固本止哮方防治支氣管哮喘的實(shí)驗(yàn)研究

謝曉書， 張士卿

支氣管哮喘是一種常見的、多發(fā)的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，患病率有逐年上升趨勢，嚴(yán)重威脅人類身體健康。根據(jù)全球哮喘防治創(chuàng)議統(tǒng)計(jì)數(shù)字，全世界有1.5億人患有哮喘，每年死于哮喘的人有18萬之多。國外人群哮喘患病率為5%～10%，國內(nèi)約為1%，兒童可達(dá)3%左右［1］。因此，哮喘的防治已引起全世界的重視，世界衛(wèi)生組織已將其列入全球防治戰(zhàn)略。發(fā)揮中醫(yī)未病先防，整體觀念，辨證論治，發(fā)時治標(biāo)，防時治本，多環(huán)節(jié)，多角度，多靶點(diǎn)調(diào)治等優(yōu)勢，是支氣管哮喘防治的研究方向之一。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 選取SPF級SD幼齡大鼠100只，體質(zhì)量（70±10）g，雌雄各半，由甘肅中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供（合格證號：SCXK（甘）2004－0006）。整個實(shí)驗(yàn)過程在SPF級動物實(shí)驗(yàn)室（動物實(shí)驗(yàn)設(shè)施使用證號：SCXK（甘）2004－0006－0000916）中實(shí)施。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 卵白蛋白粉劑（上海升正生物技術(shù)有限公司，批號：100108）；固本咳喘膠囊（合肥今越制藥有限公司，批號：090730）；磷酸組胺（上海中秦化學(xué)試劑有限公司，批號：100410）；氯化乙酰膽堿（蘭州愛華化工有限責(zé)任公司，批號：081020）；固本止哮方（甘肅中醫(yī)學(xué)院藥劑教研室）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物篩選 100只大鼠放入霧化裝置箱內(nèi)，待其安靜后啟動超聲霧化儀，向箱內(nèi)噴入2%乙酰膽堿和1%磷酸組胺1∶1混合液，噴霧時間為30s，觀察并記錄大鼠出現(xiàn)二級哮喘時間（參照哮喘癥狀評分［2］，1級為呼吸困難，2級為呼吸困難＋咳嗽，3級為呼吸困難＋咳嗽＋跌倒，4級為死亡），即引喘潛伏期，超過60s為不敏感棄之，篩選出60只，雌雄各半備用。

1.4 分組 將60只大鼠按隨機(jī)數(shù)字法分為5組（空白組、模型組、固本止哮方高劑量組、固本止哮方低劑量組、固本咳喘膠囊對照組），每組12只。

1.5 模型制備 除空白組外，各組制備哮喘模型。第1、6、11天對實(shí)驗(yàn)大鼠行腹腔注射10%卵白蛋白生理鹽水1mL致敏（含卵白蛋白100mg，氫氧化鋁干粉100mg）；第14天，將大鼠置于霧化箱中，以3%卵白蛋白生理鹽水行超聲霧化吸入誘發(fā)哮喘發(fā)作，每日激發(fā)1次，每次30min，每次激發(fā)至3級哮喘狀態(tài)，即大鼠出現(xiàn)咳嗽、呼吸急促、腹肌緊張、點(diǎn)頭運(yùn)動等哮喘癥狀。連續(xù)激發(fā)7d。

1.6 干預(yù)方法 空白組、模型組分別連續(xù)生理鹽水灌胃，固本咳喘膠囊對照組按0.13g／kg劑量灌胃，固本止哮方高、低劑量組分別按生藥20、5g／kg劑量灌胃，各組連續(xù)灌藥28d。各組于灌藥7d后制備哮喘模型，空白組腹腔注射相同劑量的生理鹽水，給予相同劑量的生理鹽水霧化。

1.7 觀察指標(biāo) 對各大鼠引喘潛伏期的影響，大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸哮喘等級變化情況及激發(fā)后各組誘發(fā)哮喘（3級）發(fā)生率。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包作統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用珚±s表示，組間比較采用方差分析，等級資料采用Ridit分析，計(jì)數(shù)資料采用 Mann－Whitney U 檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對各組大鼠引喘潛伏期的影響 見表1。

表1 各組大鼠引喘潛伏期比較（珚±s，n＝12，s）

表1 各組大鼠引喘潛伏期比較（珚±s，n＝12，s）

注：與模型組比較，aP＜0.05。

組別 第1天 第14天40.69±0.36 －模型組 40.50±3.60 44.11±1.33固本止哮方高劑量組 40.90±1.78 87.33±1.64a固本止哮方低劑量組 41.10±2.38 80.51±1.01a固本咳喘膠囊對照組 40.80±3.04 81.99±0.64a F 0.98 5.86 P＞0.05 ＜空白組0.05

表1結(jié)果表明，在第1天篩選過程中各組大鼠的引喘潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；用藥灌胃預(yù)防14d后，除空白組未做引喘潛伏期測定外，余各組大鼠引喘潛伏期均延長，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組引喘潛伏期均長于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組3組兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸哮喘等級變化情況 見表2。

表2 各組大鼠哮喘等級變化情況（n）

表2結(jié)果表明，空白組未與1%卵白蛋白氣霧接觸，未發(fā)生哮喘，余4組均發(fā)生哮喘；與模型組比較，固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組哮喘等級明顯有減輕趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與固本咳喘膠囊對照組比較，固本止哮方高、低劑量組哮喘等級有減輕趨勢，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。固本止哮方高、低劑量組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 激發(fā)后各組誘發(fā)3級哮喘發(fā)生率的比較 在激發(fā)第4、7天，與空白組比較，其余各組的3級哮喘發(fā)生率明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組的3級哮喘發(fā)生率明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；固本止哮方高、低劑量組的3級哮喘發(fā)生率低于固本咳喘膠囊對照組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。固本止哮方高、低劑量組3級哮喘發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 激發(fā)后各組誘發(fā)3級哮喘發(fā)生率的比較［n（%），n＝12］

3 討論

固本止哮方由黃芪、五味子、炒白術(shù)、烏梅、防風(fēng)、銀柴胡、補(bǔ)骨脂、女貞子、何首烏、炙甘草等組成，是導(dǎo)師張士卿根據(jù)中醫(yī)基礎(chǔ)理論在玉屏風(fēng)散和過敏煎的基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代藥理研究和多年臨床經(jīng)驗(yàn)，精心篩選其相關(guān)藥物化裁而成。導(dǎo)師認(rèn)為：哮喘的病變部位主要在肺、脾、腎三臟，小兒肺臟嬌嫩，脾常不足，腎常虛，而人體水液的正常代謝由肺脾腎三臟完成，肺為水之上源，通調(diào)水道，脾胃為水谷之海主運(yùn)化水谷精微，腎者水臟，主津液，若三臟功能失調(diào)，則水液代謝障礙，痰濁內(nèi)生（與現(xiàn)代過敏學(xué)說有關(guān)），成為哮喘之夙根。其病機(jī)主要為正虛痰伏，邪阻肺絡(luò)，遇感外邪而觸發(fā)。治療上主張扶正為主，兼以祛邪。

玉屏風(fēng)散由黃芪、白術(shù)、防風(fēng)3味中藥組成，主治表虛衛(wèi)陽不固所致的體虛易感風(fēng)邪者，前兩味藥，以扶正為主，而防風(fēng)則以祛邪為主，它可以提升患兒的“正氣”以抵御外邪，補(bǔ)脾實(shí)衛(wèi)，益氣固表止汗，被稱為“中藥免疫調(diào)節(jié)劑”?，F(xiàn)代藥理研究證實(shí)：黃芪、白術(shù)能提高免疫球蛋白，促進(jìn)抗體產(chǎn)生，促進(jìn)體液免疫，對B淋巴細(xì)胞免疫功能具有明顯的增強(qiáng)作用且對多種細(xì)菌有抑制作用。防風(fēng)大分子多糖為水提液的主要成分，具有明顯增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用。

過敏煎是祝諶予名老中醫(yī)之驗(yàn)方，由銀柴胡、防風(fēng)、烏梅、五味子、甘草5味藥組成。該方具有御衛(wèi)固表、抗過敏的功效。銀柴胡、防風(fēng)發(fā)散表邪，祛風(fēng)解痙，烏梅、五味子收斂肺氣，止咳平喘，一散一收，調(diào)節(jié)肺氣，頗合肺的呼吸出入功能?，F(xiàn)代藥理研究證實(shí)：銀柴胡具有抗炎解熱作用，五味子能抑制肥大細(xì)胞脫顆粒，有拮抗炎性介質(zhì)，抗變態(tài)反應(yīng)，止咳祛痰作用。烏梅有增強(qiáng)機(jī)體免疫力，抗過敏作用，甘草能預(yù)防支氣管哮喘的發(fā)作。

補(bǔ)骨脂、女貞子、何首烏：滋補(bǔ)肝腎，強(qiáng)壯腰膝，納氣平喘。現(xiàn)代藥理研究證實(shí)：補(bǔ)骨脂能提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，提高機(jī)體非特異性免疫的能力。女貞子能增強(qiáng)免疫功能對炎癥有明顯的抑制作用。何首烏中提取的大黃酚，能促進(jìn)腸管的運(yùn)動，并能驟減神經(jīng)的時值，促使神經(jīng)興奮，增加肌肉時值，使肌肉麻痹，起到解痙作用。無論從藥物配伍還是從單味藥性上研究，固本止哮方都具有提高機(jī)體免疫力，參與免疫調(diào)節(jié)、抵抗變態(tài)反應(yīng)的作用，故可防治過敏性哮喘。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：（1）用藥灌胃預(yù)防后，大鼠引喘潛伏期均延長，且固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較均有意義。（2）大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸：固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較哮喘等級明顯降低。（3）在激發(fā)第4、7天，固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較3級哮喘發(fā)生率明顯減低。故通過對固本止哮方實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：固本止哮方具有延長大鼠引喘潛伏期，降低哮喘發(fā)生率及哮喘程度作用，能夠較好的防治幼齡大鼠哮喘。

［1］陳撅珠.實(shí)用內(nèi)科學(xué)［M］.11版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1556.

［2］Shimojo N，Kohno Y，Katsuki T，et al.Diminished interferon－gamma（IFN－gamma）production by bacterial antigen－specific T cells in atopic patients［J］.Clin Exp Immunol，1996，106（1）：62－66.