傷益凝膠中冰片β—環(huán)糊精包合物研究

摘 要：目的：確定冰片β-環(huán)糊精包合物最佳制備工藝。方法：采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)法，以冰片的包封率和收得率為考察指標(biāo)，優(yōu)選飽和水溶液法包合的最佳工藝，并包合工藝進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果：冰片的最佳包合工藝為采用飽和水溶液法在一般溫度下β-環(huán)糊精與冰片的配比為8：1，包合時(shí)間為45 min，冷藏時(shí)間12 h。結(jié)論：該包合工藝簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)，包合率與包合物收率高，適用于研制傷益凝膠。

關(guān)鍵詞：冰片；β-環(huán)糊精；包合物；包合工藝；正交實(shí)驗(yàn)

中圖分類號(hào)：R965

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-2349（2013）05-0060-02

傷益凝膠中的冰片具有抗炎、抗菌、止痛、促進(jìn)藥物透皮吸收，提高藥物生物利用度等作用。但由于冰片沸點(diǎn)低，室溫即升華，制備的成藥在貯存期內(nèi)極不穩(wěn)定，影響了藥物的療效。為了更好地發(fā)揮其治療作用以及提高傷益凝膠中冰片的穩(wěn)定性，采用正交試驗(yàn)，分別以冰片與β-環(huán)糊精的比例、包合時(shí)間、冷藏時(shí)間為因素，以冰片的包合率、包合物收得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選冰片包合最佳工藝技術(shù)參數(shù)，制備冰片β-環(huán)糊精包合物，為研制傷益凝膠提供技術(shù)支撐。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 BP211DAG 電子天平（德國(guó)Sartorius），SHZ 型循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠），85-2 型恒溫電磁攪拌器（廣州儀科），DL-720D 型數(shù)控超聲波儀（昆山市超聲儀器公司），離心機(jī)，6890-氣相色譜儀（美國(guó)安捷倫）。

1.2 試藥 冰片（中藥材市場(chǎng)購(gòu)買，經(jīng)云南省藥物研究所鑒定均符合《中國(guó)藥典》2010 年版規(guī)定）。β-環(huán)糊精（含量>99%，中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司）；水為蒸餾水，無水乙醇、乙酸乙酯（沸程30～60℃）等其它化學(xué)試劑均為分析。

2 方法與結(jié)果

2.1 不同包合方法的比較 通過在相同的包合時(shí)間和主客分子比的條件下，考察飽和水溶液法、超聲法、研磨法3種方法的包合效果，以包合率和包合物收得率為考察指標(biāo)。經(jīng)過考察優(yōu)選出最佳包合方法為飽和水溶液法。見表1。

2.2 冰片β-環(huán)糊精包合最佳工藝的優(yōu)選

2.2.1 包合物制備方法 稱取β-環(huán)糊精適量，置于150 mL具塞三角瓶中，加入適量蒸餾水，浴加熱使溶解，降至試驗(yàn)溫度，緩緩滴入冰片乙醇溶液（50%VV-1），攪拌包合至規(guī)定時(shí)間后，置冰箱中冷藏，抽濾，分別用乙酸乙酯（每次10 mL，各3 次）洗滌包合物沉淀，抽濾，干燥，即得。

2.2.2 冰片包合物中冰片含量的測(cè)定和包合物收得率的計(jì)算 采用GC法測(cè)定冰片包合物中冰片的含量。色譜條件 HP25色譜柱（0.25 mm×30 m，0125 μm）；進(jìn)樣口250 ℃；柱溫140 ℃；檢測(cè)器250 ℃。對(duì)照藥材溶液制備：精密稱取冰片100 mg，置25 mL容量瓶中，移取95%乙醇20 mL，超聲溶解后用95%乙醇定容，搖勻，得對(duì)照藥材溶液。以0.22 μm微孔濾膜過濾，在上述色譜條件下，取1 μL進(jìn)樣，。供試品溶液制備：按比例精密稱取冰片包合物（冰片含量100 mg計(jì)），置25 mL容量瓶中，加入95%乙醇20 mL，密封超聲15 min，放至室溫，用95%乙醇定容，搖勻。以0.22 μm微孔濾膜過濾，即得。

根據(jù)公式計(jì)算包合物收得率及冰片包合率，其計(jì)算公式分別為：

包合率=包合物中實(shí)際含冰片量/冰片的投入量×100%

包合物收得率=包合物重量/（β-環(huán)糊精投入量+冰片投入量）×100%

2.2.3 正交試驗(yàn)法考察包合物制備工藝 影響包合工藝的因素一般主要考察主客分子比、攪拌時(shí)間、冷藏時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)各采用L9（34）正交設(shè)計(jì)，以包合率及冰片包合物收得率為指標(biāo)，對(duì)冰片包合的最佳工藝進(jìn)行篩選。具體結(jié)果見表2～4。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，影響冰片包合的因素順序?yàn)椋篈>B>C，以A 的影響最大。經(jīng)方差分析可見，β-環(huán)糊精：冰片比例有顯著影響；最佳提取工藝為：A2B2C3。即β-環(huán)糊精與冰片的配比為8：1，包合時(shí)間為45 min，冷藏時(shí)間12 h。

2.2.4 包合工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 在篩選的最佳工藝條件下，作重復(fù)實(shí)驗(yàn)，證明此工藝有效可行。即在常溫下，用最佳包合工藝，即8 倍量的β-環(huán)糊精加適量水?dāng)嚢璋?5 min，置冰箱中冷藏12 h，抽濾，分別用乙酸乙酯（每次10 mL，各3 次）洗滌包合物沉淀，抽濾，于40℃干燥4 h得包合物，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)包合率（%）為87.88%，收得率（%）為80.79%。結(jié)果與正交試驗(yàn)結(jié)果基本一致，說明冰片的包合工藝條件穩(wěn)定，具有重現(xiàn)性。

2.3 包合物的驗(yàn)證

2.3.1 薄層鑒別法 稱取包合物100 mg，置具塞離心管中，加醋酸乙酯10 mL，超聲處理10 min，離心（2500 r/min）10 min，傾出上清液，為醋酸乙酯提取液，備用；殘?jiān)訜o水乙醇10 mL，超聲處理20 min，離心（2500 r /min）10 min，傾出上清液，為無水乙醇提取液，備用。另取冰片對(duì)照藥材10 mg，加醋酸乙酯10 mL溶解，作為對(duì)照品溶液，備用。

取上述三種備用液依次點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（8∶2）為展開劑，5%香草醛濃硫酸試液為顯色劑，105 ℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。在乙酸乙酯提取液色譜中沒有斑點(diǎn)出現(xiàn)，而在無水乙醇提取液色譜中，與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上即R值相同，日光下顯相同的2個(gè)藍(lán)紫色斑點(diǎn)（如圖1）?？梢姲衔锎_已形成，并且包合前后主成分沒有發(fā)生變化。[3]

2.3.2 氣相色譜法鑒別 供試品與對(duì)照品顯基本相同的色譜峰圖樣，主成分異龍腦、龍腦出峰時(shí)間接近（對(duì)照品為4.474 min、4.890 min，供試品為4.468 min、4.882 min），比例相近（對(duì)照品為1：1.5087，供試品為1：1.5095）。說明冰片已被包入β-環(huán)糊精的空穴中。

3 討論

3.1 方中冰片室溫下易升華，直接加入損失量較大，直接影響到藥物的質(zhì)量。而β-CD 具有增加藥物的穩(wěn)定性，減少揮發(fā)，掩蓋藥物的不良?xì)馕?，降低藥物刺激性等特點(diǎn)。因此，將冰片與β-CD 制成包合物，既克服了冰片不穩(wěn)定的問題，又提高了藥品的穩(wěn)定性與療效。

3.2 對(duì)以飽和水溶液法在優(yōu)化條件下制備的冰片β-CD包合物，此文采用TCL法、GC法進(jìn)行了鑒別。結(jié)果表明冰片在包合前后的主成分沒有發(fā)生變化，確證包合物已經(jīng)形成。并且由氣相色譜分析表明，冰片中的2種主要成分龍腦與異龍腦的比例在包合前后基本沒有發(fā)生變化。

3.3 按優(yōu)選包合最佳工藝技術(shù)參數(shù)制備冰片β-CD 包合物，其冰片包合率為87.88%、包合物收率為80.79%。冰片包合工藝技術(shù)參數(shù)合理，可操作性強(qiáng)，適用于研制傷益凝膠。

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（收稿日期：2013-03-14）