水飛薊賓膠囊對急性腦梗死患者氧化應激水平和炎癥指標的影響

王利平 孫賢義

腦卒中在我國每年新增患者＞200萬，其中腦梗死約占60～80%［1］。由于腦組織對缺氧的耐受性最差，急性腦梗死后腦部血液循環(huán)障礙，造成腦組織急性缺氧，致使乳酸、自由基大量生成，進一步加重腦損害。因此，急性腦梗死后盡快改善腦部血液循環(huán)、糾正腦組織缺氧、保護半暗帶、維持神經(jīng)細胞存活和促進神經(jīng)生長是本病治療的關(guān)鍵［2］。

水飛薊賓是一種生物類黃酮，為單一化合物［3］，最初作為有效保肝藥物應用于臨床，隨后的研究發(fā)現(xiàn)，水飛薊賓在抗氧化、降血脂、保護心肌及抗血小板、糖尿病的治療等方面表現(xiàn)出一定的作用［4］。近年來，采用磷脂復合技術(shù)將水飛薊賓與磷脂制成復合物，從而顯著改善了水飛薊賓的生物利用度，這種復合物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用也開始受到重視。研究表明其抗炎、抗氧化特性有利于大腦梗死半暗帶神經(jīng)細胞的恢復；動物實驗結(jié)果顯示，該復合物對大腦中動脈栓塞引起的腦梗死有保護作用，能減輕黏附因子、炎癥介質(zhì)和氧化應激的產(chǎn)生［5］。因此可能成為臨床治療腦梗死的新藥物。目前國內(nèi)外尚無相關(guān)臨床研究文獻。本文率先報道水飛薊賓膠囊對75例急性腦梗死患者的治療效果，并探討其腦保護機制。

1 資料與方法

1.1 對象及分組

病例選自2009年7月～2011年7月在我院住院的男性急性腦梗死患者75例，年齡55～72歲，平均64±7歲。病例診斷依據(jù)1995年全國第四屆腦血管病學術(shù)會議制定的診斷標準［6］，全部患者均為急性期，首次發(fā)病，病程均在24h內(nèi)，CT排除腦出血、腦腫瘤以及由于腦腫瘤、血液病和房顫、心功能不全引起的腦卒中。全部患者均無免疫系統(tǒng)疾病，經(jīng)篩選除外高血壓、冠心病、糖尿病及肝、腎疾病患者。根據(jù)入院日期隨機分為常規(guī)治療組（33例）和水飛薊賓治療組（42例）。兩組患者年齡、性別、梗死部位、大小無顯著性差異（P＞0.05）。兩組均給予常規(guī)治療，4周為一療程，水飛薊賓治療組在此基礎(chǔ)上加服水飛薊賓膠囊。水飛薊賓膠囊購于湖南紳泰春藥業(yè)有限公司（國藥準字 H20040299）。用法：口服，70mg／次，3次／日，入院后即給予口服。兩組患者均連續(xù)治療4周。

1.2 血標本采集

所有患者均留取發(fā)病后治療第1天和治療第7天的靜脈血5ml，3 000r／min，離心5min，分離血清，置于－80℃冰箱保存待測。

1.3 臨床療效評判

對兩組患者分別于入院時和入院4周后以減分率進行臨床療效評定?；救簻p分率≥89%；顯效：≥46%；好轉(zhuǎn)：≥18%；無效：＜18%。前三種情況認定為有效，計算總有效率。神經(jīng)功能缺損的評定采用《卒中患者神經(jīng)功能缺損評分標準》（NIHSS）［7］，同時評判患者的認知障礙水平（MMSE）［8］和日常生活能力（Barthel指數(shù)）［9］。

1.4 氧化應激及炎癥指標檢測

氧化應激指標試劑盒購自南京建成生物工程研究所。采用黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛（MDA）含量。NO測定采用硝酸還原酶法，NO試劑盒由南京聚力生物醫(yī)學研究所提供。ET測定采用特異性放射免疫法，放免試制盒由北京東亞免疫技術(shù)研究所提供。檢測操作嚴格遵照說明書，由專人測定。

1.5 不良反應觀察

兩組分別于用藥前和用藥4周后檢查血、尿常規(guī)、肝腎功能、凝血功能、心電圖，監(jiān)測血壓，記錄各種與治療相關(guān)的不良反應。

1.6 統(tǒng)計學處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床治療效果比較

結(jié)果顯示水飛薊賓膠囊治療急性腦梗死4周后，臨床痊愈8例，顯效18例，好轉(zhuǎn)11例，總有效率88.09%；常規(guī)治療組臨床痊愈6例，顯效14例，好轉(zhuǎn)8例，總有效率84.85%；兩組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組臨床療效比較

2.2 兩組神經(jīng)功能改善情況

治療4周后，兩組患者神經(jīng)功能缺損水平、日常生活能力均較治療前顯著改善（P＜0.01），水飛薊賓治療組更優(yōu)于常規(guī)治療組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P＜0.01）；兩組患者認知功能障礙水平較治療前亦顯著改善（P＜0.05），但兩組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組治療前后神經(jīng)功能缺損水平、認知障礙水平、日常生活能力比較（s）

表2 兩組治療前后神經(jīng)功能缺損水平、認知障礙水平、日常生活能力比較（s）

注：與同組治療前比較，1）P＜0.05，2）P＜0.01；與常規(guī)治療組治療后比較，3）P＜0.05，4）P＜0.01

8.92±2.04 20.06±3.12 60.18±6.31（n＝33）治療后 5.76±2.432） 24.58±5.541） 69.27±12.442）水飛薊賓治療組 治療前 9.11±1.63 19.94±3.14 54.66±7.59（n＝42）治療后 3.83±2.612） 23.83±5.082） 73.52±13.242）4）指數(shù)常規(guī)治療組 治療前組別 觀察時間 NIHSS評分 MMSE評分 Barthel

2.3 兩組血清氧化應激水平的變化

兩組患者治療第1天，MDA含量及SOD活性無明顯差異（P＞0.05）；實施不同治療第7天，兩組MDA含量明顯下降，SOD活性明顯上升，與第1天比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；兩組間比較，水飛薊賓治療組血清氧化應激水平更低（P＜0.01）。見表3。

表3 治療第7天兩組患者血清MDA含量及SOD活性比較（s）

表3 治療第7天兩組患者血清MDA含量及SOD活性比較（s）

注：與同組第1天比較，1）P＜0.01；與常規(guī)治療組第7天比較，3）P＜0.01

組別 觀察時間 MDA（nmol／L）SOD（U／ml）18.89±4.61 82.04±20.44（n＝33）第7天 12.59±5.631） 99.69±17.931）水飛薊賓治療組 第1天 19.32±8.01 81.58±18.53（n＝42）第7天 9.21±4.771）2） 119.35±27.561）2）常規(guī)治療組 第1天

2.4 治療后兩組血清NO和ET水平的變化

從表4可以看出，兩組患者治療第1天血清NO和ET含量無明顯差異（P＞0.05）；治療第7天，所有患者的NO和ET水平均明顯下降（P＜0.05或P＜0.01），與常規(guī)治療組比較，無論是NO還是ET水平，水飛薊賓治療組均顯示出更快的下降趨勢（P＜0.01）。

表4 治療第7天兩組患者血清NO和ET水平的變化（s）

注：與同組第1天比較，1）P＜0.05，2）P＜0.01；與常規(guī)治療組第7天比較，3）P＜0.01

組別 觀察時間 NO（umol／L）ET（ng／L）60.87±16.72 93.41±18.55（n＝33）第7天 41.59±13.472） 82.85±17.421）水飛薊賓治療組 第1天 58.43±13.57 91.51±20.33（n＝42）第7天 28.48±11.412）3） 61.24±14.532）3）常規(guī)治療組 第1天

2.5 藥物不良反應

水飛薊賓治療組在使用過程中有兩例患者出現(xiàn)了輕微的惡心癥狀，在患者自愿的情況下繼續(xù)堅持服用，癥狀逐漸消失。其余患者均未出現(xiàn)不良反應。

3 討 論

腦血管病是危害人類生命和健康的常見病和多發(fā)病，具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高和復發(fā)率高等特點，是中老年人致死和致殘的主要疾病。腦梗死是腦血管病中的常見類型，其損傷機制復雜，除了興奮毒作用、自由基、鈣離子超載外，免疫炎癥反應以及氧化應激在其中的作用也得到肯定［10］。

基礎(chǔ)和臨床研究發(fā)現(xiàn)，缺血性腦損傷所伴發(fā)炎癥反應是由多種細胞因子及氧化應激介導的連鎖過程［11］。腦梗死后腦組織缺血缺氧和應激反應使ET增高，通過受體激活磷酸脂酶C產(chǎn)生三磷酸肌醇，引起鈣內(nèi)流所產(chǎn)生的自由基，遠遠超過機體的清除能力，加上細胞內(nèi)鈣超載、興奮性氨基酸細胞毒作用和酸中毒等一系列代謝影響，形成脂質(zhì)過氧化物，導致神經(jīng)細胞損傷。腦缺血時，NO表現(xiàn)出典型的“雙重性”，其有益方面在于擴張腦血管，調(diào)節(jié)腦血流，改善微循環(huán)及抗血小板聚集和黏附，有利于疾病的恢復；但過量的NO則以自由基的形式對神經(jīng)細胞產(chǎn)生毒性。因此，在腦梗死早期數(shù)分鐘內(nèi)產(chǎn)生的NO是有利的，但數(shù)小時后到數(shù)天內(nèi)產(chǎn)生的NO則對神經(jīng)有毒性［12］。

腦梗死時，腦血流被阻斷導致重要營養(yǎng)物質(zhì)和含氧量急速減少，ATP減少，Ca2＋進入細胞，使線粒體功能受損，并激活Ca2＋依賴性蛋白水解酶，將黃嘌呤脫氫酶水解為黃嘌呤氧化酶［13］；同時，腦微血管系統(tǒng)中存在的谷胱甘肽－谷胱甘肽還原酶自由基清除系統(tǒng)功能下降，SOD活性降低，對自由基的清除能力減弱。過量的自由基能夠氧化細胞膜和基底膜上的不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化，使細胞膜的液態(tài)性、流動性改變，損傷血管內(nèi)皮細胞和基底膜；并使膠原纖維的膠原蛋白交聯(lián)，透明質(zhì)酸降解，引起細胞外基質(zhì)疏松，彈性下降，破壞血腦屏障的完整性［14］。向腦內(nèi)注射或向腦表面灌注自由基生成劑都可以增加血腦屏障的通透性；而自由基清除劑，如SOD與一些合成的自由基清除劑等均能減輕腦梗死再灌注后血腦屏障的損害。

水飛薊賓是從菊科藥用植物水飛薊種子的種皮中提取的一種黃酮木脂素類化合物，是2－苯基色滿酮的衍生物，屬雙氫黃酮類，其具有穩(wěn)定肝細胞膜、保護肝細胞酶系統(tǒng)、清除氧自由基、降低炎癥反應、降低血脂等多方面作用［4］，但其水溶性較低而難以發(fā)揮作用。近年來對水飛薊賓的研究逐步深入，較多研究者認為可通過制備磷脂復合物來提高其生物利用度。水飛薊賓卵磷脂復合物在清除氧自由基、減輕組織的缺血再灌注損傷、調(diào)節(jié)免疫、抗凋亡等多方面均有良好效果［14］。

本研究結(jié)果證實，水飛薊賓卵磷脂復合物確實能通過下調(diào)炎癥因子表達、降低氧化應激等多種途徑改善腦梗死。對患者神經(jīng)功能的恢復、認知功能的改善、生活自理能力的提高均顯示出了較好的療效。急性腦梗死患者服藥7天即能顯著下調(diào)炎癥因子表達，明顯降低氧化應激水平。提示早期使用水飛薊賓膠囊對腦梗死患者具有重要的治療意義。

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