柴胡、竹葉柴胡對小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

楊輝，楊亮，蔣玲（1.貴陽市第一人民醫(yī)院，貴陽55000；.貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院，貴陽550001）

柴胡、竹葉柴胡對小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

楊輝1＊，楊亮2，蔣玲2（1.貴陽市第一人民醫(yī)院，貴陽550002；2.貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院，貴陽550001）

目的：研究柴胡、竹葉柴胡的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察受試樣品的抗炎作用；采用熱板法觀察受試樣品的鎮(zhèn)痛作用。結果：耳廓腫脹試驗中，在12g·kg－1劑量下，柴胡、竹葉柴胡可使模型小鼠耳腫脹度顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；熱板法鎮(zhèn)痛試驗中，在12g·kg－1劑量下，柴胡、竹葉柴胡可使小鼠的痛閾值顯著延長（P＜0.05）。結論：柴胡、竹葉柴胡均具抗炎與鎮(zhèn)痛作用。

柴胡；竹葉柴胡；抗炎；鎮(zhèn)痛

中藥柴胡在我國作為藥材已有兩千多年的歷史。2010年版《中國藥典》（一部）[1]收載柴胡來源為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡 B.scorzonerifolium Willd.的干燥根。據(jù)本課題組調(diào)查，貴州、四川等地的醫(yī)院、藥房柴胡使用混亂，大多處方開具柴胡，用的卻是竹葉柴胡。竹葉柴胡收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》[2]，來源為傘形科植物竹葉柴胡B.marginatum Wall.ex DC.與窄竹葉柴胡 B.marginatum Wall.ex DC.var.stenophyllum（Wolff.）Shan et Y.Li的干燥全草。竹葉柴胡抗炎、鎮(zhèn)痛作用未見有文獻報道。因此，本課題組對柴胡、竹葉柴胡抗炎、鎮(zhèn)痛的藥效作用進行初步研究，為臨床合理、規(guī)范使用柴胡提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

YLS-B6型智能熱板儀（安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司）；JA-2003型電子天平（上海越平科學儀器有限公司）。

1.2 試藥

柴胡（產(chǎn)地：四川，批號：20110301）、竹葉柴胡（產(chǎn)地：貴州，批號：20110101）均購于貴州濟仁堂中藥飲片廠；二甲苯（分析純，重慶茂業(yè)化學試劑有限公司，批號：20110822）；阿司匹林腸溶片（石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：110333）；醋酸潑尼松片（浙江仙琚制藥股份有限公司，批號：110531）。

1.3 動物

昆明種小鼠200只，♀♂兼半，體重18～22g，由貴陽醫(yī)學院實驗動物中心提供（動物合格證號：SCXK（黔）2002-0001）。

2 方法[3，4]

2.1 樣品制備

分別取柴胡、竹葉柴胡適量，加10倍水浸泡0.5h、煎煮0.5h，水煎煮3次，合并3次煎液，常壓濃縮至稠浸膏（密度1.15～1.20，60℃）。柴胡樣品呈棕褐色浸膏，每1g浸膏樣品相當于原生藥材6.061g；竹葉柴胡樣品呈棕黃色浸膏，每1g浸膏相當于原生藥材6.618g。給藥時以原生藥材計。

2.2 抗炎實驗

實驗分為8組，即模型（等容蒸餾水）、醋酸潑尼松（5mg·kg－1）和柴胡高、中、低劑量（12、6、3g·kg－1）組以及竹葉柴胡高、中、低劑量（12、6、3g·kg－1）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)5d。末次給藥后1h，取0.02mL二甲苯均勻涂于小鼠右側耳廓前后兩面，涂二甲苯后20min脫頸椎處死小鼠，剪下小鼠的兩耳，用打孔器在兩耳的同一部位打下直徑為6mm的耳片，分別于電子天平上稱重，并計算耳腫脹度：耳腫脹度＝右耳片重－左耳片重。

2.3 鎮(zhèn)痛實驗

取體重18～22g的♀昆明種小鼠，在熱板儀（溫度：55℃）上逐一進行篩選，記錄小鼠自放入熱板儀中至出現(xiàn)添后足反應所需時間為該小鼠的痛閾值，以痛閾值為5～30s的小鼠為合格小鼠，將痛閾值＜5s、＞30s與容易出現(xiàn)跳躍反應的小鼠剔除。取合格的小鼠80只，隨機分成8組，即對照（等容蒸餾水）、阿司匹林（0.15g·kg－1）和柴胡高、中、低劑量（12、6、3g·kg－1）組以及竹葉柴胡高、中、低劑量（12、6、3g·kg－1）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)5d。末次給藥后1h，將各組小鼠置于溫度為55℃的熱板儀上，觀察小鼠出現(xiàn)的舔后足反應，測定其痛閾值。

2.4 統(tǒng)計學方法

3 結果

3.1 抗炎實驗結果

與模型組比較，柴胡高劑量與竹葉柴胡高劑量組小鼠耳腫脹度顯著減輕（P＜0.01或P＜0.05）。柴胡、竹葉柴胡對模型小鼠耳腫脹度的影響見表1。

表1 柴胡、竹葉柴胡對模型小鼠耳腫脹度的影響（n＝10）Tab 1 Effect of B.chinenese and B.marginatum on ear edema of mice（n＝10）

3.2 鎮(zhèn)痛實驗結果

與對照組比較，柴胡高劑量與竹葉柴胡高劑量組小鼠痛閾值顯著升高（P＜0.05）。柴胡、竹葉柴胡對模型小鼠痛閾值的影響見表2。

表2 柴胡、竹葉柴胡對模型小鼠痛閾值的影響（n＝10）Tab 2Effect of B.chinense and B.marginatum on pain threshold of mice（n＝10）

4 討論

中醫(yī)認為柴胡具有疏肝退熱、舒肝解郁、升陽透疹的功效。藥理研究表明，柴胡的解熱、抗病原微生物、抗炎、促進免疫功能等作用是其和解表里功效的藥效學基礎；保肝、利膽、降血脂、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等是其疏肝解郁功效的體現(xiàn)；而其對內(nèi)臟平滑肌的作用可能與其升舉陽氣功效有關[5]。二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗和熱板法鎮(zhèn)痛實驗為抗炎、鎮(zhèn)痛的藥效學經(jīng)典實驗。本課題組采用這兩種方法觀察柴胡、竹葉柴胡的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。結果顯示，柴胡高劑量組與竹葉柴胡高劑量組小鼠的耳廓腫脹度較模型組顯著降低，柴胡高劑量組與竹葉柴胡高劑量組小鼠的痛閾值較對照組明顯延長，表明高劑量的柴胡、竹葉柴胡均有抗炎與鎮(zhèn)痛作用。同時實驗數(shù)據(jù)表明，柴胡、竹葉柴胡在抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果方面無顯著性差異，因此在用于抗炎、鎮(zhèn)痛時，柴胡、竹葉柴胡在一定程度上可相互代替。但由于柴胡、竹葉柴胡的抗炎、鎮(zhèn)痛機制尚不清楚，臨床使用時，柴胡、竹葉柴胡是否可以混用，有待進一步研究。

（本研究由貴陽中醫(yī)學院青年科研基金資助。）

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：263.

[2] 貴州省藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準[S].2003年版.貴陽：貴州科技出版社，2003：165.

[3] 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實驗方法學[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：911、886.

[4] 向海燕，侯連兵，黃嗣航，等.金剛藤分散片抗炎鎮(zhèn)痛作用的藥效學研究[J].中國藥房，2007，18（36）：2817.

[5] 趙中振，肖培根.當代藥用植物典（第一冊）[M].上海：上海世界圖書出版公司，2007：156.

Study on the Anti-inflammatory and Analgesic Activities of Bupleurum chinense and B.marginatum

YANG Hui（Guiyang Municipal First People’s Hospital，Guiyang 550002，China）
YANG Liang，JIANG Ling（The Second Affiliated Hospital of Guiyang TCM College，Guiyang 550001，China）

OBJECTIVE：To study anti-inflammatory and analgesic effects of Bupleurum chinense and B.marginatum.METHODS：Anti-inflammatory and analgesic effects were observed by means of dimethylbenzene induced mice ear edema model and hot plate method.RESULTS：In ear edema test，B.chinense and B.marginatum（12g·kg－1）could significantly inhibit the ear edema（P＜0.01or P＜0.05），and could significantly extend the pain threshold（P＜0.05）.CONCLUSION：Both B.chinense and B.marginatum have anti-inflammatory and analgesic action.

Bupleurm chinense；Bupleurm marginatum；Anti-inflammatory；Analgesia

R285；R97

A

1001-0408（2012）47-4442-03

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.47.10

2012-05-27）