322例HIV抗體篩查陽性標本結果分析

曾麟?李愛蓮

[摘要] 目的 了解官渡區(qū)HIV抗體篩查試驗中出現假陽性的重點人群及原因。 方法 對2009～2012年本篩查實驗室常規(guī)檢測篩查陽性標本以及轄區(qū)內檢測點送檢的篩查陽性標本與確證試驗反饋結果相關資料進行分析。 結果 篩查陽性與確證陽性總體符合率較低為84.47%?；闄z、孕產婦、術前檢測3類人群HIV抗體篩查假陽性高，婚檢人群較高。 結論 現有技術無法避免HIV抗體篩查假陽性現象，應采取有效措施最大限度的保證檢測結果的準確性。

[關鍵詞] HIV抗體；篩查試驗；假陽性

[中圖分類號] R512.91 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）06-163-02

艾滋?。ˋIDS）是由人類免疫缺陷病毒感染（human immunodeficiency virus，HIV）引起的一種嚴重傳染病，至今尚無有效的預防疫苗和根治藥物。中國現有AIDS病毒感染者和患者約70萬人，相鄰西南邊境的云南、廣西尤其嚴重[1-2]。目前，HIV血清學診斷仍然是AIDS早期診斷的主要依據，然而在實際檢測工作中，HIV抗體的篩查試驗中仍存在假陽性的情況。為了解官渡區(qū)HIV抗體篩查試驗假陽性現象的特點和形成原因，對2009～2012年初篩試驗結果呈陽性的322例標本與其確證試驗結果分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2009年1月～2012年12月昆明市官渡區(qū)各艾滋病初篩實驗室和檢測點送檢的各類人群HIV抗體篩查陽性、可疑陽性標本，共計322例。

1.2 試劑與儀器

篩查試驗使用DNP-9162型電熱恒溫培養(yǎng)箱，HFsafe-1200型生物安全柜，Anth.s2010型酶標儀，BIO-RAD MODEL 1575型洗板機，Thermo 20～200 μL規(guī)格的微量移液器。快速診斷主要采用日本雅培公司的硒標試劑。ELISA法采用珠海麗珠，北京萬泰公司生產的第3代HIV1+2型抗體診斷試劑。

確證試驗使用瑞士TECAN集團研發(fā)的Profiblot 48全自動蛋白印跡儀和新加坡MP生物醫(yī)學亞太有限公司生產的HIV BLOT 2.2（HIV-1/2型）免疫印跡試劑。

1.3 方法

1.3.1 調查方法 統(tǒng)計處理初篩人員的個人資料，調查內容主要為性別、年齡、職業(yè)、文化程度、高危行為有無及次數、心理狀態(tài)、艾滋病相關知識了解程度等。

1.3.2 檢測方法 采集靜脈血，依照《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》的標準，采用硒（金）標免疫層析法（快速診斷法）和酶聯免疫吸附試驗（ELLSA法）進行HIV抗體初篩和復檢。所有標本同時采用一種試劑盒一種快速檢測方法進行復檢，測試均為陰性，判定HIV陰性；若均為陽性或一種陽性，送昆明市疾病預防控制中心艾滋病確證試驗室采用免疫印跡法（Western-blotting，WB）確認，以確證檢測結果作為最終結果。

2 結果

2009年1月～2012年12月各類人群HIV抗體初篩試驗呈陽性標本共322例，經確證試驗檢測，確證陽性272例，陰性19例，不確定6例，確證陽性符合率為84.47%。其中，術前檢測者、婚檢、孕產婦等人群的確證符合率低于總體平均值。確證陽性符合率最高的是美沙酮門診人群，確證率100%。確證符合率最低的是婚檢人群，40例初篩呈陽性標本中，25例確證為陽性結果，確證陽性符合率62.5%。見表1。

3 討論

隨著HIV抗體檢測技術的發(fā)展，目前常用檢測方法有酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、免疫層析法（金標，硒標）、免疫印跡試驗（WB）、化學發(fā)光或免疫熒光法、明膠顆粒凝集試驗（PA）、間接免疫光法（IFA）等[3]。各類檢測技術不斷改進，實驗試劑不斷優(yōu)化，篩查試驗的可靠性不斷增加。但HIV抗體檢測方法存在一定的非特異性，2009～2012年各類人群篩查試驗陽性標本322例，確證陰性22例，占篩查陽性6.57%，與以往文獻報道大約有4%～20%的HIV抗體篩查試驗陽性標本在確證試驗中呈陰性[4]結果一致。婚檢、孕產婦、術前檢測人群HIV抗體篩查陽性確證率低于總體平均值。陳春等[5]調查顯示，懷孕期間，產婦體內許多指標均處于非參考范圍，屬于正?，F象，受孕產婦體內血清中產生的非特異性物質干擾，孕產婦的HIV抗體假陽性的比例高于其他人群。血漿標本相對凝固不全及分離血清時全血凝固不全，也是婚檢、術前檢測人群假陽性率高的原因之一。

引起篩查試驗假陽性現象的因素很多，主要由以下幾個方面引起：（1）某些惡性疾病、輸血等情形下及受檢者產生自身免疫應答反應時，都可產生與HIV抗體發(fā)生交叉反應原。（2）標本質量未控制好，如發(fā)生溶血后直接影響ELISA法的檢測結果。溶血產生血紅素基團具有過氧化物的活性，在溫育過程中吸附于固相，與加入的HRP底物反應顯色。（3）實驗室硬件設施，溫濕度等是否在控，直接關系到試驗的有效性和準確性。洗板時，血液中的纖維蛋白容易堵塞洗板機的出吸液口，影響洗板效果。（4）檢驗人員專業(yè)素質不高，操作不規(guī)范，檢驗技能差等原因也會導致假陽性率升高。（5）ELISA法及免疫層析法的特異性不如免疫印跡法，特異性并不能達到100%，不可避免地會出現檢測試驗陽性而確證試驗陰性。（6）不同廠家生產的試劑盒包被抗原不同及生產工藝不同，可以影響最終檢測結果。

4 結論

在目前的技術條件下，HIV篩查假陽性現象卻又不可避免，因此實驗室必須采取相應措施最大限度的保證檢測結果的準確性。首先，要重視標本質量的控制，降低采血過程、標本容器、運送過程、標本保存等各個環(huán)節(jié)因素對實驗的影響，確保使用高質量的標本進行相關檢測。其次，做好室內質控、規(guī)范實驗室管理，提高檢驗人員是檢驗操作熟練度等也是提高檢測質量的重要措施。再次，針對不同的檢測人群，科學選擇合適、高效的診斷方法和試劑。如術前檢測人群進行HIV抗體篩查時，應選擇敏感性高的ELISA試劑；對于美沙酮門診人群可采用獲取結果快速的膠體硒法。最后，要結合實驗室現有條件，優(yōu)化檢測條件。如對血清、血漿標本檢測前4000 r/min離心5 min和適當增加水浴時間均可有效降低假陽性率[6]。

[參考文獻]

[1] 沈銀忠，張永信.艾滋病抗病毒治療的新認識[J].上海醫(yī)藥，2011，32（11）：527-530.

[2] 宋麗萍，耿文奎，藍文展.廣西壯族自治區(qū)HIV母嬰傳播狀況及預防策略[J].中國婦幼保健，2012，27（13）：1927.

[3] 王曉娟.HIV檢測試劑的發(fā)展及應用[J].中國生物制品學雜志，2008，21（4）：346-348.

[4] 梁彩云，高凱，李燕，等.HIV抗體篩查試驗陽性-確證試驗陰性標本的分析[J].中國病原生物學雜志，2010，5（4）：256-257.

[5] 陳春，王慶.成都22507例婦女HIV抗體檢測結果分析[J].四川醫(yī)學，2007，28（12）：1337-1338.

[6] 彭寬，李俊明，鞠北華，等.抗人類免疫缺陷病毒抗體酶聯免疫吸附法檢測條件的優(yōu)化[A].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33（5）：582-583.

（收稿日期：2013-02-22）