邱 楊,黃 偉,陳進(jìn)會(huì),盧小雨,趙 麗,蘭文生,劉建麗
(1.東莞出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東東莞523072;2.深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東深圳518045)
雞新城疫(Newcastle disease,ND)是由禽副黏病毒Ⅰ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一種主要侵害雞、火雞、野禽及觀賞鳥類的高度接觸傳染性、致死性疾病,亦可感染人。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病,是我國出入境和供港澳家禽的重要檢疫對象。NDV 對雞的感染率和致死率均頗高,是最重要的一種家禽傳染病病原[1]。隨著集約化養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,近年來,無論是該病的流行病學(xué)、臨床癥狀,還是病理剖檢均發(fā)生了新的變化,即出現(xiàn)了非典型雞新城疫[2]。在我國,隨著大規(guī)模的疫苗預(yù)防接種及隔離消毒等措施的實(shí)施,使該病造成的損失大幅度減少,但又出現(xiàn)了新的情況,即主要特點(diǎn)是不表現(xiàn)特異性癥狀的新城疫病例日益增多,甚至于高抗體雞群也發(fā)生該病,以低發(fā)病率、低死亡率、高淘汰率、散發(fā)的非典型新城疫為特征。因其在臨床癥狀、流行特點(diǎn)和病理變化等方面與典型的新城疫有很大不同,易被誤認(rèn)為其他疾病,以致于不能及時(shí)采取針對性的措施,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此,了解其成因,準(zhǔn)確診斷,正確防控是控制該病發(fā)生的有力措施。
雞群沒有明顯的大量死亡現(xiàn)象,雛雞主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀,咳嗽,口中多黏液,呼吸困難,病程長的表現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀。成年雞無明顯癥狀,蛋雞主要是產(chǎn)蛋量下降,不合格蛋增多,時(shí)有呼吸道癥狀。發(fā)病初期,診斷和用藥及時(shí)能有效控制該病,病程稍長或與其他疾病混合感染,可引起大面積死亡。
癥狀輕重、持續(xù)時(shí)間長短與雞群免疫抗體水平高低無相關(guān)性,新城疫流行時(shí),抗體水平低的雞只先發(fā)病死亡,一段時(shí)間反復(fù)出現(xiàn)這樣的情況。
野毒(尤其是強(qiáng)毒)感染后帶毒的雞體內(nèi)產(chǎn)生高水平的抗體,達(dá)14log2~15log2 以上。感染早、中期,雞群個(gè)體抗體水平差異較大,部分雞只達(dá)15log2以上。感染后期,由于反復(fù)感染,整個(gè)雞群呈隱性感染狀態(tài),抗體水平較高。未感染雞群一旦個(gè)體抗體水平下降,又會(huì)出現(xiàn)新的病例,雞群外觀正常,但有零星雞只死亡。野毒在感染雞群定居、復(fù)制,并不斷排毒,持續(xù)感染。
患雞在發(fā)生非典型新城疫的同時(shí)往往伴有其他疾病的發(fā)生,如大腸桿菌病、球蟲病、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎等[3]。2009年王德水對當(dāng)?shù)?0日齡發(fā)病雞進(jìn)行診斷,據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化,診斷為法氏囊病與非典型新城疫混合發(fā)生。威海某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的4 000多只35日齡肉雞發(fā)病,根據(jù)臨床癥狀、病理變化,結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查,確診該雞群為新城疫病毒、小腸、盲腸球蟲混合感染[4-6]?;茧u發(fā)生混合感染的主要原因是當(dāng)雞群發(fā)生某一種疾病時(shí),機(jī)體免疫力顯著降低,所以很容易被另外一種或幾種病原感染。
河南省羅山縣某專業(yè)戶養(yǎng)雞場雞群發(fā)病的特點(diǎn)為發(fā)熱,呼吸困難,嚴(yán)重腹瀉,神經(jīng)紊亂,黏膜、漿膜特別是腺胃乳頭黏膜有出血現(xiàn)象,以及出現(xiàn)全身性的敗血癥變化[7-8]。由于誤診對雞群亂投藥物,不僅增加了雞場醫(yī)藥費(fèi)的支出,而且還耽誤了控制非典型性新城疫的最佳時(shí)機(jī)。
徐輝等[9]的研究表明,同一株新城疫病毒既可引起典型的新城疫,也可引起非典型新城疫癥狀,雞新城疫由典型變?yōu)榉堑湫椭饕煽贵w壓力所致。人工發(fā)病試驗(yàn)的結(jié)果,只有在雞的抗體水平極低或陰性時(shí),病雞才呈典型發(fā)病??贵w水平參差不齊,一些低抗體水平雞的存在是非典型新城疫發(fā)病的前提,高抗體雞群則不發(fā)病。
使用過期或不合格的疫苗免疫接種,不同毒株的疫苗免疫接種劑量不一,免疫接種方法不當(dāng);免接種疫前未進(jìn)行抗體水平監(jiān)測,當(dāng)雞群抗體水平參差不齊,盲目接種就會(huì)適得其反,容易導(dǎo)致非典型新城疫的發(fā)生。在聯(lián)合使用疫苗時(shí),沒有注意疫苗之間的相互干擾,如IBV 對NDV 有干擾作用,兩種疫苗免疫接種順序不當(dāng)也會(huì)導(dǎo)致非典型新城疫的發(fā)生。
日糧中蛋白質(zhì)、維生素及礦物質(zhì)缺乏會(huì)影響機(jī)體免疫器官發(fā)育,導(dǎo)致其免疫功能降低而影響免疫效果,成為非典型新城疫發(fā)病的誘因。
新城疫對雞的致病性雖然與感染劑量、感染途徑、雞的日齡及環(huán)境條件有關(guān),但主要取決于毒株強(qiáng)弱。任何年齡的雞均可發(fā)生,但30、80、200日齡左右的雞群多發(fā);一般情況下,雞的日齡越小,發(fā)病越急。肉雞多發(fā)生在30日齡。雛雞死亡率一般較高,育成雞死亡率大于成年雞。產(chǎn)蛋雞多在開產(chǎn)前和產(chǎn)蛋高峰期發(fā)病。
浙江省義烏市某養(yǎng)雞場1 500只黃羽肉雞,4周齡開始發(fā)病,持續(xù)10d死亡650只,后經(jīng)確診該雞群患有新城疫與葡萄球?。?]。2008年4月,甘肅省金塔鎮(zhèn)某雞場,5月開始產(chǎn)蛋,10月齡產(chǎn)蛋雞群突然產(chǎn)蛋率急劇下降,產(chǎn)薄殼蛋、軟殼蛋,經(jīng)確診為非典型新城疫[10]。
由于全球氣候變暖所造成的大氣環(huán)流的異常,我國各地也會(huì)越來越多地出現(xiàn)極端天氣,包括臺(tái)風(fēng)和颶風(fēng)在內(nèi)的熱帶氣旋可能更強(qiáng),降水分布也會(huì)更加不均。而每一次的氣溫突變,都會(huì)造成禽類發(fā)病相對增多。此外,初春季節(jié),冷暖交替,晝夜溫差大,冷應(yīng)激會(huì)造成雞的抗病能力降低,其他的應(yīng)激因素還包括長途運(yùn)輸、長時(shí)間斷水、飼養(yǎng)密度大、空氣污濁、氨氣濃度過高、天氣過熱。同時(shí)氣溫回升,病原微生物開始大肆孳生,容易造成傳染病的大量發(fā)生并迅速蔓延。雞群易發(fā)生新城疫、禽流感、大腸桿菌病、傳染性支氣管炎、傳染性鼻炎等病。在這些疾病中,危害最大、發(fā)病面積最廣的是新城疫[11]。
2008年河北省唐山市豐潤區(qū)某鄉(xiāng)一養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的雛雞生長至36日齡時(shí),由于氣溫下降,舍內(nèi)供暖設(shè)備出現(xiàn)故障,導(dǎo)致舍內(nèi)空氣質(zhì)量下降,溫度偏低,37日齡雞群開始出現(xiàn)相關(guān)病癥[12]。山東濱州某養(yǎng)殖場內(nèi)飼養(yǎng)的蛋雞發(fā)病,原因之一是新建舍內(nèi)墻壁潮濕,舍內(nèi)濕度高達(dá)87%,地面潮濕[13]。
自然途徑(鼻、口和眼)感染時(shí),病雞呼吸道癥狀更明顯,而通過肌肉、靜脈和腦內(nèi)途徑感染的神經(jīng)癥狀似乎更明顯。據(jù)報(bào)道[14-15],患雞均出現(xiàn)以下不同程度的癥狀:首先,具有明顯的呼吸道癥狀,如張口喘氣、呼吸困難、咳嗽、鳴叫,并伴有“呼?!甭?,氣喘。其次,有少數(shù)患雞可能出現(xiàn)扭頸歪頭、轉(zhuǎn)圈及觀星等神經(jīng)癥狀。也有的表現(xiàn)為精神沉郁,閉眼縮頸,食欲減退或不食,排出綠色或灰黃色的稀糞。除了這些共同特征之外,不同年齡的雞只在患病時(shí)表現(xiàn)的癥狀不同。產(chǎn)蛋雞主要表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量急劇下降,軟殼蛋較平時(shí)明顯增多,蛋殼顏色變淺。臨床診斷要注意與溫和型禽流感的鑒別診斷[15],從剖檢到流行特點(diǎn)分析兩種病的差異作出準(zhǔn)確判斷。
用血清學(xué)方法測定雞群抗體滴度,通過臨床癥狀和病毒分離鑒定,可以分析雞群的感染狀態(tài)。對發(fā)病雞群隨機(jī)采集血樣20份,分離血清,用微量法進(jìn)行新城疫HI滴度檢測,結(jié)果其效價(jià)范圍為0~10 log2,抗體滴度懸殊,初步診斷為非典型性新城疫[16-17]。2009年遼寧普蘭市發(fā)生混感病例,采取紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)(HI試驗(yàn)),采10只雞血,分離血清,測得抗體結(jié)果是水平較低、離散度較大,低者小于5log2,高者達(dá)8log2,平均值為6.2log2,由此可初步判定為非典型新城疫。
Liu H L 等[18]對RT-PCR檢測新 城疫病毒的方法進(jìn)行研究,結(jié)果表明該方法有很高的特異性和敏感性??梢酝ㄟ^抗體、熒光RT-PCR檢測和剖檢癥狀判定是否為非典型新城疫。李丙彥等[19]采用RT-PCR 方法鑒定雞群是否感染新城疫病毒。Nidzworski D 等[20]對新城疫病毒強(qiáng)毒株和弱毒株應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR進(jìn)行了檢測和鑒別。
微流控技術(shù)又稱微流控全分析系統(tǒng)(Micro total analysis system),通過微細(xì)加工技術(shù)在芯片上構(gòu)建由儲(chǔ)液池、微反應(yīng)室、微管道等微功能元件構(gòu)成的微流路系統(tǒng),加載生物樣品和反應(yīng)液后,在壓力泵或者電場作用下形成微流路,于芯片上進(jìn)行一種或連續(xù)多種的反應(yīng),達(dá)到對樣品高通量快速分析的目的。該技術(shù)應(yīng)用于免疫分析中,使其具有很強(qiáng)的靈敏性和特異性。Herr A E 研究小組[21]將毛細(xì)管凝膠電泳與免疫分析相結(jié)合,并建立了微分析平臺(tái),通過芯片凝膠電泳分離和檢測抗原、抗體和抗原-抗體復(fù)合物。
蔣興宇等[22]利用納米和微流控技術(shù)平行連續(xù)稀釋檢測人血漿中的人免疫缺陷病毒(HIV)抗體,通過微流控通道引入多種抗體包被在表面納米纖維薄膜上,然后從垂直方向引入含有抗體的血清,最后通過帶有熒光的二抗成像量化檢測,可以在一次試驗(yàn)中同時(shí)進(jìn)行多個(gè)抗原-抗體相互作用的檢測。用僅相當(dāng)于常規(guī)檢測用量的千分之一甚至萬分之一的樣品和試劑用量,快速、準(zhǔn)確地檢測了HIV 的多種抗原-抗體相互作用。該技術(shù)可用于新一代動(dòng)物疾病檢測試劑盒的研制,用微量的血清樣品就可以在很短的時(shí)間內(nèi)完成動(dòng)物疾病確診試驗(yàn),不但大幅度降低勞動(dòng)強(qiáng)度和檢測時(shí)間,還能夠避免人為主觀判讀而造成的結(jié)果誤差。
嚴(yán)格執(zhí)行綜合防控措施,把免疫接種與營養(yǎng)完善、環(huán)境管理、消毒制度有機(jī)結(jié)合起來,才能獲得良好的免疫效果。雞群發(fā)病后,必須早診斷,早治療,及時(shí)采取綜合性的防控措施,才能減少不必要的損失。
做好雞舍的通風(fēng)換氣,改善雞舍的空氣質(zhì)量,降低氨氣濃度和雞群的飼養(yǎng)密度。所以在日常飼養(yǎng)管理中,應(yīng)定期在飲水中添加速補(bǔ)康來提升機(jī)體的抗應(yīng)激能力,盡量降低因應(yīng)激導(dǎo)致雞群抵抗力下降而發(fā)病的機(jī)會(huì)。而且速補(bǔ)康在疫苗免疫前后或同時(shí)使用,能改善機(jī)體免疫系統(tǒng)功能,顯著提高機(jī)體對各種疫苗的免疫應(yīng)答水平,提高疫苗免疫效果。
對重癥患雞和雞場糞便進(jìn)行深埋處理。對整個(gè)發(fā)病區(qū)域進(jìn)行噴霧消毒,這樣有助于殺滅病毒,降低病毒的致病力,減少環(huán)境中的病毒量,防止病毒擴(kuò)散。做好消毒工作是最主要的防控手段。消毒時(shí)選擇新型、殺滅病毒能力強(qiáng)的消毒劑,對病毒、細(xì)菌、細(xì)菌芽胞、真菌、球蟲卵囊等均具有很強(qiáng)的殺菌作用。對病情較輕的患雞進(jìn)行隔離并對患病雞群進(jìn)行消毒也可選擇使用“百毒殺”(癸甲溴氨溶液)等藥物[23]。用含氯類和碘制劑2種以上消毒劑定期進(jìn)行全場消毒,方可減少和殺滅環(huán)境中可能存在的病毒,杜絕強(qiáng)毒污染和入侵。
4.3.1 緊急免疫 一般情況下,國內(nèi)雞群發(fā)生新城疫后,也可以采用二種處理辦法。一是立即注射高免血清,二是接種新城疫Ⅰ系疫苗。高免血清中含有新城疫抗體,這些抗體進(jìn)入雞體后能中和NDV,使其失去致病性。在接種Ⅰ系疫苗3d~4d后即可產(chǎn)生抗體,同時(shí)產(chǎn)生干擾素。當(dāng)然,雞群發(fā)生典型新城疫后注射Ⅰ系苗,并不能保證100%的雞群都能存活。當(dāng)雞群發(fā)生新城疫時(shí),注射抗NDV 高免卵黃抗免治療新城疫時(shí),為防止繼發(fā)感染,在抗NDV高免卵黃抗體內(nèi)加入一定量的抗生素。健康雞免疫方法:對健康雞群每羽肌肉注射油乳劑滅活苗0.5 mL,對患雞用環(huán)丙沙星、阿奇霉素飲水以防止繼發(fā)呼吸道、消化道感染,并在飼料中加入黃芪多糖、維生素C以促進(jìn)機(jī)體康復(fù)。
4.3.2 藥物控制 該病重在預(yù)防,當(dāng)就雞群大規(guī)模發(fā)病時(shí),治療效果一般不理想,并且導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)效益受損。因此,可以定期采用藥物阻斷,提高機(jī)體免疫力,以應(yīng)對非典型新城疫的發(fā)生。劉建國等[23]采用中西醫(yī)結(jié)合治療非典型雞新城疫,效果顯著,3d后病情得到控制。第7天回訪,病雞呼嚕、咳嗽、甩頭癥狀消失,群雞食欲增加,精神恢復(fù)正常,糞便正常,產(chǎn)蛋正常,產(chǎn)蛋量開始上升,雞群恢復(fù)正常。汪曉飛等[24]采用雙合烯亞胺酸對肉雞非典型新城疫的治療試驗(yàn)表明,雙合烯亞胺酸明顯優(yōu)于雙黃連和黃芪多糖,治愈率高達(dá)90%,有效率達(dá)97%。在用疫苗的緊急預(yù)防接種的同時(shí),使用抗菌藥物如青霉素、鏈霉素、環(huán)丙沙星、阿奇霉素、泰樂菌素等防止繼發(fā)呼吸道、消化道感染,并在飼料或飲水中增加清瘟敗毒散和多種維生素,如維生素C、速補(bǔ)等,促進(jìn)機(jī)體康復(fù)。對于混合感染的情況,治療新城疫與治療另外一種或幾種疾病所需要的藥物要同時(shí)使用,并注意各藥物之間的互相影響。
近年來,隨著養(yǎng)禽業(yè)的迅速發(fā)展,飼養(yǎng)密度的提高,引入品種的增多,各種疾病也日趨增多,許多傳統(tǒng)的疫病在流行趨勢上出現(xiàn)了新的變化。在農(nóng)戶養(yǎng)殖過程中,雞新城疫仍是威脅養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展最嚴(yán)重的疫病之一。由于飼養(yǎng)管理和新城疫免疫接種中存在的問題,使非典型新城疫頻頻出現(xiàn),給養(yǎng)殖戶帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。總結(jié)非典型雞新城疫的發(fā)病特點(diǎn),了解其成因,準(zhǔn)確診斷是控制該病的關(guān)鍵。
目前非典型新城疫流行態(tài)勢復(fù)雜,將納米技術(shù)應(yīng)用到該病的綜合防控機(jī)制研究中,需要建立非典型新城疫致病基因序列信息。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,做好消毒衛(wèi)生工作,選用優(yōu)質(zhì)的疫苗,建立合理的免疫方法和程序,注意多種疾病的聯(lián)合防控是防控本病的根本。
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