食物不耐受特異性抗體檢測(cè)在嬰兒濕疹中的診療應(yīng)用

謝曉平 楊釗 羅敏 王莉

（四川省都江堰市醫(yī)療中心兒科，四川 都江堰 611830）

嬰兒濕疹為兒科門診的常見病，其發(fā)病機(jī)理除了母親的激素作用以外，過敏原的接觸也是重要的因素。吸入和接觸的東西過敏很難避免，而食物不耐受是可以通過飲食的干預(yù)而達(dá)到治療的目的。本文使用ELISA法可以檢測(cè)到食物特異性的IgG抗體水平，通過針對(duì)每個(gè)個(gè)體食物敏感性的檢測(cè)，并以此為食物剔除的依據(jù)，探討食物不耐受的篩選在嬰兒濕疹中的診療有著重要的意義。

1 臨床資料與方法

1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

2011年5月～2013年4月來我院門診就診臨床診斷為嬰兒濕疹；家長(zhǎng)同意意給患兒進(jìn)行食物不耐受的檢測(cè)；第一次就診的年齡1個(gè)月～1.0歲；配合隨訪完成的患兒。共納入228例。喂養(yǎng)方式：84例牛奶喂養(yǎng)，32例純母奶喂養(yǎng)，112例混合喂養(yǎng)。其中，男108例，女120例。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)血清中的食物不耐受特異性IgG

運(yùn)用ELISA法檢測(cè)14種食物特異性IgG抗體的濃度，試劑盒由中國北京海瑞祥天生物有限天公司提供。首先以1∶100稀釋患者血清，然后加入包被有14種特異性食物過敏原的微孔板中，微孔板密封。在室溫下孵育1h，清洗輕拍微孔板后，加入酶標(biāo)記的抗體結(jié)合液，繼續(xù)在室溫下孵育0.5h，清洗輕拍板后，A、B底物液等比例混合，再將混合的底物液加入微孔板中，10min后終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀測(cè)定反應(yīng)物的在450nm處的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算食物特異性IgG抗體的濃度值（U·mL－1；1U＝1.47ng）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)值如下：陰性質(zhì)控的數(shù)值應(yīng)低于0.2，陽性質(zhì)控的數(shù)值應(yīng)大于100IU·mL－1，標(biāo)準(zhǔn)品濃度分布是50、100、200、400IU·mL－1。大多數(shù)臨床測(cè)定過敏原的方法中，沒有標(biāo)準(zhǔn)化的過敏原去比較，為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，所有的測(cè)試使用自動(dòng)識(shí)別系統(tǒng)，并由經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的檢驗(yàn)師監(jiān)督。14種食物為牛肉、雞肉、鱈魚、玉米、螃蟹、蘑菇、牛奶、雞蛋、豬肉、大米、蝦、大豆、西紅柿和小麥。特異性IgG水平分為4級(jí)，0級(jí)（特異性IgG＜50U·L－1）為陰性，＋ （特異性IgG 為50～100U·L－1）為輕度不耐受，＋＋（特異性IgG＞100～200U·L－1）為中度不耐受，＋＋＋（特異性IgG＞200U·L－1）為重度不耐受。

1.2.2 飲食指導(dǎo)及隨訪

根據(jù)特異性IgG檢測(cè)結(jié)果，對(duì)抗體陽性程度為中度敏感和高度敏感的患兒如為人工喂養(yǎng)將采取患兒（如為混合喂養(yǎng)則母親和患兒；如母乳喂養(yǎng)則母親）嚴(yán)格忌食相應(yīng)食物治療，避免誤食3～6個(gè)月。如陽性食物三種以上，可將＋1級(jí)的食品輪替食用，3～6個(gè)月后復(fù)查，結(jié)果陰性的食物可以考慮納入正常飲食。納入以前陽性食物觀察5d以上，如沒有陽性癥狀，可以食入。隨訪方式為門診或電話隨訪。

1.2.3 臨床效果判斷

忌食中重度不耐受食物后每2周隨訪1次，記錄患兒癥狀改善情況并進(jìn)行評(píng)分。癥狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［1］：癥狀消失或明顯改善為0分；癥狀有改善為1分；癥狀無改善或加重為3分，視為無效。治療1～3個(gè)月癥狀評(píng)分≤1分視為有效，有效率＝有效例數(shù)／總病例數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 血清特異性IgG的變化

14種食物中對(duì)雞蛋的特異性比例最高209例（91.7%），其次為牛奶159例（69.7%），小麥88例（38.6%），大豆61例（26.8%），鱈魚38例（16.7%），大米31例（13.6%）蟹 25 例（11.0%），蝦3例（1.3%），蘑菇和西紅柿各2例，分別占0.9%，牛肉、豬肉、玉米分別為1例，分別占0.4%，見表1。

表1 嬰兒濕疹食物特異性IgG

2.2 調(diào)整飲食后嬰兒濕疹的效果

癥狀明顯改善182例（79.82%），癥狀改善40例（17.54%），無效6例（2.63%）。

3 討論

嬰兒濕疹是一種常見的由多種內(nèi)外因素引起的與過敏反應(yīng)有密切關(guān)系的皮膚病。臨床上表現(xiàn)為劇烈的搔癢、局部或全身紅斑，或原有的異位性皮炎加重，多種形態(tài)的皮膚損害，反復(fù)不愈，易于并發(fā)感染。病因除了遺傳因素，母體雌激素影響，嬰兒的皮膚角質(zhì)層比較薄弱，毛細(xì)血管網(wǎng)豐富而且內(nèi)含水和氯化物比較多和對(duì)各種刺激因素較敏感等因素以外，食物不耐受占據(jù)很重要的因素［2］。蛋類、牛奶、花生、麥、魚、蝦、堅(jiān)果是最常見可能引起過敏的食物。

食物不耐受是某種食物引起的Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)，人體免疫系統(tǒng)把進(jìn)入體內(nèi)的某種或多種食物大分子當(dāng)做有害物質(zhì)，并針對(duì)這些物質(zhì)產(chǎn)生過度保護(hù)性免疫反應(yīng)，產(chǎn)生食物特異性IgG抗體，IgG抗體與食物大分子形成免疫復(fù)合物，引起人體組織發(fā)生炎癥反應(yīng)，并表現(xiàn)為各系統(tǒng)的癥狀與疾病。成人中有50%存在不同程度的食物不耐受，嬰兒比成人高，主要因腸道粘膜屏障不健康或免疫系統(tǒng)薄弱導(dǎo)致。

傳統(tǒng)的治療上抗組胺藥及激素占據(jù)主要的作用，但因嬰兒濕疹纏綿難愈，口服藥有一定的副作用，外用激素易于出現(xiàn)皮膚萎縮、色素沉著、毛細(xì)血管擴(kuò)張等危險(xiǎn)，不耐受食物的剔除是很好的治療措施。避免食用陽性的不耐受食物，加強(qiáng)腸道功能的改善，可以食用同一類食物中沒有陽性反應(yīng)的其他食物作為替代品，專注于那些可以吃的食物，而不是那些不能吃的食物。2013年1月起，國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)正式實(shí)施，食品包裝上必須標(biāo)注“過敏原”，家長(zhǎng)可以認(rèn)真閱讀食品標(biāo)簽中標(biāo)示的組成成分吃各種各樣的食物，降低其他食物引起的新的不耐受的風(fēng)險(xiǎn)。

本研究發(fā)現(xiàn)牛奶、雞蛋占據(jù)前2位，提示食物不耐受可由多種過敏食物參與。但本組部分母乳喂養(yǎng)或尚未添加輔食的小嬰兒也出現(xiàn)對(duì)牛奶、雞蛋等多種食物過敏，其原因可能是在宮內(nèi)或出生后早期，變應(yīng)原反復(fù)刺激可延遲嬰兒期Th1的發(fā)育，而使Th2呈持續(xù)優(yōu)勢(shì)狀態(tài)，導(dǎo)致過敏反應(yīng)［3］。母體血清抗體也可意外地通過胎盤使胎兒被動(dòng)致敏，或大分子食物抗原意外地通過胎盤致敏胎兒。使其在出生后再次攝入同類變應(yīng)原時(shí)，出現(xiàn)過敏癥狀。哺乳期母親攝入食物的活性片段也可通過乳汁分泌使孩子攝入而產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

本資料結(jié)果表明嬰兒濕疹存在食物不耐受，食物不耐受陽性率高達(dá)100%。植物來源的食物以小麥（38.6%），大豆（14.0%）、致敏性較高，西紅柿（0.9%）、玉米（0.4%）的致敏性則較低。在動(dòng)物來源過敏原中以雞蛋（91.7%）致敏性為第1位，牛奶（69.7%）為第2位，鱈魚（16.7%）、蟹（11.0%）次之，而牛肉（0.4%）、豬肉（0.4%）則致敏性較低。食物中90%的變應(yīng)原是蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)具有酸性等電點(diǎn)糖蛋白的抗原特異性，通常能耐受食品加工、加熱和烹調(diào)，并能抵抗腸道的消化作用，植物性食物中敏感蛋白主要是醇溶谷蛋白家族的非特異性脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、α一淀粉酶或胰島素抑制劑等［4］，既往多通過血清特異性IgE檢測(cè)確定患兒過敏情況，且有研究認(rèn)為IgE介導(dǎo)的I型變態(tài)反應(yīng)也可能參與嬰兒濕疹的部分發(fā)病。而綜合遲發(fā)型和速發(fā)型超敏反應(yīng)測(cè)試能夠更可靠的確定過敏情況［5］。本研究檢測(cè)結(jié)果示嬰兒濕疹患兒存在較高比例的對(duì)某些食物的不耐受，但未能同時(shí)檢測(cè)患兒血清特異性IgE抗體水平，今后尚需將食物不耐受檢測(cè)與血清特異性IgE檢測(cè)相結(jié)合，進(jìn)而全面了解患兒的過敏狀態(tài)，尋找出較為可靠的致病因素，避免接觸變應(yīng)原，從而有效地防止疾病的反復(fù)發(fā)作及病情加重。

部分患兒家長(zhǎng)反映很多檢出的不耐受食物諸如雞蛋、牛奶，家長(zhǎng)都進(jìn)食過但當(dāng)時(shí)未發(fā)現(xiàn)患兒有過任何不適癥狀。家長(zhǎng)不理解因何會(huì)檢測(cè)出對(duì)這些常見食物過敏。食物過敏包括速發(fā)和遲發(fā)2種類型［6］。IgE介導(dǎo)的食物過敏反應(yīng)為一速發(fā)過程，癥狀突出，且與食物攝入顯著關(guān)聯(lián)，多次發(fā)作后患者也能自我診斷，而且其診斷方法也日臻完善。而IgG介導(dǎo)的食物過敏反應(yīng)屬Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)，多在進(jìn)食不耐受的食物2h或數(shù)天后發(fā)生，起病隱匿，患者家長(zhǎng)難以自我發(fā)現(xiàn)不耐受的食物。

在更換食物過程中，很多家長(zhǎng)提出給予羊奶喂養(yǎng)。各種建議、指南均不建議采用其他未經(jīng)改良的獸乳［7］，如羊乳。經(jīng)蒸、煮方式，巴斯德滅菌或超高溫處理均不能改變牛奶抗原性食物過敏的早期預(yù)防和于預(yù)是指母親妊娠晚期回避一些容易引起過敏的食物，嬰兒出生后予母乳喂養(yǎng)，延遲添加輔食，選擇低敏配方奶粉或氨基酸配方奶等，可以降低食物過敏的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

對(duì)大米不耐受的家長(zhǎng)一般難以接受，因四川主食為大米，難以忌食。我們發(fā)現(xiàn)家長(zhǎng)繼續(xù)喂食米粉其濕疹也有所好轉(zhuǎn)，高濃度的大米特異性IgG抗體與臨床癥狀不是很密切相關(guān)，而更可能代表一種保護(hù)機(jī)制，對(duì)以后生活中再出現(xiàn)相應(yīng)食物而產(chǎn)生免疫耐受［8］。有研究顯示，大米特異性IgG抗體與胃腸道癥狀、過敏性鼻炎、偏頭痛、蕁麻疹和濕疹呈負(fù)相關(guān)，這可能不同食物的異性IgG抗體承擔(dān)不同的角色有關(guān)［9］。

1 武慶斌，葉建新，丁云芳，等.食物IgG抗體檢測(cè)在慢性消化系統(tǒng)疾病中的臨床意義［J］.臨床兒科雜志，2006，24（10）：800－802.

2 邵潔.兒童食物過敏的診治進(jìn)展［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，2008，23（9）：643－645.

3 Cochrane S，Beyer K，Clausen M，et al.Factors influencing the inci2dence and prevalence of food allergy［J］.Allergy，2009，64（9）：1246－1255.

4 朱靜，畢玉娜，孫建新，等.過敏性紫癜患兒食物不耐受檢測(cè)情況分析［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，2008，23（9）：675－676.

5 王學(xué)艷，楊雪飛，張明，等.過敏性皮膚病與食物過敏原特異性免疫球蛋白G的臨床分析［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，26（1）：15－16.

6 李莉，徐銀海，吳萍，等.食物過敏原特異性IgG檢測(cè)的臨床意義探討［J］.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，25（12）：1347－1348.

7 黎海芪.《牛奶蛋白過敏診斷與相關(guān)理論的指導(dǎo)意見》解讀［J］.中華兒科雜志，2012，50（7）：516－517.

8 Stapel SO，Asero R，Ballmer－Weber BK，et al.Testing for IgG4against foods is not recommended as a diagnostic tool：EAACI task force report［J］.Allergy，2008，63（7）：793－796.

9 Host A，Husby S，Gjesing B，et al.Prospective estimation of IgG，IgG subclass and IgE antibodies to dietary proteins in infants with cow milk allergy.Levels of antibodies to whole milk protein，BLG and ovalbumin in relation to repeated milk challenge and clinical course of cow milk allergy［J］.Allergy，1992，47（3）：218－229.