新城疫抗體測(cè)定技能大賽總結(jié)

向雙云 周珍輝 （北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系 北京 房山 102442）

為貫徹落實(shí)《國(guó)家中長(zhǎng)期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要(2010-2020年)》精神，進(jìn)一步強(qiáng)化職業(yè)院校涉農(nóng)專業(yè)學(xué)生職業(yè)技能訓(xùn)練和職業(yè)技術(shù)綜合運(yùn)用能力，大力培養(yǎng)適應(yīng)農(nóng)業(yè)、農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展需要的應(yīng)用型和技能型人才，農(nóng)業(yè)部根據(jù)教育部全國(guó)職業(yè)院校技能大賽總體要求，從2011年開始舉辦新城疫抗體測(cè)定競(jìng)賽項(xiàng)目，本學(xué)院連續(xù)2年參加該比賽項(xiàng)目，獲得了可喜的成績(jī)。下面將這2年來參加比賽的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié)，以供同行們參考。

1 提前動(dòng)員，提前準(zhǔn)備

經(jīng)過兩輪的新城疫抗體測(cè)定技能技能大賽，發(fā)現(xiàn)理論考試內(nèi)容涉及面廣，考試題比較細(xì)。為了有足夠充分的時(shí)間為選手們準(zhǔn)備理論知識(shí)，學(xué)院比賽的準(zhǔn)備工作需提前?？梢栽趯W(xué)期一開學(xué)組織報(bào)名，同時(shí)在學(xué)生中做好動(dòng)員，讓參與者對(duì)比賽有個(gè)全面的認(rèn)識(shí)，為篩選優(yōu)秀的選手做好準(zhǔn)備。

2 重視理論基礎(chǔ)，培養(yǎng)理論突擊能力

通過兩次的比賽，總結(jié)發(fā)現(xiàn)選手們的理論考試成績(jī)是弱項(xiàng)，因此比賽的準(zhǔn)備必須強(qiáng)化理論。指導(dǎo)老師要根據(jù)國(guó)家職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物疫病防治員》（三級(jí)）規(guī)定的應(yīng)知要求，對(duì)參賽選手進(jìn)行系統(tǒng)的輔導(dǎo)復(fù)習(xí)。理論的賽選最好通過幾輪模擬考試成績(jī)綜合評(píng)定，既要考核選手們的基礎(chǔ)知識(shí)，也要考核其學(xué)習(xí)理論內(nèi)容突擊能力，才能更好地應(yīng)對(duì)比賽理論考試知識(shí)面廣的狀況。

3 規(guī)范操作規(guī)程，模擬操作過程

3.1 規(guī)范試驗(yàn)器材，正確熟練使用 新城疫抗體測(cè)定需要的試驗(yàn)器材最好能和競(jìng)賽規(guī)程所用的器材一致，這樣才能保證選手在比賽中不至于出現(xiàn)小的失誤而引起扣分。選手在平時(shí)訓(xùn)練時(shí)，所有的器材在使用完之后必須放在一個(gè)托盤里，每一輪訓(xùn)練開始時(shí)，再從托盤拿出，按要求擺放在自己的操作臺(tái)面上。托盤天平測(cè)量開始前，必須先將游碼移到標(biāo)尺左端的零刻度處，然后才開始調(diào)節(jié)平衡螺母，使天平平衡。若將平衡螺母左右移至盡頭天平仍不得平衡，則應(yīng)檢查原因，不能移動(dòng)游碼來達(dá)到平衡。離心機(jī)使用時(shí)離心管液體不能裝得太滿，對(duì)稱放置的試樣必須配平。移液槍吸頭裝配時(shí)需將移液器垂直插入吸頭，左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)，上緊即可，切勿用移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊。移液器吸液時(shí)應(yīng)垂直吸液，吸頭尖端侵入液面3mm以下，吸液時(shí)槍頭應(yīng)預(yù)潤(rùn)濕，然后再正式移液。吸液可將按鈕按到第一檔吸液，釋放按鈕。放液時(shí)先按下第一檔，打出大部分液體，再按下第二檔，將余液排出。吸取的過程應(yīng)該做到“慢吸快打”，在吸液時(shí)要慢、準(zhǔn)，放液時(shí)對(duì)準(zhǔn)后速度要快，可以避免打完后吸頭下存留液體，保證加入的液體體積一致。

3.2 采血方法規(guī)范、熟練 采血過程2位參賽的者的默契配合很重要。采血前采血者先將注射器內(nèi)吸入3.8%的枸櫞酸鈉。采血時(shí)，助手將雞側(cè)臥保定，一手固定雞的頭部，一手固定雞的腳；采血者展開采血側(cè)翅膀，一手固定采血部分，一手采血。采血完畢后采血者一手將抗凝劑和血液輕輕搖勻，一手用干棉球按壓采血部位止血。采血部位最好從翅靜脈叢刺入，比較容易采血成功且不容易淤血，采血過程需要加強(qiáng)練習(xí)，要求參賽者能做到一針見血。

3.3 紅細(xì)胞懸液的配制 血液采集完畢需取下針頭，把血液沿離心管的管壁緩慢注入離心管中，防止紅細(xì)胞的破壞。然后輕輕來回晃動(dòng)離心管，使血液與抗凝劑充分混合，配平后置于離心機(jī)中開始離心。離心完畢，應(yīng)先選用5ml的移液器吸取上面的液體，然后再選用1ml或200μl的移液器吸取，最好以畫圈的方式吸取，比較容易把白細(xì)胞和血小板吸干凈。最后一次離心完畢，按照計(jì)算量用移液器從離心管底部吸取紅細(xì)胞放入加好生理鹽水的燒杯中，再反復(fù)回用生理鹽水將移液器吸頭里的紅細(xì)胞洗下來，保證配制紅細(xì)胞濃度的準(zhǔn)確性。

3.4 血凝試驗(yàn) 血凝試驗(yàn)操作過程中需要注意的是使用微量移液器吸取液體時(shí)，吸頭需碰壁以除去多余的液體。加樣時(shí)應(yīng)將所加物在V型板的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。倍比稀釋時(shí)，要注意避免產(chǎn)生過多的氣泡，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。加紅細(xì)胞時(shí)最好懸滴或由后往前加，因?yàn)榭變?nèi)已有稀釋的抗原，如果吸頭接觸到孔內(nèi)混合液，會(huì)造成各個(gè)孔間液體相互污染，導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差?？乖瓚乙涸谑褂们耙欢ㄒ獡u勻，紅細(xì)胞懸液要邊搖邊加，以保證每一孔中加入濃度的準(zhǔn)確一致，但注意不要用力過大，防止紅細(xì)胞的就夠被破壞，造成溶血。結(jié)果判斷應(yīng)按照操作規(guī)程規(guī)定的時(shí)間，在對(duì)照孔成立的前提下及時(shí)觀察讀數(shù)，讀數(shù)過早，血凝價(jià)易判高，血凝抑制價(jià)易判低，讀數(shù)過晚，紅細(xì)胞發(fā)生裂解，結(jié)果不再有意義。

3.5 四單位病毒的配制 四單位病毒的配制應(yīng)根據(jù)計(jì)算結(jié)果用大移液器先吸取生理鹽水，然后用小移液器吸取抗原，抗原吸取前要搖勻，再反復(fù)用生理鹽水將移液器吸頭里的抗原洗下來，保證配制四單位病毒濃度的準(zhǔn)確性。配制好的四單位病毒最好能進(jìn)行回歸試驗(yàn)檢測(cè)，回歸試驗(yàn)的操作方法是：在微量反應(yīng)板的1～4孔均加入0.025ml生理鹽水，取四單位病毒液0.025ml加入第1孔內(nèi)，混勻后吸取0.025ml加入第2孔，依次倍比稀釋至第4孔，從第4孔吸取0.025ml棄去。然后每孔再加入0.025ml 1%雞紅細(xì)胞懸液，輕輕混勻，室溫(20～25℃)下靜置40min后觀察結(jié)果。若第1，2孔凝集，則視為抗原配制正確；若第1孔凝集，第2、3、4孔均沉淀，則抗原濃度配制偏低；若前3孔均凝集第4孔沉淀，則抗原濃度配制偏高。

3.6 血凝抑制試驗(yàn) 血凝抑制試驗(yàn)操作過程中加樣的注意事項(xiàng)與血凝試驗(yàn)基本相同，主要注意四單位病毒和紅細(xì)胞懸液加樣時(shí)注意懸滴或由前往后滴加，避免移液器吸頭與孔內(nèi)的液體接觸，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。血清要搖勻后加樣，四單位病毒和紅細(xì)胞懸液要邊搖勻邊加樣，保證每孔所加的樣品量和濃度的準(zhǔn)確性。判定結(jié)果的時(shí)間要嚴(yán)格控制，一般以陽性和陰性對(duì)照成立，紅細(xì)胞對(duì)照孔完全沉淀的前后5min內(nèi)判定試驗(yàn)結(jié)果較好，大約在30～40min左右。試驗(yàn)結(jié)果判讀時(shí)，微量反應(yīng)板傾斜45°，孔底沉淀的紅細(xì)胞流動(dòng)性好，呈淚珠樣流淌，邊緣無凝集顆粒的為凝集完全抑制，以能完全抑制四單位病毒的血清最高稀釋度作為血凝抑制滴度。

綜上所述，在新城疫抗體測(cè)定中，影響試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，只有嚴(yán)格按規(guī)定操作，細(xì)致、耐心地做好每一個(gè)環(huán)節(jié)，發(fā)現(xiàn)問題找出原因，及時(shí)糾正處理，才能保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，才能在比賽時(shí)獲得好的成績(jī)。

3.7 多次反復(fù)模擬比賽過程 選手們的操作技能經(jīng)過一定時(shí)間的練習(xí)，基本上都能正確掌握，熟練操作。為了更順利地進(jìn)行比賽，為了培養(yǎng)選手的良好心理素質(zhì)和應(yīng)變能力，應(yīng)該為選手們進(jìn)行多次模擬操作比賽。模擬過程嚴(yán)格按照比賽的形式進(jìn)行，從器材的準(zhǔn)備到試驗(yàn)報(bào)告的最好完成，全程多個(gè)評(píng)委對(duì)每一個(gè)環(huán)節(jié)都進(jìn)行評(píng)分，一部分學(xué)生參加觀摩，根據(jù)平時(shí)的模擬成績(jī)確定最后的比賽選手。

4 建議比賽舉辦方能對(duì)技能操作有一個(gè)反饋

比賽時(shí)，各個(gè)參賽隊(duì)只能知道理論分?jǐn)?shù)，而操作分?jǐn)?shù)是不公布的。因此建議比賽舉辦方能對(duì)每一個(gè)參賽隊(duì)的技能操作有一個(gè)反饋。因?yàn)楦鞅荣愱?duì)都是按照競(jìng)賽規(guī)程去進(jìn)行準(zhǔn)備的，比賽不公布成績(jī)，輔導(dǎo)教師和參賽選手只能自己去猜失誤在什么地方，而不能對(duì)自己的比賽進(jìn)行正確的分析，也不能發(fā)現(xiàn)問題，如果操作過程有一個(gè)反饋，更利于以后比賽的改進(jìn)和提高。