利用液質聯(lián)用儀快速確證中獸藥中的氟喹諾酮類藥物

曹 瑩，蔣 音

(上海市獸藥飼料檢測所，上海 201103)

隨著現代獸醫(yī)手段廣泛應用，化學藥品導致的耐藥性和藥物殘留問題，引起人們愈來愈多的關注。中藥因其具有天然性、無殘留性和無抗藥性在畜牧業(yè)規(guī)?；a中逐漸擴大應用。目前可在畜牧養(yǎng)殖過程中使用的中藥品種繁多，最新的2010年版《中國獸藥典》二部共收載了1114個品種，比2005年版《中國獸藥典》新增品種431個，為中獸藥的普及與應用打下了堅實的基礎。然而，中藥的作用機理與化藥截然不同，一般起效時間較長。同一藥材根據生長地域、生長季節(jié)、炮制方法的不同，其藥效可能會相差很大。某些廠家為提升中獸藥的“療效”，無視處方規(guī)定違規(guī)添加抗菌藥物，從而增加了食品安全風險。

2010年初，農業(yè)部組織開展中獸藥非法添加禁用藥物和其他藥物成分的檢測工作，對涉嫌添加非法藥物成分的止痢散等9種中獸藥散劑進行了呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、氯霉素、喹乙醇、乙酰甲喹等三類抗菌藥物的檢測。在檢測過程中，通過數據的比較分析，發(fā)現了中獸藥中添加氟喹諾酮類藥物，并及時建立了儀器鑒別方法，可有效確認中獸藥中是否添加了氟喹諾酮類藥物。

1 氟喹諾酮類藥物的檢出

在2010年針對中獸藥非法添加禁用藥物和其他藥物成分的專項檢測工作中，筆者使用液質聯(lián)用儀在編號為YC2010014的清瘟敗毒散中成功檢出乙酰甲喹，如圖1所示，上圖為樣品色譜圖，下圖為對照品色譜圖(喹乙醇Rt=4.39，乙酰甲喹 Rt=13.92)，但在7.39 min處明顯有一未知組分A存在。筆者又比對了另外兩個品牌的清瘟敗毒散(YC2010055、YC2010011)與清瘟敗毒片(YC2010024)的色譜圖(圖2、圖3)，在相同位置并無此色譜峰，但清瘟敗毒片在10.61 min有一未知組分B存在。通過二極管陣列檢測器的紫外全掃描圖比對，A、B組分的紫外圖譜(圖4)幾乎一致，可以認定為同類化合物，其紫外特征與氟喹諾酮類藥物一致。再通過質譜掃描比對(圖5)，A、B組分都有m/z為44的氟喹諾酮類藥物特征碎片，經確認A為環(huán)丙沙星，B為恩諾沙星，兩者的含量均為3%左右。

2 主要方法的建立

選用液質聯(lián)用方法可以對中獸藥中非法添加的氟喹諾酮類藥物進行快速確證，紫外全掃描圖可對化合物的類別進行區(qū)分，質譜全掃描圖可得出化合物的特征碎片，作為確證依據?；痉治隽鞒倘缦?。

2.1 儀器分析條件 選用液相色譜－質譜聯(lián)用儀(配置如Waters2695液相色譜+ZQ4000質譜檢測器+PDA996二極管陣列檢測器)，一次進樣可以采集紫外全掃描圖和總離子流掃描圖。色譜柱為質譜專用細徑柱，流動相選擇乙腈/甲酸溶液體系(甲酸溶液濃度控制在2%以下為宜;建議乙腈的體積比低于 15%)，流速控制在 0.2 ～0.3 mL/min。質譜條件方面主要是選擇ESI正離子模式，錐孔電壓控制在30～40 V，確保特征碎片出現，其余如電離電壓、氮氣流量均應根據儀器要求盡量優(yōu)化。

2.2 同類化合物數據收集比較 以氟喹諾酮類藥物為例，在發(fā)現恩諾沙星、環(huán)丙沙星的非法添加后，應及時對其他氟喹諾酮類藥物的信息在相同的色譜、質譜條件下進行收集比對(圖6、圖7)，以便快速確證。

如圖所示，可將紫外波長277～287 nm處的強吸收峰、325 nm附近兩個弱吸收峰、以及m/z為44的特征碎片作為氟喹諾酮類藥物的“鑒別點”。筆者使用上述流程對2009年的幾份不合格的中獸藥產品進行分析，在一份清熱散的樣品中檢出恩諾沙星。

3 討論

無論是中獸藥還是化藥，獸藥中組分的含量相對較高，通過二極管陣列檢測器可以在固定的色譜條件下得到各個特征組分的紫外全掃描圖，同類藥物的紫外全掃描圖整體形態(tài)不會有較大差異，完全可以作為未知添加藥物鑒別的“突破口”。另一方面，隨著串聯(lián)質譜儀的普及，單極質譜儀因其靈敏度和專屬性較差，在定量、定性檢測中逐漸被淘汰，但往往串聯(lián)質譜儀的離子對監(jiān)測(MRM)模式在常規(guī)檢測中僅針對設定的已知通道提供數據，難以收集其他組分的特征碎片信息，不適合未知添加藥物的定性鑒別。

本研究主要以定性為主，目的在于增加中獸藥質量控制手段，降低獸藥殘留風險，防止違禁藥物利用“中獸藥”、“天然提取物”、“綠色添加劑”等形式進入養(yǎng)殖環(huán)節(jié)。本文建立的檢測流程也同樣適合其他類別藥物的快速鑒別。