原生動(dòng)物群落調(diào)查及水質(zhì)評(píng)價(jià)方法研究綜述

孫志強(qiáng)，施心路，2，3，劉桂杰，3，齊桂蘭，孟祥瑋

（1．杭州師范大學(xué)動(dòng)物適應(yīng)與進(jìn)化杭州市重中之重實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州310036；2．中國(guó)海洋大學(xué)原生動(dòng)物學(xué)研究室，山東青島266003；3．中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所，淡水生態(tài)與生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢430072；4．聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東聊城252059）

目前我國(guó)淡水資源嚴(yán)重短缺，人均占有量?jī)H為世界平均水平的四分之一，并且水質(zhì)污染現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，各主要水系及河流均受到不同程度的污染，所以對(duì)水環(huán)境的保護(hù)及監(jiān)測(cè)工作顯得尤為重要［1］．

近年來(lái)興起的生物監(jiān)測(cè)技術(shù)在自然及人工水體監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用已取得了可喜的成果，其評(píng)價(jià)及監(jiān)測(cè)結(jié)果可以直接反映水體的健康狀況，其中原生動(dòng)物在水質(zhì)監(jiān)測(cè)中的優(yōu)勢(shì)尤為突出［2－5］．前人關(guān)于原生動(dòng)物在水質(zhì)監(jiān)測(cè)中的作用及功能的綜述較為多見(jiàn)［4，6］，但針對(duì)具體的實(shí)驗(yàn)方法、操作中要注意的問(wèn)題以及分析方法的介紹則相對(duì)較少，至今，用于原生動(dòng)物評(píng)價(jià)水質(zhì)的確切方法仍然在不斷改進(jìn)．本文旨在總結(jié)前人的做法，綜合各學(xué)者的改進(jìn)，為后來(lái)者開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究提供參考．

1 原生動(dòng)物簡(jiǎn)介

原生動(dòng)物是一類(lèi)最原始、最低等的單細(xì)胞動(dòng)物，每個(gè)細(xì)胞就是一個(gè)完整的生命體，其細(xì)胞內(nèi)特化的各種細(xì)胞器通常就可完成運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)、呼吸、排泄和生殖等一系列的生理生化活動(dòng)［6］．它們種類(lèi)繁多，分布甚廣且數(shù)量大，因而在生態(tài)系統(tǒng)特別是水域生態(tài)系統(tǒng)中擔(dān)任著極為重要的角色［4］．

水質(zhì)監(jiān)測(cè)中經(jīng)常利用的原生動(dòng)物總體上可分為3大類(lèi)［4，6－7］：（1）鞭毛蟲(chóng)（Mastigophora），主要包括植鞭毛蟲(chóng)（Phytomastigophorea）和動(dòng)鞭毛蟲(chóng)（Zoomastigophorea）．植鞭毛蟲(chóng)也被植物學(xué)家們稱為鞭毛藻（Flagellata）．（2）纖毛蟲(chóng)（Ciliata），它們是原生動(dòng)物中特化程度最高、最為復(fù)雜、個(gè)體最大且數(shù)量最多的一大類(lèi)群，具有典型的特征，目前有很多以纖毛蟲(chóng)為對(duì)象來(lái)探討生物與水質(zhì)關(guān)系的研究［3，8－9］．（3）肉足蟲(chóng)（Sarcodina），環(huán)境中常見(jiàn)的有砂殼蟲(chóng)屬（Difflugia）、表殼蟲(chóng)屬（Arcella）的種類(lèi)．

大量研究表明，水域環(huán)境條件的突然改變將對(duì)該環(huán)境中生活的原生動(dòng)物群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生直接的影響，從而影響水體的質(zhì)量．當(dāng)水體中出現(xiàn)污染沖擊時(shí)，無(wú)論是重金屬還是有機(jī)污染，原生動(dòng)物群落的穩(wěn)定性就會(huì)遭到破壞，直接表現(xiàn)就是種類(lèi)減少、多樣性指數(shù)降低［10］．因此，可以利用原生動(dòng)物群落特征來(lái)監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)水質(zhì)．

2 實(shí)驗(yàn)方法概述

2．1 樣點(diǎn)設(shè)置

根據(jù)不同的調(diào)查目的有相應(yīng)的設(shè)置原則［11］：（1）時(shí)間分布，如研究一年四季或12個(gè)月的原生動(dòng)物分布．原生動(dòng)物在不同的季節(jié)會(huì)有不同的分布特征，表現(xiàn)在種類(lèi)、豐度等各方面，一般來(lái)說(shuō)纖毛蟲(chóng)在春秋季較多，冬夏季較少．設(shè)置樣點(diǎn)時(shí)應(yīng)盡可能考慮到該水域的平均狀況，分散設(shè)置．許恒龍、姜勇等［12－13］在膠州灣，陳立婧等［14］在上海明珠湖都做過(guò)相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)原生動(dòng)物群落具有明顯的季節(jié)性．（2）水平分布，即不同空間位置的原生動(dòng)物分布特征．根據(jù)空間差異，如在不同的污染帶、河流交叉口、環(huán)境因子差異明顯的位點(diǎn)等，這方面研究比較多，常用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)等．如鄭金秀等［15］在長(zhǎng)江上游分為3段采樣，討論了河流地理特征及三峽蓄水等因素對(duì)原生動(dòng)物群落的影響；許木啟等［16］在漢沽穩(wěn)定塘從入水口到出水口依次設(shè)5個(gè)樣點(diǎn)，根據(jù)原生動(dòng)物群落變化探討穩(wěn)定塘的凈化效能，發(fā)現(xiàn)隨著水質(zhì)的凈化原生動(dòng)物群落也在相應(yīng)變化，與水質(zhì)變化的情況相吻合；韓蕾等［17］、陳紅等［18］的研究都表明在不同的水域有著不同的原生動(dòng)物群落特征．（3）垂直分布，多見(jiàn)于較深的河流或湖泊，在不同水層分別采樣，觀察不同水深的原生動(dòng)物分布特征，還常結(jié)合季節(jié)遷移或晝夜遷移等．如對(duì)Ka?tela Bay（central Adriatic Sea）［19］的纖毛蟲(chóng)季節(jié)分布與垂直分布的研究．

2．2 采樣方法

浮游生物的采樣方法主要有3種，分別是浮游生物網(wǎng)法、采水器法和PFU（Polyurethane Foam Unit）法，固著類(lèi)還有載玻片法等［3，20］．浮游生物網(wǎng)常見(jiàn)的有25號(hào)、20號(hào)和13號(hào)3種規(guī)格，網(wǎng)孔大小分別為64 μm（200孔／in，1in＝2．54cm）、76μm（193孔／in）和112μm（130孔／in）．定性樣品通常用25號(hào)篩絹制成的浮游生物網(wǎng)（網(wǎng)目64μm）拖撈獲取，用50mL5%福爾馬林固定［14－15］．定量樣品用1L或2．5L的采水器分別將采自各層（通常上中下3層）的水樣混合均勻（如研究垂直分布則另當(dāng)別論；水深超過(guò)20m則只取變溫層［11］），取1L裝入容器中，現(xiàn)場(chǎng)以1%的比例加入魯哥氏液（Lugol’s Iodine solution）固定［2，14，21］，或以2%的比例加入［3，12］，固定效果也許更好．

PFU法是由Cairns等于1969年創(chuàng)建，沈韞芬在20世紀(jì)80年代初引入中國(guó)并加以完善，成為微型生物監(jiān)測(cè)的先進(jìn)方法［4，10，22］．由于其操作簡(jiǎn)單、可靠性強(qiáng)、重復(fù)性好、對(duì)比度大等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)得到了廣泛的應(yīng)用，并發(fā)展成為我國(guó)水質(zhì)監(jiān)測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［10，23］．該方法主要根據(jù)島嶼生物地理學(xué)理論，利用聚氨酯泡沫塑料塊（Polyurethane Foam Unit）方法測(cè)定微型生物的群集速度，最后得出3個(gè)功能參數(shù)：Seq為平衡時(shí)的種數(shù)，G為群集曲線的斜率（也可稱群集速度常數(shù)），T90%為達(dá)到90%Seq所需要的時(shí)間．利用微型生物在PFU上群集過(guò)程中3個(gè)參數(shù)的變化，可以評(píng)價(jià)水質(zhì)和監(jiān)測(cè)水污染［4，10，24－25］．

近年來(lái)有人提出了改良的方法，在外邊套上一個(gè)露底的塑料瓶，這樣就可以抗擊風(fēng)浪的沖擊，成為改良的PFU，稱BPFU［26］，也取得了不錯(cuò)的效果．

2．3 樣品處理及鑒定計(jì)數(shù)

將固定好的樣品帶回實(shí)驗(yàn)室靜置48h，使生物充分沉淀，然后用虹吸管將上清液慢慢吸走（一般吸走980mL上清液需要20～30min），并且最好用25號(hào)篩絹扎在管口，以防樣品中生物流失，最終濃縮至30～50mL為宜，加1mL 4%的福爾馬林溶液，以便長(zhǎng)期保存［14，20］．也可以直接用20μm篩絹過(guò)濾［13］，同樣可以達(dá)到濃縮的目的．鏡檢時(shí)，先輕輕搖勻樣品，用移液槍吸取0．1mL于0．1mL計(jì)數(shù)框中，靜置1～2 min后在顯微鏡下全片計(jì)數(shù)，取兩片結(jié)果的平均值，以如下公式計(jì)算個(gè)體密度：N＝（Vs×n）／（V×Va）．式中，N：個(gè)體密度（ind．／L）；V：采樣體積（L）；Vs：沉淀體積（mL）；Va：計(jì)數(shù)體積（mL）；n：計(jì)數(shù)所得個(gè)體數(shù)．

生物量一般采用體積估算法，按照密度為1g／cm3來(lái)計(jì)算［11，14］．物種鑒定主要依據(jù)形態(tài)學(xué)特征，比對(duì)相關(guān)圖譜、照片或視頻，活體觀察，有時(shí)還要染色制片或利用分子方法，綜合鑒定得出結(jié)論．圖譜常用的有《原生動(dòng)物學(xué)》［27］、《微型生物監(jiān)測(cè)新技術(shù)》［7］、《中國(guó)黃渤海的自由生纖毛蟲(chóng)》［28］、《淡水浮游生物研究方法》［11］、Free－livingFreshwaterProtozoa，AColourGuide［29］和《廢水生物處理微型動(dòng)物圖志》［30］等．

3 結(jié)果分析

3．1 物種組成及豐度變化

在物種鑒定及計(jì)數(shù)的基礎(chǔ)上對(duì)其進(jìn)行分類(lèi)研究，包括種類(lèi)數(shù)和豐度．研究原生動(dòng)物者，可將其分為鞭毛蟲(chóng)、纖毛蟲(chóng)和肉足蟲(chóng)，分析它們各自所占的比例，探討原生動(dòng)物組成及對(duì)水質(zhì)的反映［13－14］；以纖毛蟲(chóng)為研究對(duì)象則又下分為動(dòng)基片綱（Kinetofragminophorea）、寡膜綱（Oligohymenophorea）和多膜綱（Polyhymenophorea），或直接分為下毛目（Hypotrichida）、前口目（Prostomatida）、側(cè)口目（Pleurostomatida）、膜口目（Hymenostomatida）、緣毛目（Peritrichida）等［3，8－9］；也有研究者只把肉足蟲(chóng)和纖毛蟲(chóng)看做是原生動(dòng)物，如胡菊香等［31］對(duì)巢湖原生動(dòng)物的研究，呼光富等［21］對(duì)武漢南湖原生動(dòng)物的初步研究．植鞭毛蟲(chóng)的比例也常被作為水體富營(yíng)養(yǎng)化的指標(biāo)而利用［14］．

3．2 優(yōu)勢(shì)種

根據(jù)公式Y(jié)＝（Ni／N）fi計(jì)算物種的優(yōu)勢(shì)度，式中Ni為第i種的個(gè)體數(shù)，N為樣品中所有種類(lèi)的總個(gè)體數(shù)，fi為第i種的出現(xiàn)頻率，Y＞0．02為優(yōu)勢(shì)種［14，20］．在正常情況下，群落的結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)受到環(huán)境脅迫如水體受到污染時(shí)，群落中的敏感種類(lèi)減少，而耐污種類(lèi)的個(gè)體數(shù)則大大增加，從而導(dǎo)致群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化；溫度、光照、流速等因素也會(huì)導(dǎo)致群落變化．不同的優(yōu)勢(shì)種反映的環(huán)境狀況也不同，從而達(dá)到監(jiān)測(cè)的目的［3，14］．如鄭金秀［15］對(duì)長(zhǎng)江上游原生動(dòng)物的群落研究發(fā)現(xiàn)，隨著水庫(kù)蓄水，原生動(dòng)物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生著變化，其優(yōu)勢(shì)種越來(lái)越不明顯，庫(kù)區(qū)的原生動(dòng)物向多類(lèi)型發(fā)展，說(shuō)明水環(huán)境的穩(wěn)定有利于原生動(dòng)物多樣性的發(fā)展．宋碧玉［32］在長(zhǎng)江洞庭湖調(diào)查原生動(dòng)物種群時(shí)發(fā)現(xiàn)，優(yōu)勢(shì)種類(lèi)基本上屬于a－β中污性種類(lèi)，而理化分析結(jié)果也表明該河段水質(zhì)為Ⅱ級(jí)．可見(jiàn)優(yōu)勢(shì)種可以在一定程度上反映水體所處的狀態(tài)．

3．3 污染指示種

指示種又叫生物指示物（biological indicator），是根據(jù)Kolkwitz和Marrson在1909年首次提出污染系統(tǒng)和河流不同污染帶（寡污帶、α－中污帶、β－中污帶、多污帶）的指示生物種類(lèi)發(fā)展而來(lái)的［7］．王家楫等［30］的《廢水生物處理微型動(dòng)物圖志》也對(duì)污染指示種進(jìn)行了描述，沈韞芬等在《微型生物監(jiān)測(cè)新技術(shù)》［7］一書(shū)中綜合國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果列出了4個(gè)污染帶的198種原生動(dòng)物污染指示種，可作為劃分的參考．

多污性水體中的原生動(dòng)物指示種有施氏腎形蟲(chóng)（Colpodasteinii）、閃瞬目蟲(chóng)（Glaucomascintillans）、梨形四膜蟲(chóng)（Tetrahymenapyriformis）、小口鐘蟲(chóng)（Vorticellamicrostoma）等；α－中污性水體中有草履唇滴蟲(chóng)（Chilomonasparamecium）、卵形隱滴蟲(chóng)（Cryptomonasovara）、螅狀獨(dú)縮蟲(chóng)（Carchesiumpolypinum）、僧帽斜管蟲(chóng)（Chilodonellacucullulus）、僧帽腎形蟲(chóng)（Colpodacucullus）、尾草履蟲(chóng)（Paramecium cauatum）、普通表殼蟲(chóng)（Arcellavulgaris）等；β－中污性水體中如紅球蟲(chóng)（Haematococcuspluvialis）、衣滴蟲(chóng)（Chlamydomonasmonadina）、三刺榴彈蟲(chóng)（Colepshirtus）、雙環(huán)櫛毛蟲(chóng)（Didiniumnasutum）、天鵝長(zhǎng)吻蟲(chóng)（Lacrymariaolor）、大變形蟲(chóng)（Amoebaproteus）等；寡污性水體中如鵝長(zhǎng)頸蟲(chóng)（Dileptusanser）、鐘形鐘蟲(chóng)（Vorticellacampanula）、截形平鞘蟲(chóng)（Platycolatruncata）等［30］．

許木啟等［16］在漢沽穩(wěn)定塘2號(hào)采樣站所發(fā)現(xiàn)的波豆蟲(chóng)（Bodo）、眼蟲(chóng)（Euglena）和滴蟲(chóng)（Monas）均為耐污很強(qiáng)的鞭毛蟲(chóng)類(lèi)；3號(hào)采樣站仍以耐污的鞭毛蟲(chóng)和肉足蟲(chóng)為主；4號(hào)和5號(hào)兩個(gè)采樣站種類(lèi)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，纖毛蟲(chóng)種類(lèi)占據(jù)優(yōu)勢(shì)．理化指標(biāo)顯示從1號(hào)到5號(hào)水質(zhì)逐漸變好，1號(hào)最差，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)原生動(dòng)物．在對(duì)上海明珠湖［14］、長(zhǎng)江洞庭湖口［32］的研究中也都用到了原生動(dòng)物污染指示種，取得了滿意的成果．使用時(shí)應(yīng)注意，不能簡(jiǎn)單地以有或沒(méi)有來(lái)判定水質(zhì)的情況，應(yīng)結(jié)合不同污染帶指示種類(lèi)數(shù)的多少及優(yōu)勢(shì)種的指示性等來(lái)綜合評(píng)價(jià)［7］．

3．4 原生動(dòng)物的功能類(lèi)群

Pratt等［33］曾對(duì)美國(guó)6個(gè)濕地和一條河流中原生動(dòng)物群落進(jìn)行研究，并按照食性將原生動(dòng)物分為6個(gè)功能類(lèi)群，分別是：光合自養(yǎng)者P、食菌屑者B、食藻者A、腐生者S、雜食者N、捕食者R．干凈的水體自養(yǎng)程度高，隨著水質(zhì)的污染，異養(yǎng)程度就會(huì)增加．若群落中P組和A組占比例大，說(shuō)明水質(zhì)較好；若S組和B組比例較大，說(shuō)明水質(zhì)較差［4，14］．對(duì)原生動(dòng)物功能劃分多參照《微型生物監(jiān)測(cè)新技術(shù)》［7］一書(shū)．宋碧玉［32］在對(duì)長(zhǎng)江洞庭湖口研究時(shí)發(fā)現(xiàn)食菌—碎屑者、食藻—細(xì)菌者多而光合自養(yǎng)者少，表明水體中懸浮顆粒和細(xì)菌較多，已有一定程度的有機(jī)污染，捕食者類(lèi)群少預(yù)示著該處的有機(jī)污染尚不很?chē)?yán)重．此方法還在眾多研究中得到了應(yīng)用，如長(zhǎng)江上游［15］和漢江漢中段［9］等，都取得了不錯(cuò)的效果．

3．5 生物指數(shù)

多樣性指數(shù)可以反映群落的結(jié)構(gòu)特征，種的多樣性包括兩方面的內(nèi)容：種類(lèi)數(shù)的增減和每種類(lèi)個(gè)體數(shù)的數(shù)量分布［20］．理想的狀態(tài)是種類(lèi)數(shù)多，每一種的個(gè)體數(shù)又相對(duì)較少，達(dá)到一種均衡的分布．人們應(yīng)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)的方法，求得多樣性指數(shù)來(lái)綜合表示生物群落的種類(lèi)數(shù)和個(gè)體數(shù)，這在生態(tài)學(xué)研究中經(jīng)常會(huì)被用到［14，16－18，20，34］．常用的指數(shù)如：（1）Margalef多樣性指數(shù)（d）或稱豐富度（richness）．d＝（S－1）／lnN，d值越大表示越清潔．0～1為重度污染，1～2為嚴(yán)重污染，2～4為中度污染，4～6為輕度污染，大于6為清潔水體［34］．（2）Shannon－Weiner多樣性指數(shù)（H）或稱多樣性（species diversity）．，值為0～1時(shí)說(shuō)明水體受到嚴(yán)重污染，1～2時(shí)為中等污染，2～3時(shí)為輕度污染，大于3為清潔水體［20］．（3）Simpon多樣性指數(shù)（D）．D＝，也有用公式或其他表示．（4）均勻度evenness（J）．J＝H／lnS．（5）其他指數(shù)，如種類(lèi)污染值（Species Pollution Value，SPV）、群落污染值（Community Polution Value，CPV）［35］以及Pantle計(jì)算的污生指數(shù)（Saprobic Index，SI）［9］等也可以很好地監(jiān)測(cè)水質(zhì)．式中S為物種數(shù)；ni為第i種的個(gè)體數(shù)；N為總個(gè)體數(shù)．如在漢沽穩(wěn)定塘［16］中，隨著水質(zhì)的逐步改善，原生動(dòng)物Margalef多樣性指數(shù)d也穩(wěn)步上升，從1號(hào)樣到5號(hào)樣分別為0、0．26、1．85、4．18、5．4．

近幾年有些學(xué)者研究浮游生物水質(zhì)評(píng)價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)，多樣性指數(shù)有時(shí)不能較好地反映水體的營(yíng)養(yǎng)水平、水質(zhì)的現(xiàn)狀及變化趨勢(shì)，特別是針對(duì)富營(yíng)養(yǎng)化的水體，這種情況更明顯［36－37］，有時(shí)也會(huì)因?yàn)閜H、水溫及流速等因素而產(chǎn)生影響［37］．

3．6 理化指標(biāo)分析

研究水體中原生動(dòng)物群落特征通常要和水質(zhì)的理化指標(biāo)相結(jié)合，來(lái)探討生物與環(huán)境間的復(fù)雜關(guān)系［10，16］．水質(zhì)測(cè)定主要依據(jù)國(guó)家環(huán)保總局主編的《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》［8，9，34，38］或StandardMethods fortheExaminationofWaterandWastewater［3，12，39］等．主要指標(biāo)包括：溫度（T）、pH、溶解氧（DO）、生化需氧量（BOD）、化學(xué)需氧量（COD）、總氮（TN）、總磷（TP）、無(wú)機(jī)氮（DIN）、無(wú)機(jī)磷（DIP）、氨態(tài)氮（NH3－N）、硝態(tài)氮（NO3－N）、亞硝態(tài)氮（NO2－N）、可溶性活性磷酸鹽（SRP）、葉綠素a（Chl a）、重金屬、透明度（SD）和固體懸浮物（SS）等，可以根據(jù)研究需要，選取其中幾種測(cè)定即可［2，5，8－10，12－14，38，40］．河流和湖泊通常會(huì)受到有機(jī)污染和重金屬污染，有機(jī)污染主要指BOD、COD，特別是氮和磷濃度的增加，引發(fā)藻類(lèi)的大量增長(zhǎng)，從而影響原生動(dòng)物群落的結(jié)構(gòu)［7，13，16］．同時(shí)，與水體中原生動(dòng)物的分布、現(xiàn)存量與溫度、pH、溶解氧等生態(tài)限制因子有關(guān)［7，14］．

3．7 統(tǒng)計(jì)分析

除了利用生物學(xué)的方法對(duì)原生動(dòng)物特征進(jìn)行描述、歸類(lèi)及指數(shù)計(jì)算外，有時(shí)還需要利用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行深度分析，以求更科學(xué)清晰地說(shuō)明原生動(dòng)物群落與水質(zhì)的關(guān)系．常用的方法如：用t－檢驗(yàn)或方差分析揭示不同樣點(diǎn)或時(shí)間的數(shù)據(jù)差異，包括生物和理化數(shù)據(jù)；用聚類(lèi)分析（Cluster Analysis）按照一定原則將數(shù)據(jù)歸類(lèi)，揭示數(shù)據(jù)間的聯(lián)系及區(qū)別；用多維尺度分析（Multi－dimension Analysis，MDS）表示研究對(duì)象間的距離遠(yuǎn)近；用主成分分析（Principal Component Analysis，CAP）對(duì)變量進(jìn)行歸類(lèi)、探討；用相關(guān)性分析（Correlation Analysis）來(lái)表示生物數(shù)據(jù)與環(huán)境數(shù)據(jù)間的相關(guān)關(guān)系等．所用的統(tǒng)計(jì)軟件有Excel、SPSS、SAS、Origin、statistics、primer等［2，3，12－14，25，41－42］．如許恒龍等在青島膠州灣所做的在屬的水平上對(duì)纖毛蟲(chóng)群落分布與水質(zhì)關(guān)系的研究中，用聚類(lèi)分析依據(jù)各屬在各樣點(diǎn)出現(xiàn)頻率把屬歸為6類(lèi)，說(shuō)明了屬的分布特點(diǎn)；分別用聚類(lèi)分析和多為尺度分析依據(jù)生物數(shù)據(jù)對(duì)各樣點(diǎn)進(jìn)行歸類(lèi)，結(jié)果一致，同樣依據(jù)理化數(shù)據(jù)分類(lèi)，結(jié)果與生物數(shù)據(jù)的分類(lèi)也保持一致，充分說(shuō)明了膠州灣纖毛蟲(chóng)分布的樣點(diǎn)差異，且與水質(zhì)差異保持高度一致性；還用到了主成分分析和多元相關(guān)性分析，表明生物數(shù)據(jù)和理化指標(biāo)間存在著密切的聯(lián)系［43］．

4 問(wèn)題及展望

經(jīng)過(guò)多年發(fā)展，利用原生動(dòng)物進(jìn)行水質(zhì)監(jiān)測(cè)的技術(shù)日趨成熟，在國(guó)內(nèi)外得到了廣泛應(yīng)用，已逐步發(fā)展成為一種標(biāo)準(zhǔn)可行的監(jiān)測(cè)方法．就研究過(guò)程筆者提出幾點(diǎn)問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)方法的規(guī)范性．在實(shí)驗(yàn)操作中，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)結(jié)果因人而異的情況，可能跟研究者操作規(guī)范性和經(jīng)驗(yàn)有關(guān)，特別是在物種鑒定中，差異有時(shí)會(huì)很大．所以研究者應(yīng)加強(qiáng)學(xué)習(xí)，熟練掌握實(shí)驗(yàn)方法，做到規(guī)范操作．并在物種鑒定時(shí)采用可靠的資料為參照依據(jù)，有條件者可提供優(yōu)勢(shì)種、特有種的照片資料．

（2）研究方法的創(chuàng)新．研究方法如指示種、功能類(lèi)群、群落結(jié)構(gòu)、各種生物指數(shù)及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，都在不斷發(fā)展，因此方法得當(dāng)與創(chuàng)新至關(guān)重要．

（3）加強(qiáng)各種生物間的聯(lián)系．研究原生動(dòng)物要注重和藻類(lèi)、輪蟲(chóng)、枝角類(lèi)和橈足類(lèi)等的聯(lián)系，分析它們之間的關(guān)系，以便對(duì)水質(zhì)現(xiàn)狀做出更加系統(tǒng)而準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)．

（4）監(jiān)測(cè)的目的在于保護(hù)．學(xué)者的努力不只是為了科學(xué)研究，更要提醒人們注重環(huán)境保護(hù)，提高人們保護(hù)水資源的意識(shí)，做到水資源的可持續(xù)利用．

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