鄭州市2006－2011年腹瀉病人沙門菌血清型和耐藥譜分析＊

沙門菌是一種重要的人獸共患病病原體，是引起人類感染性腹瀉和食物中毒的重要致病菌，其所致細(xì)菌性食物中毒爆發(fā)起數(shù)和發(fā)病人數(shù)多年來(lái)居我國(guó)首位［1］。沙門菌不僅感染人畜還會(huì)污染食品，其危害性日益受到人們重視。國(guó)內(nèi)外研究表明，全球沙門菌感染有上升趨勢(shì)［2－3］。為了解鄭州市感染性腹瀉沙門菌的血清型分布情況和耐藥性。我們收集2006－2011年腹瀉病監(jiān)測(cè)點(diǎn)感染性腹瀉病例標(biāo)本中分離出的196株沙門菌進(jìn)行結(jié)果分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本收集 收集鄭州市人民醫(yī)院，鄭州市中心醫(yī)院，鄭州市第三人民醫(yī)院，鄭州市第二人民醫(yī)院，鄭州市兒童醫(yī)院等5家腹瀉病監(jiān)測(cè)點(diǎn)感染性腹瀉病人，符合每日排便3次或3次以上，且大便呈稀便水樣便、粘液便或膿血便者作為采集對(duì)象。采集感染性腹瀉病人糞便標(biāo)本1～2g立即保存到Cary－Blair運(yùn)送培養(yǎng)基中，及時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 試劑 質(zhì)控菌株大腸埃希氏菌（ATCC25922）購(gòu)于中國(guó)生物制品檢定所；營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、SS瓊脂、麥康凱瓊脂、雙糖鐵瓊脂、MIU瓊脂、Mueller－Hinton瓊脂均購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；API20E為法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)；沙門菌多價(jià)O血清及多價(jià)H血清購(gòu)自泰國(guó)S＆A公司；藥敏紙片為英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品。

1.3 方 法

1.3.1 分離和鑒定 按《感染性腹瀉病原檢測(cè)技術(shù)》進(jìn)行；生化鑒定采用法國(guó)梅里埃API20E產(chǎn)品。

1.3.2 血清凝集試驗(yàn)

1.3.2.1 符合菌株接種于哥倫比亞瓊脂平板及軟瓊脂平板表面中央，36±1℃培養(yǎng)過(guò)夜，分別進(jìn)行O多價(jià)、O因子血清凝集和H相多價(jià)、H單價(jià)血清凝集。H1相凝集陽(yáng)性者，采用Swarm Agar瓊脂誘導(dǎo)H2相。

1.3.2.2 根據(jù) Kauffman－White沙門菌抗原表檢索和報(bào)告血清分型結(jié)果。

1.3.3 藥敏試驗(yàn) 采用 K－B紙片擴(kuò)散法，按照2007版美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）文件標(biāo)準(zhǔn)判定藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 用 WHONET5.4軟件對(duì)藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié) 果

2.1 血清群分布 2006－2011年從3 266份腹瀉病人糞便標(biāo)本中共分離出沙門菌株196份，主要分布于10個(gè)血清群，其中以B群為主，占33.67%，其次為D1群，占32.14%（表1）。

表1 鄭州市2006－2011年沙門氏菌血清群分布Tab.1 Distribution of Salmonellaserogroup in Zhengzhou City，2006－2011

2.2 血清型分布 196株沙門菌中共鑒定出36個(gè)血清型，其中9株未定型；以腸炎沙門菌為主，共檢出58株，占29.59%，其次為鼠傷寒沙門菌，檢出39株，占19.90%。湯卜遜沙門菌和德?tīng)柋吧抽T菌分別為6.63%和5.10%，阿貢納沙門菌和山夫登堡沙門氏菌為3.06%，其余血清型均為3.0%以下。

2.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，196株菌對(duì)12種抗生素都有不同程度的耐藥，其中對(duì)氨芐西林、萘啶酸、復(fù)方新諾明和四環(huán)素的耐藥率分別為44.90%、42.34%、34.18%和32.14%；對(duì)頭孢西丁、頭孢他定和頭孢噻肟輕度耐藥，耐藥率分別為0.51%、1.53%和6.12%（表3）。

3 討 論

沙門菌感染性腹瀉遍布全球，在我國(guó)感染性腹瀉中占據(jù)第3位。許多沙門菌可在人、動(dòng)物、食品和外環(huán)境之間相互傳播，導(dǎo)致人和動(dòng)物腹瀉。鄭州市2006－2011年自感染性腹瀉病例中分離的196株沙門菌菌株血清群和血清型分布與我國(guó)其他省份相關(guān)報(bào)道大致符合［5］，只是在優(yōu)勢(shì)血清型分布順序上略顯差別［2－4］。另外，我市分離的沙門菌株中除常見(jiàn)的腸炎、鼠傷寒、阿貢納、德?tīng)柋啊惗?、湯卜遜、豬霍亂、紐波特等沙門菌外，另有21個(gè)罕見(jiàn)血清型也在我市相繼出現(xiàn)，分別為諾里季、徹斯特、巴基斯坦、里地烏、巴布亞、貝塔、羅森、安德萊赫特、金斯敦、拉古什、田納西、?？笋R克斯、欽科、朗根薩爾查、阿木提夫、旺茲沃思、阿伯丁、科瓦利斯、舒卜拉、斯坦利和肯塔基沙門菌，該新菌型的檢出豐富了我市感染性腹瀉病原譜的構(gòu)成。

表2 196株沙門菌對(duì)12種抗生藥物耐藥性試驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Drug resistance results on 196strains of Salmonellastrains to 12antibiotics

從鄭州市2006－2011年感染性腹瀉病人所分離沙門菌主要菌型檢出率觀察到，2006年和2007年鼠傷寒沙門菌為鄭州市腹瀉病人的優(yōu)勢(shì)病原菌，而2008年、2009年和2010年腸炎沙門菌逐漸超過(guò)了鼠傷寒沙門菌，成為鄭州市腹瀉病人的優(yōu)勢(shì)病原菌。值得注意的是，鄭州市2011年的優(yōu)勢(shì)菌株為湯卜遜沙門菌。優(yōu)勢(shì)菌型的逐年變遷的流行病學(xué)意義需要進(jìn)一步監(jiān)測(cè)研究。

抗生素在臨床中的普遍使用，使沙門菌的耐藥及毒副作用問(wèn)題日益嚴(yán)重，可導(dǎo)致新生兒感染性腹瀉病死率升高。本研究藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)12種抗生素都有不同程度的耐藥，其中所有菌株耐藥集中在氨芐西林、萘啶酸、復(fù)方新諾明和四環(huán)素4種抗菌藥物，其中鼠傷寒沙門菌耐藥率最高，腸炎沙門菌，嬰兒沙門菌、德?tīng)柋吧抽T菌耐藥率有明顯上升趨勢(shì)，多重耐藥率也有不同程度的提高。監(jiān)測(cè)結(jié)果提示，臨床上應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)抗生素應(yīng)用管理，避免和減少選擇性壓力造成的耐藥性基因傳播。

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