摘 要:目的:觀察小槐花醇提物的藥理作用。方法:采用對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn);小鼠醋酸扭體法;小鼠碳末廓清法和對(duì)正常小鼠血清SOD活性和MDA含量的影響實(shí)驗(yàn),以及急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果:小槐花醇提物能促進(jìn)小鼠睡眠并延長(zhǎng)其睡眠時(shí)間,減少醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù),能提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù),能有效降低小鼠血清MDA含量,同時(shí)提高SOD活性。小鼠最大給藥量為128g生藥/kg。結(jié)論:提示小槐花醇提物具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠,鎮(zhèn)痛,免疫增強(qiáng)和抗氧化作用,且毒性較低。
關(guān)鍵詞:小槐花醇提物;藥理作用;小鼠
中圖分類號(hào):R962
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1007-2349(2013)05-0064-02
小槐花[Desmodium caudatum(Thunb.)DC.]為豆科(蝶形花亞科Fabaceae)山螞蝗屬植物,以根或全株入藥。原產(chǎn)于生于山谷、草地、林緣和村邊,也有少數(shù)栽培。分布于安徽、浙江、江西、福建、臺(tái)灣、湖北、湖南、廣西、廣東、四川、貴州、云南和西藏等省區(qū)[1~2]。小槐花微苦、辛,平,清熱利濕、消積散瘀、消腫止痛之功效,用于咳嗽吐血、水腫、小兒疳積、癰瘡、潰瘍、跌打損傷、痢疾、黃疸型肝炎、傷風(fēng)咳嗽、小兒驚風(fēng)、驅(qū)蛔蟲、毒蛇咬傷等,民間常用[2~3]。近年來對(duì)小槐花的研究多集中在小槐花的化學(xué)成分的化合物結(jié)構(gòu)的鑒定[4]等方面,對(duì)小槐花的藥理作用研究極少。因此,本文對(duì)小槐花的乙醇提取物進(jìn)行了藥理研究,探討其在鎮(zhèn)痛,鎮(zhèn)靜催眠,抗氧化方面的藥理作用,為將來開發(fā)應(yīng)用小槐花提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 藥物 小槐花乙醇提取物(11.84 g生藥/g膏),由廣西中醫(yī)藥研究院化學(xué)研究所提供。阿司匹林為武漢遠(yuǎn)大制藥集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):101004;安定為天津藥業(yè)焦作有限公司產(chǎn)品,批號(hào):12020222。人參蜂王漿為北京市東風(fēng)保健營(yíng)養(yǎng)品有限責(zé)任公司產(chǎn)品,批號(hào):2012061906。
1.2 試劑 丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒為南京建成生物研究所產(chǎn)品,批號(hào)分別為20120912和20120917。
1.3 動(dòng)物 NH種小鼠,18~22 g,雌雄兼用,由廣西中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調(diào)實(shí)驗(yàn)室內(nèi),室溫(22±2)℃,相對(duì)濕度(60±2)%,喂顆粒標(biāo)準(zhǔn)飼料,自由飲水和攝食。
1.4 儀器 722型光柵分光光度計(jì),上海分析儀器三廠產(chǎn)品。
2 方法
2.1 對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間的影響[5] 取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,陽性藥安定(5 mg/kg)組,小槐花醇提大、中、小劑量(6.40 g/kg、3.20 g/kg、2.13 g/kg)組,每組10只小鼠。各用藥組灌胃給藥1次,空白對(duì)照組給予等體積的蒸餾水,于給藥后1 h后,腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg,以翻正反射消失為入睡時(shí)間,記錄從翻正反射消失至恢復(fù)時(shí)間的睡眠持續(xù)時(shí)間,求出每組小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間平均值,采用t檢驗(yàn)做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果見表1。
結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,小槐花醇提物大、中、小劑量組均能明顯延長(zhǎng)小鼠睡眠時(shí)間。提示小槐花醇提物有協(xié)同戊巴比妥鈉的作用,具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用。
2.2 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)[5] 取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,陽性藥阿斯匹林(200 mg/kg)組,小槐花醇提大、中、小劑量(6.40 g/kg、3.20 g/kg、2.13 g/kg)組,每組10只小鼠。用藥各組均以灌胃給藥,空白對(duì)照組給予等量的蒸餾水,每天1次,連續(xù)7 d。于末次給藥后1 h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只,立即觀察并記錄20 min內(nèi)各小鼠的扭體次數(shù)。結(jié)果見表2。
結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,小槐花醇提物大、中、小劑量組均能明顯減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)。提示小槐花醇提物具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
2.3 采用小鼠碳粒廓清法[6] 取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,陽性藥人參蜂王漿(10 mL/kg)組,小槐花醇提大、中、小劑量(6.40g/kg、3.20g/kg、2.13g/kg),每組10只小鼠。每天灌胃給藥一次,空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水,連續(xù)7 d。于末次給藥60 min后,小鼠尾靜脈注射20% 印度墨汁0.1 mL/10 g體重,于注入后的2 min和7 min時(shí)分別從小鼠眼眶靜脈叢用微量吸管取血20 uL,溶于2 mL 0.1% Na2 CO3溶液中搖勻,于722分光光度計(jì)上650 nm處測(cè)定吸光度(0·D值),按公式:K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)計(jì)算吞噬指數(shù)k值,進(jìn)行組間比較t檢驗(yàn),評(píng)價(jià)藥物對(duì)單核巨噬細(xì)胞吞噬功能。
結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,小槐花醇提物高中低劑量組與陽性藥均能顯著提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)。提示該藥具有明顯的免疫增強(qiáng)作用。
2.4 對(duì)正常小鼠血清MDA含量和SOD活性的影響[7] 取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,陽性藥人參蜂王漿(10 mL/kg)組,小槐花醇提大、中、小劑量(6.40 g/kg、3.20 g/kg、2.13 g/kg)組,每組10只小鼠。用藥各組均以灌胃給藥,空白對(duì)照組給予等量的蒸餾水,每天1次,連續(xù)10 d,于末次給藥后1 h,從小鼠眼眶靜脈叢取血,分離血清,按臨床試劑盒方法測(cè)定血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。結(jié)果見表3。
結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,小槐花醇提物能有效降低
小鼠血清MDA含量,同時(shí)提高SOD活性,提示其具有顯著的抗氧化作用。
2.5 急性毒性實(shí)驗(yàn) 取小鼠預(yù)試后,另選取18~22g小鼠40只,分為對(duì)照組和給藥組,雌雄各半。小鼠禁食24 h不禁水。以小槐花醇提物的最大給藥濃度和最大給藥體積給小鼠灌胃給藥,24 h內(nèi)給藥3次,對(duì)照組給予蒸餾水,連續(xù)觀察14 d,記錄動(dòng)物體重、外觀、食欲、行為活動(dòng)、死亡等毒副反應(yīng)情況。結(jié)果小鼠體重正常增長(zhǎng),無明顯毒副作用。測(cè)出小槐花醇提物最大給藥量為128g生藥/kg體重。
3 討論與小結(jié)
山螞蝗屬植物小槐花是廣西壯族和西南民族等地區(qū)特有的一味重要的民族藥,具有清熱解毒,祛風(fēng)利濕之功效,用于復(fù)方中藥治療胃腸道疾病有較好的療效。目前的研究發(fā)現(xiàn)小槐花的原植物中,含有一定的黃酮類、多酚類和醇類成分,但小槐花藥理作用的活性成分及其作用機(jī)制研究較少。為了探討和開發(fā)小槐花的藥用價(jià)值,本文對(duì)其進(jìn)行了催眠、鎮(zhèn)痛、抗氧化和免疫增強(qiáng)等藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明,小槐花醇提物能有效延長(zhǎng)小鼠的睡眠時(shí)間;明顯減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù);降低小鼠血清MDA含量,提高SOD活力;顯著提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù),說明小槐花具有較好的鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛、抗氧化和免疫增強(qiáng)等作用。急性毒性實(shí)驗(yàn),小槐花醇提物最大給藥量為128g生藥/kg,表明其毒性很小。
綜上所述,研究提示小槐花醇提物具有延長(zhǎng)小鼠的睡眠時(shí)間;能明顯減少醋酸所致疼痛作用,對(duì)正常小鼠具有顯著的抗氧化作用,以及免疫增強(qiáng)作用,可能與其所含黃酮類、多酚類和醇類成分有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小槐花將來產(chǎn)品研發(fā)和臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編委會(huì),中國(guó)植物志[M].第41卷.北京:科學(xué)出版社,1995:19.
[2]全國(guó)中草藥匯編編寫組.全國(guó)中草藥匯編[M].2 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1995:97.
[3]江蘇省植物研究所,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所,中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所.編著《新華本草綱要》[M]. 第二冊(cè).上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1991.4~128.
[4]吳瑤,羅強(qiáng),孫翠玲等.小槐花化學(xué)成分研究[J].中國(guó)中藥雜志,2012,37(12)1788~1792.
[5]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:366~662.
[6]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:757.
[7]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1991:974.
(收稿日期:2013-03-11)