牛布魯氏菌病血清學(xué)檢測報(bào)告

顧冬花 （青海省大通縣樺林畜牧獸醫(yī)站 810100）

本次牛布魯氏菌病血清學(xué)檢測結(jié)果表明，2010年大通縣年布病感染抗體陽性率為0.25%，2011年陽性率為0.18%，2012年陽性率為0.14%；牛布病陽性率逐年有所下降，說明大通縣在牛布病防控上，通過采取監(jiān)測、及時(shí)淘汰陽性奶牛等綜合性防治措施后，已取得了一些成效。不同養(yǎng)殖戶中牛的感染抗體的陽性率各不相同，2010年散養(yǎng)戶的陽性率0.26%，販運(yùn)戶0.18%，規(guī)模場0.28%；2011年散養(yǎng)戶的陽性率0.19%，販運(yùn)戶0.11%，規(guī)模場0.21%；2012年散養(yǎng)戶的陽性率0.13%，販運(yùn)戶0.07%，規(guī)模場0.18%；牛布病的陽性率規(guī)模場最高，散養(yǎng)戶次子，販運(yùn)戶最低。

布氏桿菌病(Bruellosis簡稱布病)是由布氏桿菌引起的人畜共患的一種急性或慢行傳染病，本病一年四季均可發(fā)病，臨床上以母畜流產(chǎn)、公畜睪丸炎、暫時(shí)或永久性不育及產(chǎn)奶量下降為主要特征。本病在各地均有不同程度的流行，給畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康造成了嚴(yán)重危害。像澳大利亞已根除了奶牛布病，其成功經(jīng)驗(yàn)是，定期檢測，淘汰陽性畜，此外還對畜群的流動實(shí)行了嚴(yán)格的限制措施以確保健康牛群遠(yuǎn)離布?、?。因此，為了全面掌握本縣布病的感染和發(fā)病情況，分析發(fā)病特點(diǎn)和傳播風(fēng)險(xiǎn)因素，筆者于2010年3月至2012年10月進(jìn)行了牛布病感染抗體的檢測，現(xiàn)就其結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料

1.1 被檢血清 采自農(nóng)戶、規(guī)模場(戶)、販運(yùn)戶的牛血清18415頭份，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 檢測試劑 虎紅平板診斷抗原、試管凝集抗原、陰、陽性血清，虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)抗原購自青島易邦生物工程有限公司，批號20110426；試管凝集試驗(yàn)(SAT)抗原購自青島易邦生物工程有限公司，批號20110 403。

2 檢測方法

2.1 虎紅平板試驗(yàn)方法 參照國標(biāo)(GB/T 18646-2002)執(zhí)行[1]。將玻璃板上各格標(biāo)記受檢血清號，然后加相應(yīng)血清0.03ml.在受檢血清旁滴加抗原0.03ml，用牙簽類小棒攪動血清和抗原使之混合，每次試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰陽性血清對照。

2.2 試管凝集試驗(yàn)方法 按照操作規(guī)程進(jìn)[1,2]。

2.3 檢測程序 奶牛血清用虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行初篩，陽性者用試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢、確診。

3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

3.1 虎紅平板試驗(yàn) 等量的被檢血清和虎紅平板抗原混勻后2～3min出現(xiàn)肉眼可見的凝集顆粒，判為陽性，無凝集現(xiàn)象判為陰性。

3.2 試管凝集試驗(yàn) 被檢血清1:100稀釋，通過與比濁管對比，標(biāo)記出現(xiàn)“＋ +”以上的凝集現(xiàn)象時(shí)判為陽性血清，1:50稀釋，標(biāo)記出現(xiàn)“+ +” 以上的凝集現(xiàn)象時(shí)判為可疑，可疑反應(yīng)的奶牛經(jīng)3～4周后，重新采血檢驗(yàn)，如仍為可疑，在判為陽性。

4 結(jié)果

（詳見表1、表2、表3）。

表1 不同年份牛布病檢測結(jié)果 (頭、%)

表2 不同養(yǎng)殖戶牛布病檢測情況 (頭、%)

表3 虎紅平板實(shí)驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)

5 結(jié)果分析

（1）三年牛布病共監(jiān)測牛18415頭，陽性34頭，年度間平均陽性率0.18%，2010年監(jiān)測牛4726頭，陽性12頭，陽性率0.25%。2011年監(jiān)測牛6538頭，陽性12頭，陽性率0.18%，2012年監(jiān)測牛7151頭，陽性10頭，陽性率0.14%；牛布病陽性率逐年有所下降，說明大通縣在牛布病防控上，通過采取監(jiān)測、及時(shí)淘汰陽性牛等綜合性防治措施后，已取得了一些成效。（2）不同養(yǎng)殖戶中，牛布病感染情況各不相同，其陽性率以規(guī)模場最高，散養(yǎng)戶次之，販運(yùn)戶最低。究其原因是多方面的，但主要與以下因素有關(guān)：①規(guī)模場飼養(yǎng)密度過大，消毒不太嚴(yán)格，造成疾病多發(fā)和傳播便捷。多數(shù)中小養(yǎng)殖場在場址選擇，房舍布局，舍內(nèi)設(shè)計(jì)等都不太科學(xué)，飼養(yǎng)密度過大，單位面積上承載量增加，舍內(nèi)衛(wèi)生狀況不良，再加上沒有嚴(yán)格執(zhí)行消毒程序，消毒藥物選擇不當(dāng)，消毒劑量不足，消毒面積不徹底等遺留死角，對病畜的排泄物清除不夠徹底，造成環(huán)境污染，病源微生物滋生，加快了布病的傳播。②散養(yǎng)戶養(yǎng)殖分散、數(shù)量少，飼養(yǎng)時(shí)間長，主要以家庭為單位，養(yǎng)殖觀念落后，其養(yǎng)殖目的不是為了獲得經(jīng)濟(jì)效益，因此對布病的危害認(rèn)識不足，對布病的防治知識了解甚少，一旦感染布病，造成長時(shí)間的傳播，最后為了挽回經(jīng)濟(jì)損失，將病牛低價(jià)出售給販運(yùn)戶，成為新的傳染源。③對販運(yùn)戶而言，雖著個(gè)體養(yǎng)殖戶不斷增多，集市交易開放，牲畜流通加快，但販運(yùn)戶收購數(shù)量少，來源分散，飼養(yǎng)時(shí)間短，布病傳播有限。但這些牛大多來自養(yǎng)殖戶的病牛，這種方式也成為了布病的傳染源。（3）年度檢出的陽性畜沒有得到及時(shí)淘汰，以往檢測以母畜及幼齡畜為主，且檢測面有限，忽視對成年公畜的檢測，缺乏陽性畜無害化處理措施和經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償機(jī)制。（4）試管凝集試驗(yàn)(SAT)是我國布病診斷的法定方法，是一種比較經(jīng)典的布病檢測方法。特異性和敏感性高，檢測較準(zhǔn)確，判定上更精確，具有較高的診斷價(jià)值；但操作繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不適用于現(xiàn)場采用和大規(guī)模的篩選檢測。而虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)操作方便，快捷，適于大規(guī)模的篩選檢疫；而特異性不高，結(jié)果判定受反應(yīng)時(shí)間長短影響大，判定結(jié)果不夠精確。但兩種試驗(yàn)的符合率較高，所以在實(shí)際檢測過程中應(yīng)把兩種方法結(jié)合起來運(yùn)用，互補(bǔ)優(yōu)劣。先用RBPT篩選，陽性樣品再用SPT復(fù)核以作出比較準(zhǔn)確的判斷。

6 對策

（1）加大規(guī)模養(yǎng)殖場的監(jiān)管力度，加強(qiáng)養(yǎng)殖場的環(huán)境衛(wèi)生，制定嚴(yán)格的消毒程序，引導(dǎo)養(yǎng)殖場沿著正規(guī)化、合理化、科學(xué)化的軌道發(fā)展；加大科普宣傳力度，加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)、提高認(rèn)識，奶牛調(diào)運(yùn)嚴(yán)格按照《中華人民共和國動物防疫法》和國家有關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格實(shí)行奶牛調(diào)運(yùn)檢疫審批和“準(zhǔn)調(diào)”制度。（2）對重點(diǎn)發(fā)病地區(qū)母牛實(shí)施計(jì)劃免疫，對陽性牲畜實(shí)施撲殺無害化處理，對一般發(fā)病地區(qū)采取以檢測處理陽性畜為主的凈化措施，對可疑牛和檢測陽性牛撲殺前的牛奶，均需高溫等無害化處理?？梢膳＜皺z測陽性牛的胎兒、胎衣、排泄物均需深埋等無害化處理。為了鞏固布病防治效果，防止疫情回升，還要做好布病疫情的監(jiān)測工作，加大檢疫次數(shù)和力度，及時(shí)檢測布病抗體，隨時(shí)掌握疫情動態(tài)，采取相應(yīng)措施，對種畜實(shí)行檢疫淘汰制度 ，減少傳染源，穩(wěn)定控制疫情。（3）縣級動物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)應(yīng)加強(qiáng)對奶牛的檢疫，發(fā)放健康證，養(yǎng)牛戶憑健康證出售牛奶，乳品加工場憑健康證收購牛奶，起到追溯調(diào)查和“凈化”奶源的作用。（4）加大賠償力度，經(jīng)費(fèi)落實(shí)到位，及時(shí)撲殺。由于奶牛價(jià)格高、流動性大，如不及時(shí)處理，易造成疫源的擴(kuò)散。如果畜群中傳染源不徹底清除，病畜長期保菌、排毒，將會嚴(yán)重威脅健康畜群和人，感染的布病牛和羊仍是人間布病的主要傳染源[3]。（5）布病防制是一項(xiàng)長期而艱巨的工作，在工作中要堅(jiān)持采取，以監(jiān)測、檢測、檢疫、隔離、封鎖、消毒、陽性畜撲殺綜合防治措施，控制傳染源，切斷傳播途徑。只要每年嚴(yán)格檢疫，按省級下達(dá)的布病監(jiān)測任務(wù)，合理采樣、規(guī)范監(jiān)測，陽性畜嚴(yán)格撲殺深埋，做到加強(qiáng)聯(lián)防、畜間檢疫，注意疫情動態(tài)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并撲殺病畜，將疫情消滅在萌芽中，達(dá)到預(yù)警預(yù)報(bào)、凈化畜群的目的，直至成為無病畜群。

[1]動物布魯氏菌病診斷技術(shù)(Diagnostic techniques for animal brucellosis)》GB/T 18646-2002, 北京: 2009(11).

[2]中國農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編《動物布魯氏菌病診斷技國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局，《SN/T 1090-2002布氏桿菌病試管凝集試驗(yàn)操作規(guī)程》[M].北京: 2003.

[3]張士義, 馬漢維, 江森林.我國近年來布魯氏菌病監(jiān)測資料分析[J].中國人畜共患病雜志, 1999,15(1): 59-60.

[4]羅伯特.勒韓著《澳大利亞根除牛布氏菌病和結(jié)核病紀(jì)實(shí)》[M].農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局/中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心.1996-4.