丹皮酚對(duì)大鼠急性心肌梗死后心室重構(gòu)及心功能的影響*

趙靜怡，張樹(shù)峰，徐 倩，周曉慧

(承德醫(yī)學(xué)院，河北承德 067000)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后心室重構(gòu)是導(dǎo)致心室收縮與舒張功能減退的重要原因，而心力衰竭是心肌梗死的重要并發(fā)癥之一，因此，改善心室重構(gòu)是治療心肌梗死、預(yù)防心力衰竭的重要環(huán)節(jié)。丹皮酚(paeonol)又名牡丹酚，是毛茛科植物牡丹Paeonia Suff ruticosa Andr的根皮、以及蘿摩科植物徐長(zhǎng)卿Pycanostelma Paniculatum(Bunge)K.Schum干燥根或全草的主要有效成分[1-3]?，F(xiàn)代藥理研究表明，丹皮酚藥理活性廣泛，對(duì)心血管具有良好的保護(hù)作用。本研究采用大鼠急性心肌梗死心室重構(gòu)的動(dòng)物模型，探討丹皮酚對(duì)大鼠急性心梗后心室重構(gòu)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要儀器和試劑 健康雄性Wistar大鼠，體重280g-300g,購(gòu)自北京華阜康生物科技有限公司(批號(hào):SCXK京2009-0004 0245860)。丹皮酚注射液，寧波天真制藥有限公司(批號(hào):20110603);卡托普利片，江蘇平光制藥(焦作)有限公司，(規(guī)格:25mg/片)。DW3000-B型小動(dòng)物人工呼吸機(jī)，淮北正華生物科技有限公司;ECG-11D心電圖機(jī)，惠州科美思醫(yī)用儀器有限公司;BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司。

1.2 AMI大鼠模型的建立、大鼠分組及處理 8%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，經(jīng)氣管插管連接呼吸機(jī)，左側(cè)腋下三、四肋間逐層開(kāi)胸，于左心耳下緣2mm處使用無(wú)菌線完全結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支，然后立即逐層關(guān)胸并縫合。觀察大鼠心電圖ST段的變化，以ST段持續(xù)抬高并出現(xiàn)室性心律失常做為判斷AMI模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)后3d將36只成模大鼠隨機(jī)分為4組:丹皮酚低劑量組(n=9，4mg/kg/d)、丹皮酚高劑量組(n=9，8mg/kg/d)、卡托普利組對(duì)照(n=9，10mg/kg/d)和模型組(n=9);同時(shí)設(shè)假手術(shù)組(n=9)，只穿線不結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈。假手術(shù)組和模型組大鼠每天以等量生理鹽水灌胃，各組大鼠給藥時(shí)間均為4周。

1.3 檢測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo) 用藥結(jié)束后，8%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，分離頸總動(dòng)脈并插入壓力傳感微導(dǎo)管至左心室，連接BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，測(cè)定左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張末壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓最大上升速率和下降速率(±dp/dtmax)，各指標(biāo)取連續(xù)10個(gè)心搏的平均值。

1.4 觀察大鼠心肌組織的病理變化 檢測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)后，注射KCL處死大鼠并使心臟停留在舒張期，結(jié)扎線下切取3-5mm心肌組織，入10%甲醛固定，24h后常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片，HE染色觀察心肌組織的病理變化。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠存活只數(shù) 模型成功建立并給藥4周后，假手術(shù)組存活8只、模型組6只、丹皮酚低劑量組7只、丹皮酚高劑量組9只、卡托普利對(duì)照組8只。

2.2 各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 模型組大鼠的LVSP、±dp/dtmax明顯低于假手術(shù)組，LVEDP明顯高于假手術(shù)組(P＜0.05)。丹皮酚高劑量組和卡托普利對(duì)照組大鼠的LVSP、±dp/dtmax明顯高于模型組和丹皮酚低劑量組，LVEDP明顯低于模型組和丹皮酚低劑量組(P＜0.05)。見(jiàn)附表。

附表 各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(±s)

附表 各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(±s)

與模型組比較:*P＜0.05;與丹皮酚低劑量組比較:#P＜0.05

組別 n LVSP(mmHg)LVEDP(mmHg)+dp/dtmax(mmHg/ms)-dp/dtmax(mmHg/ms)假手術(shù)組 8 137.9±10.91* 10.64±1.11* 2080.66±193.83* 2019.12±158.73*模型組 6 88.88±14.86 17.24±1.25 755.03±257.45 698.32±201.01丹皮酚低劑量組 7 91.55±17.04 15.61±1.24 1422.29±241.11* 1267.51±221.34*丹皮酚高劑量組 9 121.95±12.73*# 11.73±1.47*# 1896.23±133.29*# 1768.22±181.19*#卡托普利對(duì)照組 8 121.45±15.32*# 11.96±1.50*# 1755.47±329.56*# 1703.65±298.26*#

2.3 心肌組織的病理變化 假手術(shù)組大鼠(附圖A）心肌細(xì)胞清晰可見(jiàn)，排列規(guī)則。模型組大鼠(附圖B）心肌組織呈現(xiàn)波浪凸起狀改變，胞間組織松散，細(xì)胞核大量消失、固縮、碎裂，可見(jiàn)大量壞死心肌細(xì)胞。與模型組大鼠比較，丹皮酚低劑量組(附圖C）、高劑量組(附圖D）和卡托普利對(duì)照組(附圖E）大鼠心肌組織的病理變化明顯減輕，尤其是丹皮酚高劑量組和卡托普利對(duì)照組，心肌細(xì)胞排列較規(guī)則、壞死癥狀明顯減輕。

附圖 心肌組織HE染色結(jié)果(×200)

3 討論

心肌梗死后心室重構(gòu)是心室大小、形狀和功能通過(guò)機(jī)械、神經(jīng)-體液和基因表達(dá)等因素調(diào)節(jié)的過(guò)程，表現(xiàn)為梗死區(qū)心肌發(fā)生擴(kuò)張和變薄，進(jìn)而心肌瘢痕形成，局部室壁僵硬，彈性和收縮性均明顯下降，這種力學(xué)改變導(dǎo)致心室變形，非梗死區(qū)代償性變化，引發(fā)心功能不全，而心功能不全的失代償階段則演變成心力衰竭，使心臟負(fù)荷過(guò)重[4-5]。

本研究發(fā)現(xiàn)，與假手術(shù)組大鼠比較，模型組大鼠的LVSP、±dp/dtmax明顯降低，LVEDP明顯升高。血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)是判斷心功能的重要參數(shù)，因此，本研究表明大鼠心肌梗死后可能因心室重構(gòu)而使心功能嚴(yán)重下降。藥物干預(yù)4周后血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，丹皮酚高劑量組和卡托普利對(duì)照組大鼠的心功能均有顯著改善，且丹皮酚組高劑量組和卡托普利對(duì)照組大鼠心肌組織的病理變化也明顯減輕。卡托普利是臨床常用的治療心力衰竭的主要藥物，本研究顯示丹皮酚具有與卡托普利類似的改善心肌梗死后心室重構(gòu)的作用。許多研究表明，炎性細(xì)胞因子可降低心肌收縮力及心輸出量，促進(jìn)心肌自發(fā)性的功能障礙、內(nèi)皮損傷及血液高凝狀態(tài)等，從而誘發(fā)心室重構(gòu)的發(fā)生[6-7]。因此，抑制炎性反應(yīng)已成為抑制心梗后心室重構(gòu)的重要方法。本課題組的前期研究證明[8]，丹皮酚可下調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)，從而抑制炎癥信號(hào)通路的傳導(dǎo)，并且顯示出明顯的抑制炎癥反應(yīng)和良好的保護(hù)血管內(nèi)皮損傷的作用。因此推測(cè)，丹皮酚改善大鼠心梗后心室重構(gòu)可能是通過(guò)阻斷炎癥因子傳導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)的，但確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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