GC-MS檢測(cè)中藥枸杞中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留

曹殿潔

（安徽新華學(xué)院 藥學(xué)院，安徽 合肥 230088）

枸杞味甘，性平.主要?dú)w肝、腎、肺經(jīng).其化學(xué)成分主要含胡蘿卜素、硫胺素、核黃素、煙酸、抗壞血酸、β-谷甾醇、亞油酸、玉蜀黍黃素、甜菜堿、酸漿果紅素及微量元素等.枸杞具有抗衰老、抗癌、降血脂與保肝、降血糖、生長(zhǎng)刺激、造血、增強(qiáng)非特異性免疫等藥理作用.我國(guó)寧夏產(chǎn)枸杞產(chǎn)量和出口量較大，而其中的農(nóng)藥殘留問(wèn)題一直是出口的瓶頸，枸杞生產(chǎn)中發(fā)生的蟲(chóng)害主要為蚜蟲(chóng)、紅癭蚊、銹螨和負(fù)泥蟲(chóng)等，病害發(fā)生較重的是銹病、白粉病、黑果病等，可用于枸杞的農(nóng)藥種類較多，包括有機(jī)磷類農(nóng)藥，擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥等[1-8].本文利用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法檢測(cè)中藥枸杞中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留，為枸杞中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

枸杞購(gòu)自合肥大藥房.

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品敵敵畏、樂(lè)果、久效磷、甲拌磷、三唑磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、毒死蜱（標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L）購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所.

乙腈，丙酮 分析純，購(gòu)自合肥大藥房；氯化鈉 分析純，經(jīng)120℃下烘8h，購(gòu)自合肥大藥房.Agilent6890/5973GC/MS氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀,帶有7683自動(dòng)進(jìn)樣器、分流/不分流進(jìn)樣口及EPC(電子自動(dòng)控制)模式，AgilentTechnologies,USA；XW280A型漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠；AnkeTDL240B離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠.

1.2 氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀分析條件

色譜柱：HP－5MS色譜柱 (30m×0.32mm×0.25 μm)熔融石英毛細(xì)管柱.

載氣He（純度99.99%），流速1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度230℃；進(jìn)樣量1.0 μL；不分流進(jìn)樣.升溫程序：初始溫度50℃，保持 1min，以 20℃/min升至 200℃，保持 1min，再以10℃/min升至290℃保持5min.

質(zhì)譜：EI源,70eV；離子源溫度230℃；采集方式為選擇離子(Sim)方式.

表1 各農(nóng)藥組分的采集時(shí)間、特征離子

1.3 樣品前處理

將樣品攪碎混勻，稱取20.0g于勻漿機(jī)的玻璃瓶中，加入40mL乙腈，10000r/min勻漿3min，過(guò)濾，放入裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒內(nèi)，蓋上塞子，劇烈震蕩2min,在室溫下靜置l0min，讓乙睛和水相分層，吸取l0mL乙腈相溶液(上層)于小燒杯中，置于水浴內(nèi)30～40℃，溶液上方加氮?dú)獯祾?，蒸發(fā)至近干，加入5mL丙酮，研洗殘?jiān)?，混勻后供氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀分析用.

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜行為

在設(shè)定條件下，8種農(nóng)藥的保留時(shí)間、定性離子和定量離子見(jiàn)表1，圖1為8種農(nóng)藥混標(biāo)采用SIM測(cè)定方式得到總離子色譜圖.

圖1 總離子色譜圖

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限

將混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制成相應(yīng)質(zhì)量濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，以峰面積（y）對(duì)質(zhì)量濃度（x,mg/kg）做標(biāo)準(zhǔn)曲線.8種農(nóng)藥線性關(guān)系列于表2.結(jié)果表明，在相應(yīng)的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)各農(nóng)藥的響應(yīng)值與其質(zhì)量濃度均呈良好的線性關(guān)系，8種化合物的相關(guān)系數(shù)均高于0.989，檢出限為 3.9～11.4 μg/kg.

2.3 回收率和精密度

在空白樣品中添加0.1、0.5mg/kg兩個(gè)水平的8種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述前處理、測(cè)定步驟進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定3次，同時(shí)做空白對(duì)照，采用空白提取液配制的基質(zhì)標(biāo)樣進(jìn)行定量，結(jié)果如表2所示.由表2可知，部分樣品的甲胺磷添加回收率較低，其余7種農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于13%，本方法的回收率和重現(xiàn)性均能夠滿足農(nóng)藥殘留分析的要求.

表2 線性范圍、線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢測(cè)限

表3 方法的精密度和加標(biāo)回收率

3 結(jié)論

利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的高靈敏度、抗干擾強(qiáng)等特點(diǎn)，在選擇離子掃描模式下，建立了同時(shí)測(cè)定中藥枸杞中8種有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的分析方法.方法前處理步驟簡(jiǎn)單，保留時(shí)間重現(xiàn)性好，具有良好的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，對(duì)中藥中農(nóng)藥殘留分析有參考價(jià)值.

〔1〕梁林軍，熊明玲，劉志承，陳紅軍.甘草和枸杞中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢測(cè)研究[J].中國(guó)藥業(yè)，2007,16(11):19～20.

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〔3〕梁月香，王曉菁，姜瑞，吳燕，牛艷.固相萃?。合嗌V串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定枸杞中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].山東林業(yè)科技,2011(6):1～3.

〔4〕尹秀蓮，游慶紅，羅程文.凝膠滲透色譜-氣質(zhì)聯(lián)用法同時(shí)測(cè)定枸杞中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(16):83～85.

〔5〕何笑榮，鄒定，姜文清，胡欣，孫春華.毛細(xì)管氣相色譜法分析枸杞子及其制劑中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006,41(9):705.

〔6〕茍金萍,張艷,程淑華,王曉菁.枸杞中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法的研究[J].寧夏農(nóng)林科技,2005,13(5):13.

〔7〕張艷,茍金萍,程淑華,王曉菁.枸杞中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2005,14(2):84～86.

〔8〕張艷，茍金萍，程淑華,王曉菁.枸杞中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留提取法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)[J].寧夏工程技術(shù),2004,2(3):164～165.