中藥糖蛋白類成分研究及應(yīng)用

李杏花，侯武波，王紹堃，薛長松，孫 暢

（山西振東制藥股份有限公司，山西 長治047100）

糖蛋白（glyeoproteins）是由分支的寡糖鏈與多肽鏈共價(jià)相連所構(gòu)成的復(fù)合糖，它廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物及病毒中［1］，在炎癥及自身免疫疾病、老化、癌細(xì)胞異常增殖及轉(zhuǎn)移、病原體感染等過程中起重要作用［2－3］。中藥已經(jīng)有兩千多年的臨床應(yīng)用，其療效是無庸置疑的?，F(xiàn)今很多科學(xué)家通過研究中藥的有效成分作用機(jī)理，去了解中藥發(fā)揮藥效的途徑，使更多人接受中藥。除了中藥小分子化合物，研究還發(fā)現(xiàn)中藥的許多蛋白質(zhì)都具有一定的藥理作用。

1 糖蛋白的結(jié)構(gòu)

糖蛋白由長度較短，帶分支的寡糖與多肽鏈共價(jià)連接而形成，連接方式主要分為β－構(gòu)型的N－糖苷鍵和α－構(gòu)型的O－糖苷鍵［4］，糖蛋白的糖鏈可以是直鏈和分支鏈，一般由2～12個(gè)單體組成，末端成員常常是唾液酸或L－巖藻糖。

2 糖蛋白的提取及分離純化

糖蛋白的提取純化過程一般為：粉碎→過篩→浸提→濃縮→除雜→柱層析色譜分離→純度鑒定。糖蛋白純度鑒定常用的方法有凝膠層析法、SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、高效液相色譜法等。張曉琦等［5］采用乙醇分級(jí)沉淀、CM 纖維素離子交換柱層析及SephadexG－75柱層析，從白豆中分離純化得到一組分均一的白豆α－淀粉酶抑制劑（α－AI），其為一相對(duì)分子質(zhì)量為36k的糖蛋白。程顯好［6］等將蟲花菌菌絲體糖蛋糖蛋白經(jīng)熱水提取、柱層析手段分離純化得到一種蛋白質(zhì)PCAI，用聚丙烯酰胺凝膠電泳和Sepharose6B柱層析證明其均一性，為單一均勻的糖蛋白，其可明顯提高小鼠單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力。李穗晶等［7］以地鱉為原料，采用勻漿、鹽析、硫酸銨分段沉淀、透析和DEAE－52纖維素離子層析等純化方法，從其體內(nèi)分離純化得到一種纖溶活性糖蛋白（EFP），采用SDS－PAGE 電泳法對(duì)該蛋白進(jìn)行了分子量和純度測(cè)定。吳紅棉等［8］對(duì)菲律賓蛤仔全臟器經(jīng)熱水煮提、柱層析分離純化得到1種中性糖蛋白（NGP）和3種酸性糖蛋白（AGP，主要組分為AGp－Ⅲ）。高居易等［9］用60%（NH4）2SO4飽和溶液沉淀蓮子蛋白質(zhì)，經(jīng)ConA－Sepharose4B 親和層析柱分離SephadexG－150凝膠層析柱純化，得到2 個(gè)組分的糖蛋白（GLP－I和GLP－Ⅱ）。孫宇婧［10］等采用熱水浸提法得到山藥糖蛋白粗提物，經(jīng)過不同洗脫液進(jìn)行DEAE－52柱層析純化和SephadexG－75柱層析純化，得到山藥糖蛋白組分CYG－1和CYG－2。

3 中藥糖蛋白的藥理作用

3.1 增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能

程顯好等［11］從蟲花菌菌絲體中分離純化得到一種糖蛋白PCAI，可明顯提高小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬能力，并可使免疫器官脾臟明顯增重。戴玲等［12］研究顯示白頭翁糖蛋白能在體外顯著增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅細(xì)胞的作用，并可誘生巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮，對(duì)巨噬細(xì)胞分泌白介素－1亦有一定的提高作用。單保恩等［13］發(fā)現(xiàn)了中藥白附子糖蛋白對(duì)小鼠脾細(xì)胞和人淋巴細(xì)胞的增殖活性有很強(qiáng)的促進(jìn)作用。闞建全等［14］研究表明甘薯糖蛋白可顯著提高PHA 刺激的人外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。單保恩［15］研究表明白花蛇舌草糖蛋白對(duì)小鼠和人有免疫調(diào)節(jié)作用，并通過刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)殺傷或吞噬腫瘤細(xì)胞。

3.2 抑制腫瘤作用

李穗晶等［7］從地鱉體內(nèi)分離純化得到一種纖溶活性糖蛋白（EFP），對(duì)雞胚尿囊膜新生血管生成有良好的抑制作用，有可能用于腫瘤治療。楊世杰等［16］研究表明縫裂層孔菌多糖蛋白能夠從多方面改善機(jī)體的免疫功能，從而達(dá)到抑瘤目的。姜自彬［17］研究結(jié)果表明糙皮側(cè)耳真菌糖蛋白對(duì)S－180腹水瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用，具有特異性抗腫瘤作用。劉萍等［18］研究表明松口蘑菌絲體活性糖蛋白在體外抗腫瘤試驗(yàn)中具有直接殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。張夢(mèng)杰等［19］對(duì)陰溝腸桿菌菌糖蛋白進(jìn)行體外抑瘤試驗(yàn)表明該糖蛋白對(duì)肝癌QGY7730，肺腺癌A549，胃癌KatoⅢ，腸癌SWⅢ6瘤細(xì)胞株均有明顯殺傷作用。魏無青等［20］發(fā)現(xiàn)5mg／L 58－松口蘑糖蛋白作用48h，就對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF－7、人白血病細(xì)胞HL－60有殺傷作用。劉主等［21］體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)表明，甘薯糖蛋白－1（SPG－1）對(duì)H22實(shí)體瘤小鼠具有明顯抑瘤作用，可明顯延長H22腹水瘤小鼠存活期，抑制腫瘤細(xì)胞有絲分裂，增加脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和腹腔巨噬細(xì)胞活性，揭示SPG－1對(duì)H22 荷瘤小鼠抗腫瘤作用。季宇彬等［22］對(duì)龍葵多糖糖蛋白抗腫瘤的作用機(jī)制進(jìn)行了研究，結(jié)果表明龍葵糖蛋白（150×103）可通過阻斷NF－κB抗調(diào)亡通路、激活caspase超家族級(jí)聯(lián)反應(yīng)、及促進(jìn)NO 的釋放等多種途徑來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的調(diào)亡從而抑制腫瘤細(xì)胞生長而達(dá)到抗腫瘤作用。劉倩等［23］對(duì)尖紫蛤全臟器提取物糖蛋白的抗腫瘤活性進(jìn)行分析，結(jié)果表明其對(duì)鼻咽癌CNE－2Z細(xì)胞有明顯的體外抗腫瘤活性。

3.3 降血脂、降血糖的作用

近年來的研究發(fā)現(xiàn)許多植物的降血糖作用可能是其中的糖蛋白在起作用的結(jié)果，例如南瓜、苦瓜等。張曉琦等［24］研究表明白豆α－淀粉酶抑制劑（α－AI）對(duì)高血糖大鼠具有明顯的降血糖功能。唐成康等［25］從山茱萸中分離純化出一種糖蛋白，其對(duì)α－淀粉酶有反競爭抑制的特性，為潛在的治療糖尿病，肥胖和高血脂的藥物。李亞娜等［26－27］研究了甘薯糖蛋白降血脂的功能。表明其能顯著降低高血脂癥大鼠中血清膽固醇和甘油三酯的含量，尤其是血清膽固醇的含量。武金霞等［28］采用以大豆胰蛋白酶抑制劑為配基的親和色譜分離蚯蚓纖溶酶，并分離純化各組分，結(jié)果表明新組分8、9、10都是能水解纖維蛋白的糖蛋白，組分9、10均兼有纖溶酶原激活活性和直接纖溶活性。丁誠實(shí)等［29－30］先后觀察發(fā)現(xiàn)天麻糖蛋白（PGE2－1）具有顯著的抗凝、抗栓作用，可能為天麻提取物在抗栓方面的主要成分；糖蛋白組分GGE2b對(duì)急性血瘀大鼠異常的血液流變有良好的治療效果。郭素芬等［31］采用甘薯的糖蛋白提取物喂飼家兔，通過血脂、一氧化氮、超氧化物歧化酶、丙二醛等指標(biāo)觀察發(fā)現(xiàn)，甘薯的糖蛋白提取物可明顯抑制脂質(zhì)過氧化。

3.4 抗氧化、防疲勞、延緩人體器官的老化速度

傅明輝等［32］從苦瓜籽中分離出兩種糖蛋白，類超氧化物歧化酶（SOD）活性分別為79.05、17.25μ／mg。林丹等［33］通過小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)、血清尿素氮、肝糖原及血乳酸測(cè)定等對(duì)霞水母糖蛋白的抗疲勞作用進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，霞水母糖蛋白具有抗疲勞作用。

近年來從各種中藥中提取的糖蛋白表現(xiàn)出顯著的藥理學(xué)效應(yīng)，具有抗腫瘤、免疫活性、抗氧化、抗凝血等生物活性，且對(duì)機(jī)體正常組織細(xì)胞的生理功能影響小，毒副作用較少，在臨床治療中逐漸受到了廣泛應(yīng)用。

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