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    金鈴子散及單味藥鎮(zhèn)痛抗炎作用的比較*

    2012-10-22 09:18:58曹麗娟王雙華
    天津藥學(xué) 2012年1期
    關(guān)鍵詞:散組金鈴子單味

    曹麗娟 ,韓 超,王雙華

    (天津市中藥飲片廠有限公司,天津 300110)

    金鈴子散方出自金元四大家之一、寒涼派代表劉完素的《素問病機(jī)氣宜保命集》,由延胡索、川楝子(金鈴子)兩味藥組成,以川楝子清熱行氣,泄氣分之熱而止痛;延胡索活血行氣,行血分之滯而止痛。服本方可使肝郁解而熱自清,氣血行而疼痛止,為治療肝郁化火諸痛證的代表方劑。金鈴子散臨床上廣泛用于腸胃疾病的治療,對(duì)慢性胃炎、消化性潰瘍、功能性消化不良、胃癌等病癥均有較好療效,目前主要是取其止痛之用,延胡索與川楝子配伍后可起到協(xié)同增效作用[1]。本研究旨在觀察并比較金鈴子散及其單味藥對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛、抗炎作用的影響。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠150只,體重(20±2)g,雌性100只,雄性50只,由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):SCXK(津)2009-0001。根據(jù)實(shí)驗(yàn)和性別分籠喂養(yǎng),自由進(jìn)食飲水。

    1.2 主要儀器 HH-S型水浴鍋(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司);電子天平(天津市天馬公司)。

    1.3 試劑與藥材 阿司匹林(廣東百澳藥業(yè)有限公司,批號(hào)20070501);生理鹽水(山東華魯制藥有限公司,批號(hào)0100530);米醋;延胡索(產(chǎn)地浙江,購于中新藥業(yè)集團(tuán)藥材分公司;經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室馬琳教授鑒定)。川楝子(產(chǎn)自四川,購于天津市中藥飲片廠,批號(hào)1001084;經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室馬琳教授鑒定)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

    2.1 藥物炮制 醋炙延胡索:取凈延胡索適量,加20%米醋拌勻,稍悶,待米醋被吸盡后,置炒制容器內(nèi)文火炒干,取出。炒制川楝子:取凈川楝子適量,置容器內(nèi)炒制,用中火加熱,炒至表面黃色,取出。

    2.2 藥液制備

    2.2.1 醋延胡索溶液的制備 稱取醋延胡索適量,加10倍量水煎煮兩次,每次1 h,水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

    2.2.2 炒川楝子溶液的制備 稱取炒川楝子適量,加10倍量水煎煮兩次,每次1 h,水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

    2.2.3 金鈴子散溶液的制備 稱取醋延胡索及炒川楝子按1∶1混合均勻,加10倍量水煎煮兩次,每次1 h,水煎液過濾后濃縮至1 g/ml備用。

    2.3 給藥劑量 根據(jù)金鈴子散的藥效預(yù)試驗(yàn),確定動(dòng)物給藥劑量為20 g/kg生藥量。醋延胡索和炒川楝子分別按金鈴子散中同等劑量給藥。

    2.4 鎮(zhèn)痛作用

    2.4.1 熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng) 取昆明種小鼠50只,體重18~22 g,雌性,隨機(jī)分為5組,每組10只,即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組。生理鹽水給生理鹽水20 ml/kg,阿司匹林組給阿司匹林,給藥量0.1 g/kg,各給藥組分別按20 g/kg灌胃給藥。將恒溫水浴鍋調(diào)節(jié)至55℃,熱板預(yù)熱10 min,熱板法測(cè)定各組小鼠的正常痛反應(yīng)(舔后足,踢后腿或跳躍)時(shí)間,共測(cè)2次,每次間隔5 min,將兩次痛閾的平均值作為該鼠給藥前的痛閾值。不足15 s舔足或超過60 s未舔足者棄之不用。各組最后一次給藥后0.5 h開始測(cè)定小鼠痛閾值,每隔0.5 h測(cè)定一次,共4次,與給藥前和對(duì)照組比較。若小鼠在熱板上60 s仍無痛覺,立即取出,按60 s計(jì)算。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較,對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)具有顯著性差異,單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異,且金鈴子散組中痛閾值比單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表1。

    表1 金鈴子散及各單味藥對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)影響(±s,n=10)

    表1 金鈴子散及各單味藥對(duì)熱傳導(dǎo)引起擬痛反應(yīng)影響(±s,n=10)

    與生理鹽水組比較,*P ﹤0.05,P ﹤0.01;與金鈴子散組比較,△P ﹤0.05,△△P ﹤0.01

    給藥后痛閾值(s)2 h生理鹽水組 - 25.02±3.35 22.61±5.59 24.73±4.77 26.71±組別 劑量(g/kg)給藥前痛閾值(s)給藥后0.5 h 給藥后1 h 給藥后1.5 h 給藥后6.36 31.15 ±7.13阿司匹林組 0.1 22.14 ±3.29 48.78 ±7.75** 48.85 ±8.60** 45.02 ±11.69** 55.31 ±4.64**醋延胡索組 20 23.37 ±4.68 38.18 ±10.14**△ 35.75 ±9.77**△△ 43.66 ±12.30** 43.54 ±9.83**△炒川楝子組 20 26.47 ±5.11 33.01 ±12.14*△ 32.95 ±11.17*△ 35.79 ±11.27*△ 40.68 ±11.06*△金鈴子散組 20 26.85±7.60 48.26±11.11** 50.54±8.34** 49.20±7.98** 52.78 ±8.63**

    2.4.2 化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng) 取昆明種小鼠50只,體重18~22 g,雌雄各半,隨機(jī)分為5組,每組10只,即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組,編號(hào),稱重,灌胃給藥,1次/d,連續(xù)給藥4 d,生理鹽水組給生理鹽水20 ml/kg,阿司匹林組給阿司匹林,給藥量0.1 g/kg,給藥組按20 g/kg灌胃給藥。給藥后1 h,各鼠腹腔注射1%醋酸溶液0.2 ml,觀察注射后5~15 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)(腹部?jī)蓚?cè)收縮內(nèi)陷、腹壁下貼、臀部抬高或后肢伸展,即扭體反應(yīng)),計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。鎮(zhèn)痛率(%)=(生理鹽水組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù))/生理鹽水組平均扭體次數(shù)×100%。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較,對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)具有顯著性差異,單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異,且金鈴子散組中鎮(zhèn)痛率較單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表2。

    2.5 抗炎作用 取昆明種小鼠50只,體重18~22 g,雌雄各半,隨機(jī)分為5組,每組10只,即生理鹽水組、阿司匹林組、醋延胡索組、炒川楝子組和金鈴子散組,編號(hào),稱重,灌胃給藥,1次/d,連續(xù)給藥4 d,生理鹽水組給生理鹽水20 ml/kg,阿司匹林組給阿司匹林,給藥量0.1 g/kg,給藥組按20 g/kg灌胃給藥。給藥后1.5 h,將二甲苯0.05 m l均勻涂于小鼠右耳,30 min后處死,用7 mm打孔器分別打下左右耳片,以左右耳重量之差作為腫脹度,計(jì)算腫脹抑制率,腫脹抑制率(%)=(對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對(duì)照組平均腫脹度×100%。結(jié)果表明單味藥組、金鈴子散組與生理鹽水組比較,對(duì)二甲苯致小鼠耳腫腫脹抑制具有顯著性差異,單味藥組與金鈴子散組也具有顯著性差異,且金鈴子散組中腫脹抑制率較單味藥組呈增高趨勢(shì)。見表3。

    表2 金鈴子散及各單味藥對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)的影響(±s,n=10)

    表2 金鈴子散及各單味藥對(duì)化學(xué)刺激引起擬痛反應(yīng)的影響(±s,n=10)

    與生理鹽水組比較,*P﹤0.05,**P﹤0.01;與金鈴子散組比較,△P ﹤0.05,△△P ﹤0.01

    組別 劑量(g/kg) 10 min內(nèi)扭體次數(shù) 鎮(zhèn)痛率(%)26.20 ±6.34 -阿司匹林組 0.1 2.90±3.25** 88.93醋延胡索組 20 13.00±6.32**△△ 50.38炒川楝子組 20 16.70±8.14**△△ 36.26金鈴子散組 20 6.10 ±2.60**76.72生理鹽水組 -

    表3 金鈴子散及各單味藥對(duì)二甲苯致小鼠耳腫的影響(±s,n=10)

    表3 金鈴子散及各單味藥對(duì)二甲苯致小鼠耳腫的影響(±s,n=10)

    與生理鹽水組比較,*P﹤0.05,**P﹤0.01;與金鈴子散組比較,△P ﹤0.05,△△P ﹤0.01

    組別 劑量(g/kg) 耳腫脹度(mg) 腫脹抑制率(%)61.96 16.7 ±3.25 -阿司匹林組 0.1 3.52±1.80** 79.01醋延胡索組 20 8.11±2.54** 51.64△炒川楝子組 20 10.76±5.69** 35.84△△金鈴子散組 20 6.38 ±3.14**生理鹽水組 -

    3 討論

    3.1 金鈴子散臨床用于治療胸、脅、脘腹疼痛,經(jīng)閉痛經(jīng),產(chǎn)后瘀阻,跌打腫痛等。關(guān)于其方藥組成意義,歷來有很多分析與闡述。李時(shí)珍曾高度評(píng)價(jià)該方:“用之中的,妙不可言,方雖小制,配合存神,卻有取效之功,勿以淡而忽之。”川楝子苦寒,有小毒,泄氣分之熱,理氣止痛;延胡索氣味辛溫,無毒,行血?dú)庵疁?。二藥相配,一寒一溫,一氣一血,合用后能氣行血暢,疼痛自止。?shí)驗(yàn)結(jié)果也表明金鈴子散藥效明顯優(yōu)于單味藥的鎮(zhèn)痛抗炎效果。延胡索中主要成分為生物堿,主要為叔胺與季胺類生物堿,具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、降壓和抗心率失常作用。有研究表明,川楝子中某些化學(xué)成分對(duì)延胡索中生物堿的溶出率可能具有一定的促進(jìn)作用,延胡索與川楝子中的一些化學(xué)成分所發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)對(duì)延胡索中所含生物堿的成分有一定的影響[1],大量的臨床檢驗(yàn)及觀察發(fā)現(xiàn),金鈴子散在理氣止痛方面的藥效較單味藥顯著,這可能就是由于上述因素造成的,這在中醫(yī)方劑配伍理論中解釋為協(xié)同增效作用,其原理有待于進(jìn)一步的藥理實(shí)驗(yàn)研究。

    3.2 現(xiàn)代金鈴子散臨床應(yīng)用多為炮制品,清代《藥品辨義》中敘述“用醋炒治產(chǎn)后血暈,暴血上沖,胸膈胃氣痛,小腹肝氣痛;酒炒行血,主女人月候不調(diào),崩中淋瘕,產(chǎn)后惡露;生用破血,炒用調(diào)血,凡血凝滯者,悉可治之”?,F(xiàn)代研究表明,延胡索止痛的有效成分為生物堿,其中延胡索甲素、乙素和丑素均有明顯的止痛作用,尤以乙素的作用最強(qiáng)。醋炙能使延胡索中游離生物堿與醋酸結(jié)合,生成易溶于水的醋酸鹽,在煎劑中易于煎出[2],與先賢所云“醋制注肝而止痛”之炮制理論吻合。李東垣認(rèn)為川楝子“主下部腹痛,心暴痛”,現(xiàn)代資料報(bào)道,川楝子炒后毒性降低,緩和苦寒之性,以免損傷胃氣,增強(qiáng)行氣止痛功能。川楝子的毒性成分可能為毒性蛋白,加熱后可能使毒性蛋白變性[3]。由此可以推測(cè),兩者合用可能具有增效減毒的作用,其原理尚需進(jìn)一步的研究。

    1 劉生肸,劉喜平,董鈺明.延胡索與川楝子配伍中總生物堿含量的研究.中醫(yī)兒科雜志,2006,2(5):42

    2 葉定江.中藥炮制學(xué).上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1996:164

    3 成都中醫(yī)學(xué)院主編.中藥炮制學(xué).上海:上海科技出版社,1980:44

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