高同型半胱氨酸血癥與認(rèn)知損害的關(guān)系研究

楊增云 張?zhí)m娥?盧國華?何冰?范靜波

[摘要] 目的 探討高同型半胱氨酸血癥（hyper-homocysteinemia，Hhcy）與認(rèn)知損害的關(guān)系并探明引起認(rèn)知損害的機制。 方法 采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測30名MCI患者和45名正常老年人的血清同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的濃度。 結(jié)果 MCI組血清Hcy濃度（31.03±12.42）μmol/L、SAH濃度（6.63±1.72）μmol/L與正常組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。SAM濃度（80.10±12.13）μmol/L及MMSE評分（25.45±1.22）分均低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。同時MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分均呈負(fù)相關(guān)，與SAH濃度呈正相關(guān)（r=-0.61、-0.57、0.62，P<0.05）。 結(jié)論 血清Hcy、SAM和SAH濃度與輕度認(rèn)知功能障礙具有相關(guān)性，Hcy通過抑制甲基化進程影響認(rèn)知損害。

[關(guān)鍵詞] 高同型半胱氨酸血癥；輕度認(rèn)知功能障礙

[中圖分類號] R743 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）06-13-03

輕度認(rèn)知功能障礙（mild cognitive impairment，MCI）是介于正常衰老和癡呆之間的一種認(rèn)知缺損狀態(tài)。Petersen等追蹤研究發(fā)現(xiàn)，MCI患者每年約有10%～15%轉(zhuǎn)化為AD，是AD的高危人群[1]。由于認(rèn)知功能障礙癥狀給患者本人、家庭及照顧者均造成極大的影響，因此這方面的研究已經(jīng)越來越受到研究人員的關(guān)注[2]。多項臨床及基礎(chǔ)研究都已證實Hhcy可致動脈硬化，且為心腦血管疾病的獨立危險因素之一[3-4]。在MCI眾多危險因素中，Hhcy是一個可以有效干預(yù)與預(yù)防的因素，且MCI階段是預(yù)防癡呆的一個最佳時期。本研究通過觀察Hhcy與MCI的關(guān)系，了解其對認(rèn)知損害的影響并為臨床防治MCI提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于2012年1～2月，參照歐洲AD協(xié)會MCI工作組2006年

提出的新的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，從濰坊某3個大型社區(qū)選取30例MCI老人，其中男17例，女13例；年齡55～75歲，平均（65.01±8.52）歲；文化程度：小學(xué)及以下12例，初中9例，高中6例，大專及以上3例，平均受教育年限（6.50±2.29）年；MMSE評分（25.45±1.22）分。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者或親屬主訴認(rèn)知障礙；（2）患者或親屬報告其認(rèn)知功能在過去1年里與以往相比出現(xiàn)衰退；（3）臨床評定證明存在認(rèn)知障礙；（4）沒有嚴(yán)重的日常生活能力減退；（5）沒有癡呆。MMSE≥24，CDR=0.5，ADL≤26（21項版本）。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）嗜酒；（2）長期服用精神病藥物；（3）嚴(yán)重頭部外傷史；（4）抑郁癥，精神分裂癥，甲狀腺疾病，貧血，維生素B12及葉酸缺乏；（5）糖尿病伴并發(fā)癥；（6）心，肝，腎功能障礙者及近1個月內(nèi)服用影響血漿Hcy水平的藥物者嚴(yán)重的視力和聽力障礙者。選擇同期健康體格檢查者45例為對照組，其中男28例，女17例：年齡55～75歲，平均（67.80±7.23）歲；文化程度：小學(xué)及以下18例，初中14例，高中10例，大專及以上3例，平均受教育年限（6.26±3.19）年；MMSE評分（28.65±0.18）分。兩組人員的性別、年齡、受教育程度、身體狀況等一般資料，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。入選老人均知情并同意參與實驗。

1.2 方法

（1）生物學(xué)指標(biāo)測定：受檢對象于清晨空腹抽取周圍靜脈血4 mL，置于加有促凝劑的一次性采血管中靜置1～2 h待血液凝固后3000 r/min離心15 min，分離出血清標(biāo)本，置于-70℃冰箱保存待測并排除溶血標(biāo)本。采用ELISA法測定血清Hcy、SAM、SAH的濃度。測定儀為美國Bia-Rad Coda公司生產(chǎn)的全自動板式酶標(biāo)儀及其配套試劑盒，各項操作具體程序嚴(yán)格按照試劑盒的說明書進行。本試劑盒Hcy≥15 μmol/L為Hhcy。每批測定均包括質(zhì)控樣品。（2）MMSE評分檢查：被檢者同時由研究人員進行MMSE評分測試。MMSE評分包括定向力、記憶力、注意力和計算力、回憶能力、語言能力，共包括5個維度，總分0～30分，每個問題回答正確記1分，回答錯誤或拒絕回答均不得分，評分越高代表認(rèn)知能力越好[6]。本量表為國際通用的認(rèn)知功能篩查量表，均經(jīng)過信度和效度的檢驗。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析，兩組檢測指標(biāo)比較采用t檢驗，相關(guān)性采用Person相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Hcy、SAM、SAH濃度測定結(jié)果及MMSE評分結(jié)果

MCI組老人血清Hcy、SAH濃度高于正常組老人，血清葉酸、SAM濃度低于正常組老人，MMSE評分檢查的結(jié)果顯示，MCI組老人的得分低于正常組老人的得分，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表1。

2.2 相關(guān)性分析

將MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分進行相關(guān)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分均呈負(fù)相關(guān)性，與SAH濃度成正相關(guān)性，r=-0.61、-0.57、0.62，均P<0.05。

3 討論

同型半胱氨酸（Hcy），是一種含硫氨基酸，是蛋氨酸循環(huán)的重要環(huán)節(jié)和蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物。其合成的具體過程是：蛋氨酸首先形成S-腺苷甲硫氨酸（SAM），SAM去甲基生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），再進一步脫去腺苷生成Hcy。自從Aba lan等首次報道Hhcy可能是AD的危險因素后，Hcy與認(rèn)知功能損害及AD的關(guān)系逐漸成為廣泛關(guān)注的焦點[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，MCI組老人血清Hcy、SAH濃度較正常組升高，SAM濃度較正常組降低，結(jié)果與以往的研究結(jié)果一致[7-10]，表明Hhcy與MCI的發(fā)病有相關(guān)性，因此推測低或者正常的Hcy水平可能有效防止MCI向AD轉(zhuǎn)化，這為臨床治療MCI提供了一個新的方向。研究還發(fā)現(xiàn)，Hhcy患者MMSE的評分顯著低于正常組且Hcy濃度與MMSE評分成負(fù)相關(guān)，表明Hhcy可能與認(rèn)知功能的損害有關(guān)，Hcy濃度升高一方面抑制SAH的分解而使其水平增高，而SAH作為一種強效甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，能減慢腦組織中甲基化過程，使神經(jīng)元對損害和凋亡更加敏感。另一方面Hhcy引起甲基供體SAM缺乏，導(dǎo)致尿嘧啶錯配同時影響了嘌呤和胸腺嘧啶修復(fù)DNA損傷的能力，使得神經(jīng)細(xì)胞對Aβ所致細(xì)胞死亡的敏感性增強，造成Aβ對DNA不可逆的損傷引起認(rèn)知功能的損害。

綜上Hcy作為甲基循環(huán)的中間產(chǎn)物，主要通過細(xì)胞內(nèi)Hcy濃度升高使細(xì)胞內(nèi)的SAH增加，SAM的含量降低，SAM/SAH的比例降低，導(dǎo)致體內(nèi)許多甲基化酶如苯基乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移酶和兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶等的活性降低[11]，抑制體內(nèi)許多重要的甲基化作用[12-13]，這些重要底物的低甲基化均可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞功能受損引起認(rèn)知功能的損害。本研究從高Hcy抑制甲基化過程的機制出發(fā)闡明Hhcy引起MCI認(rèn)知損害的一個機制，為延緩MCI的認(rèn)知損害及預(yù)防癡呆的發(fā)生起到了重要作用。

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（收稿日期：2013-02-28）