP與BPH并發(fā)HP有關聯(lián)性,但本研究結果顯示:輕度與中度HP患者3種基因型的頻數分布差異無統(tǒng)計學意義,VDR基因啟動子上FokⅠ位點SNP可能與不同嚴重程度HP的發(fā)生無一定的關聯(lián)性,說明該位點SNP對前列腺組織中炎癥反應的影響程度無差異性。

    目前關于HP的發(fā)生與VDR基因SNP的關聯(lián)性報道較少。本課題研究結果雖然顯示VDR基因啟動子上存在的FokⅠ位點SNP與輕度和中度HP的發(fā)生可能無關聯(lián)性,而且重度HP的樣本不符合Hardy-Weinberg平衡定律,但這只是初步結果,需要更大樣本量和在不同人群中進行更加廣泛的研究,并進行多位點SNP的聯(lián)合分析,確定不同SNP位點的相互干擾作用以及意義,才能得出更完善的結論。

    [1]Medeiros R,Monais A,Vasconcelos A,et al.The role of vitamin D receptor gene polymorphisms in the susceptibility to prostate cancer of a southern European population [J].J Hum Genet,2002,47 (8):413-418.

    [2]Fesinmeyer MD,Kwon EM,F(xiàn)u R,et al.Genetic variation in RNASEL and risk for prostate cancer in a population-based case-control study [J].Prostate,2011,71 (14):1538-1547.

    [3]Fibbi B,Penna G,Morelli A,et al.Chronic inflammation in the pathogenesis of benign prostatic hyperplasia [J].Int J Androl,2010,33 (3):475-488.

    [4]阮 黎,鐘惟德,李正明,等.維生素D受體基因FokⅠ多態(tài)性與良性前列腺增生合并組織學前列腺炎的關系 [J].中華男科學雜志,2011,17 (10):880-883.

    [5]Marcil V,Sinnett D,Seidman E,et al.Association between genetic variants in the HNF4Agene and childhood-onset Crohn’s disease [J].Genes Immun,2012,13 (7):556-565.

    [6]張祥華,張 騫,李學松,等.良性前列腺增生合并組織學前列腺炎的檢出率--兩種不同診斷標準的比較研究 [J].中華臨床醫(yī)師雜志:電子版,2007,12 (7):34-36.

    [7]van Vuuren SP,Heyns CF,Zarrabi AD.Significance of histological prostatitis in patients with urinary retention and underlying benign prostatic hyperplasia or adenocarcinoma of the prostate [J].BJU Int,2012,109 (8):1194-1197.

    [8]Edlin RS,Heyns CF,van Vuuren SP,et al.Prevalence of histological prostatitis in men with benign prostatic hyperplasia or adenocarcinoma of the prostate presenting without urinary retention [J].S Afr J Surg,2012,50 (4):127-130.

    [9]Bid HK,Chaudhary H,Mittal RD.Association of vitamin-D and calcitonin receptor gene polymorphism in pediatric nephrolithiasis[J].Pediatr Nephrol,2005,20 (6):773-776.

    [10]Bentley RW,Keown DA,Gearry RB,et al.Vitamin D receptor polymorphisms in colorectal cancer in New Zealand:an association study [J].N Z Med J,2012,125 (1356):47-51.

    [11]Engel LS,Orlow I,Sima CS,et al.Vitamin D receptor gene haplotypes and polymorphisms and risk of breast cancer:a nested case-control study [J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2012,21 (10):1856-1867.

    [12]Jorgensen TJ, Ruczinski I, Yao Shugart Y,et al.A population-based study of hedgehog pathway gene variants in relation to the dual risk of basal cell carcinoma plus another cancer[J].Cancer Epidemiol,2012,36 (5):288-293.

    [13]劉輊彬,鄭瑞娟,肖和平,等.漢族459例結核病易感基因多態(tài)性與臨床特征的相關性 [J].中華結核和呼吸雜志,2011,34 (12):923-928.

    [14]Martelli FS,Mengoni A,Martelli M,et al.VDR TaqI polymorphism is associated with chronic periodontitis in Italian population [J].Arch Oral Biol,2011,56 (12):1494-1498.

    [15]Pillai DK,Iqbal SF,Benton AS,et al. Associations between genetic variants in vitamin D metabolism and asthma characteristics in young African Americans:apilot study [J].J Investig Med,2011,59 (6):938-946.

    Association analysis between vitamin D receptor gene polymorphism and occurrence of different degrees of histological prostatitis

    RUAN Li1,HUA Xing2,LI Zheng-ming1
    (1.Department of Urinary Surgery,Affiliated Guangzhou Red Cross Hospital,School of Medical Science,Jinan University,Guangzhou City Red Cross Hospital of Guangdong Province,Guangzhou 510220,China;2.Department of Pathology,Guangzhou Red Cross Hospital,Guangdong Prvince,Guangzhou 510220,China)

    Objective To investigate the association between single nucleotide polymorphism (SNP)of FokⅠin vitamin D receptor(VDR)gene and different degrees of histological prostatitis(HP),and to discuss the role of genetic factors in the onset of HP.Methods 169patients with benign prostatic hyperplasia(BPH)complicated with HP were selected.The mild(79cases),moderate(52cases)and severe(38cases)HP patients were distinguished by pathological examination.Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP)was used to determine the SNP of Fok Ⅰ of patients.The distribution of genotypic and allelic frequencies of the patients in various groups was analyzed.Results The distribution of genotypic frequency of FokⅠsite in mild and moderate HP patients didn’t deviate from Hardy-Weinberg equilibrium(P>0.05).The distribution of genotypic frequency of FokⅠgene in severe HP patients deviated from Hardy-Weinberg equilibrium(P<0.05).The distribution of FF,F(xiàn)f,ff genotypes in mild and moderate HP patients were 32%(25/79),46%(36/79);22% (18/79),23% (12/52);40% (21/52),37% (19/52),respectively;there was no significant difference between two groups(P>0.05).The allelic frequencies of F and f were 54%(86/158),46%(72/158)in mild HP patients and 43% (45/104),57% (59/104)in moderate HP patients,respectively;there was no significant difference between two groups(P>0.05).Conclusion VDR gene FokⅠ SNP may not associate with the occurrence of different degrees of HP.

    histological prostatitis;single nucleotide polymorphism;vitamin D receptor

    R588

    A

    1671-587Ⅹ(2013)03-0570-04

    10.7694/jldxyxb20130330

    2012-10-19

    國家自然科學基金面上項目資助課題 (81272849)

    阮 黎 (1978-),男,湖北省荊門市人,副主任醫(yī)師,醫(yī)學博士,主要從事泌尿男科基礎和臨床研究。

    阮 黎 (Tel:020-34403797,E-mail:ruanli1978@126.com)

    猜你喜歡
    頻數關聯(lián)性中度
    小米手表
    電腦報(2020年12期)2020-06-30 19:56:42
    四物湯有效成分的關聯(lián)性分析
    中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:05
    中考頻數分布直方圖題型展示
    如何準確認定排污行為和環(huán)境損害之間的關聯(lián)性
    LEEP治療中度宮頸上皮內瘤變對HPV感染的影響
    癌癥進展(2016年9期)2016-08-22 11:33:10
    學習制作頻數分布直方圖三部曲
    CRP檢測與新生兒感染的關聯(lián)性
    頻數和頻率
    盜汗病治療藥物性味歸經頻數分析
    輿論引導中度的把握
    聲屏世界(2014年6期)2014-02-28 15:18:07
    亚洲美女搞黄在线观看| 国产男人的电影天堂91| 成人无遮挡网站| 男人狂女人下面高潮的视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产精品女同一区二区软件| 乱系列少妇在线播放| 国产综合懂色| 高清午夜精品一区二区三区 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 免费av观看视频| ponron亚洲| 97超视频在线观看视频| 精品欧美国产一区二区三| 精品久久久久久久久久久久久| 国内精品一区二区在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 在线观看美女被高潮喷水网站| 午夜激情欧美在线| 国产午夜精品一二区理论片| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲国产精品成人综合色| 又爽又黄无遮挡网站| 91精品一卡2卡3卡4卡| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲人与动物交配视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 此物有八面人人有两片| videossex国产| 春色校园在线视频观看| 国产日韩欧美在线精品| av.在线天堂| 高清日韩中文字幕在线| 天天躁日日操中文字幕| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲,欧美,日韩| 午夜福利在线在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 热99re8久久精品国产| 成人欧美大片| 日本五十路高清| 嫩草影院精品99| 少妇人妻精品综合一区二区 | 久久精品国产自在天天线| 天美传媒精品一区二区| 九九爱精品视频在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 超碰av人人做人人爽久久| 99热6这里只有精品| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| ponron亚洲| 床上黄色一级片| 精品一区二区三区视频在线| 可以在线观看毛片的网站| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产一区亚洲一区在线观看| 久99久视频精品免费| 国产精品电影一区二区三区| 国产三级在线视频| 岛国在线免费视频观看| 亚洲人成网站在线播| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 最新中文字幕久久久久| 毛片女人毛片| 亚洲在线自拍视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 一边亲一边摸免费视频| 韩国av在线不卡| 在线播放无遮挡| 久久99精品国语久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品久久久久久成人av| 在线观看免费视频日本深夜| 精品久久久久久久久av| 成年免费大片在线观看| 看十八女毛片水多多多| 精品午夜福利在线看| 99久国产av精品国产电影| 久久久精品大字幕| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产精品三级大全| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲欧洲国产日韩| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 只有这里有精品99| 日本爱情动作片www.在线观看| 99久国产av精品| 九草在线视频观看| 国产高清视频在线观看网站| 韩国av在线不卡| av在线亚洲专区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 岛国在线免费视频观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 大香蕉久久网| 亚洲美女视频黄频| 成人av在线播放网站| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| av天堂在线播放| 亚洲国产精品合色在线| 亚州av有码| 人妻少妇偷人精品九色| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产精品免费一区二区三区在线| 99在线视频只有这里精品首页| 午夜视频国产福利| 最新中文字幕久久久久| 午夜爱爱视频在线播放| 少妇熟女aⅴ在线视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲国产色片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲自偷自拍三级| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久鲁丝午夜福利片| 热99在线观看视频| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲欧美日韩东京热| 久久亚洲精品不卡| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美日本视频| 久久久久久伊人网av| 午夜精品在线福利| 国产探花极品一区二区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 人妻少妇偷人精品九色| 免费无遮挡裸体视频| 最新中文字幕久久久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 草草在线视频免费看| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产一区二区在线观看日韩| 精品一区二区三区视频在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日日撸夜夜添| 色视频www国产| 少妇高潮的动态图| 国产男人的电影天堂91| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美最新免费一区二区三区| 97在线视频观看| 久久久国产成人精品二区| 亚洲色图av天堂| 亚洲av免费在线观看| 三级毛片av免费| 内射极品少妇av片p| 国产高清激情床上av| 老司机影院成人| 看黄色毛片网站| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 黄色日韩在线| a级毛片a级免费在线| 国产v大片淫在线免费观看| .国产精品久久| 欧美精品国产亚洲| 欧美成人精品欧美一级黄| 日本成人三级电影网站| 精品久久久久久久久av| 日本在线视频免费播放| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 青春草亚洲视频在线观看| 高清毛片免费看| 国产免费一级a男人的天堂| 中国国产av一级| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产精品女同一区二区软件| 日韩欧美国产在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 免费搜索国产男女视频| 在线国产一区二区在线| 高清日韩中文字幕在线| 国产视频内射| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日本一本二区三区精品| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产免费男女视频| 色吧在线观看| 晚上一个人看的免费电影| av.在线天堂| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产视频内射| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 精品免费久久久久久久清纯| 99精品在免费线老司机午夜| 日韩制服骚丝袜av| 成人鲁丝片一二三区免费| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 日韩强制内射视频| 成人美女网站在线观看视频| 成人国产麻豆网| 亚洲国产精品成人久久小说 | 能在线免费看毛片的网站| a级一级毛片免费在线观看| 最新中文字幕久久久久| 三级毛片av免费| av福利片在线观看| 久久久精品94久久精品| 亚洲人成网站高清观看| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久色成人| 日本成人三级电影网站| 国产高清有码在线观看视频| 在线国产一区二区在线| 精品午夜福利在线看| 中出人妻视频一区二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一级毛片我不卡| 亚洲成av人片在线播放无| 久久久久久久久大av| 精品无人区乱码1区二区| 国产高清不卡午夜福利| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲av男天堂| 老司机福利观看| 两个人的视频大全免费| 中国美女看黄片| 91精品一卡2卡3卡4卡| 丰满人妻一区二区三区视频av| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久热精品热| 99久国产av精品国产电影| 亚洲欧美日韩东京热| 色哟哟·www| 午夜精品国产一区二区电影 | 免费观看的影片在线观看| 尾随美女入室| 久久精品综合一区二区三区| 精品久久久噜噜| eeuss影院久久| 国产麻豆成人av免费视频| 日本成人三级电影网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 免费一级毛片在线播放高清视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日本成人三级电影网站| 色播亚洲综合网| 亚洲成av人片在线播放无| 99久久中文字幕三级久久日本| 性欧美人与动物交配| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产不卡一卡二| 久久精品夜色国产| 国产精品一区二区性色av| 免费人成视频x8x8入口观看| 成人永久免费在线观看视频| 国国产精品蜜臀av免费| 精品久久久噜噜| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 午夜免费男女啪啪视频观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 国产三级在线视频| 精品欧美国产一区二区三| 一个人看的www免费观看视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 又爽又黄a免费视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 九九在线视频观看精品| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品伦人一区二区| 亚洲国产精品合色在线| 日日啪夜夜撸| 69人妻影院| 在线播放国产精品三级| 亚洲一区二区三区色噜噜| 精品午夜福利在线看| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 91aial.com中文字幕在线观看| av卡一久久| 天堂网av新在线| 2022亚洲国产成人精品| 69人妻影院| 观看免费一级毛片| 国产乱人视频| 久久久久久大精品| 老司机福利观看| 国产极品精品免费视频能看的| 长腿黑丝高跟| 一本一本综合久久| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久久久久久久久黄片| 国产成人aa在线观看| 亚洲在久久综合| 国产精品一及| 日韩一区二区三区影片| 久久鲁丝午夜福利片| av免费在线看不卡| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产伦在线观看视频一区| 热99在线观看视频| 国产片特级美女逼逼视频| 尾随美女入室| 精品一区二区免费观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩精品青青久久久久久| 免费搜索国产男女视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日韩欧美精品v在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 99热这里只有是精品50| 久久亚洲精品不卡| 极品教师在线视频| 美女大奶头视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人妻夜夜爽99麻豆av| 日韩高清综合在线| 全区人妻精品视频| 高清毛片免费观看视频网站| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 国产精品不卡视频一区二区| 激情 狠狠 欧美| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲内射少妇av| 日韩视频在线欧美| 国产精品免费一区二区三区在线| 十八禁国产超污无遮挡网站| 美女黄网站色视频| 老女人水多毛片| 久久久久久伊人网av| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 99热6这里只有精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 99riav亚洲国产免费| 国产毛片a区久久久久| 最近视频中文字幕2019在线8| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 高清日韩中文字幕在线| 在线播放国产精品三级| 热99在线观看视频| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 精品久久久久久久末码| 岛国毛片在线播放| a级毛片a级免费在线| 成人综合一区亚洲| 国产精品一区二区三区四区久久| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 男人狂女人下面高潮的视频| 村上凉子中文字幕在线| a级毛色黄片| 国产爱豆传媒在线观看| 久久久色成人| 永久网站在线| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲成人av在线免费| 嫩草影院新地址| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 一边亲一边摸免费视频| 99热精品在线国产| 久久人人爽人人爽人人片va| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚州av有码| 国产乱人偷精品视频| 26uuu在线亚洲综合色| 一级黄片播放器| 国产乱人视频| 久久人人爽人人片av| 成人毛片a级毛片在线播放| 老司机影院成人| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 看十八女毛片水多多多| 国产精品久久久久久av不卡| 久久久久久久久久成人| 欧美性感艳星| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美zozozo另类| 看十八女毛片水多多多| 最近手机中文字幕大全| 国内精品美女久久久久久| 好男人在线观看高清免费视频| 成人毛片60女人毛片免费| 精品一区二区三区视频在线| 此物有八面人人有两片| 婷婷色av中文字幕| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 特大巨黑吊av在线直播| 色噜噜av男人的天堂激情| 内地一区二区视频在线| 免费电影在线观看免费观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 成年女人永久免费观看视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲中文字幕日韩| 免费观看的影片在线观看| 国产精品一区二区性色av| 午夜爱爱视频在线播放| 国产三级在线视频| 亚洲人成网站在线播| 99久久精品热视频| 国内精品久久久久精免费| 国产一区二区激情短视频| 国产精品人妻久久久久久| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美人与善性xxx| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久精品91蜜桃| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 欧美日韩在线观看h| 91精品国产九色| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲av成人精品一区久久| 有码 亚洲区| 欧美日本视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 麻豆乱淫一区二区| 26uuu在线亚洲综合色| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产激情偷乱视频一区二区| 免费大片18禁| 三级经典国产精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 美女高潮的动态| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产午夜福利久久久久久| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美又色又爽又黄视频| 久久精品久久久久久久性| 深夜a级毛片| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美潮喷喷水| 一级毛片久久久久久久久女| 波野结衣二区三区在线| 在线免费十八禁| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产一级毛片在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久久久久伊人网av| 日本一本二区三区精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 一个人看视频在线观看www免费| 嫩草影院入口| 成人毛片60女人毛片免费| 麻豆精品久久久久久蜜桃| av免费观看日本| 精品久久久久久久久久久久久| 久久精品影院6| 日韩欧美在线乱码| 免费搜索国产男女视频| 成人毛片60女人毛片免费| 免费搜索国产男女视频| 日本黄色视频三级网站网址| av福利片在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 天堂影院成人在线观看| 丰满的人妻完整版| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久人人爽人人片av| 国产一级毛片七仙女欲春2| 毛片女人毛片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲精品国产av成人精品| 国产高清不卡午夜福利| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 青春草国产在线视频 | 丰满的人妻完整版| 国产乱人偷精品视频| 亚洲综合色惰| 精品久久久久久久久久久久久| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久精品国产亚洲av天美| 欧美日韩在线观看h| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 中文字幕av成人在线电影| 1024手机看黄色片| 不卡一级毛片| 亚洲四区av| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产亚洲av嫩草精品影院| 免费观看在线日韩| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲电影在线观看av| 日本一二三区视频观看| 九九在线视频观看精品| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| .国产精品久久| 国模一区二区三区四区视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 精品久久久久久久末码| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 黄片wwwwww| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久久成人免费电影| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 麻豆成人午夜福利视频| 精品一区二区三区人妻视频| 国产人妻一区二区三区在| 久久精品人妻少妇| 美女 人体艺术 gogo| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产精品一区二区性色av| 欧美色视频一区免费| 不卡一级毛片| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 91久久精品电影网| 久久九九热精品免费| 日本黄大片高清| av女优亚洲男人天堂| 日韩一本色道免费dvd| 一级黄片播放器| 国产真实伦视频高清在线观看| 如何舔出高潮| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 精品人妻一区二区三区麻豆| 在线免费观看的www视频| 亚洲在线自拍视频| 国产黄a三级三级三级人| 成人欧美大片| 男女边吃奶边做爰视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 免费大片18禁| 黄色一级大片看看| 欧美在线一区亚洲| 国产精品国产高清国产av| 麻豆成人午夜福利视频| 午夜a级毛片| 午夜视频国产福利| 夜夜爽天天搞| 波多野结衣高清无吗| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产亚洲91精品色在线| 岛国毛片在线播放| 国产麻豆成人av免费视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 日韩在线高清观看一区二区三区| 男人的好看免费观看在线视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国产精品无大码| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| ponron亚洲| 国产乱人偷精品视频| 18禁在线播放成人免费| 亚洲一区二区三区色噜噜| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 波野结衣二区三区在线| 99热这里只有是精品在线观看| 国产成年人精品一区二区| 看免费成人av毛片| 久久精品夜色国产| 久久久久久久久大av| 国产免费男女视频| 能在线免费观看的黄片| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久亚洲国产成人精品v| 99久国产av精品国产电影| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲五月天丁香| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产成人a区在线观看| 嫩草影院新地址| 日韩av不卡免费在线播放| 老女人水多毛片| 岛国在线免费视频观看| 亚洲精品自拍成人| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 天美传媒精品一区二区| 悠悠久久av| 国产av一区在线观看免费| 观看美女的网站| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产黄色小视频在线观看| 中文字幕av成人在线电影| 国产综合懂色| 美女cb高潮喷水在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久久久久久中文| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲欧洲国产日韩| 伦精品一区二区三区| 国产美女午夜福利| 亚州av有码| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产av在哪里看|