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    胃乃安膠囊對乙醇致小鼠胃黏膜損傷的保護作用及機制

    2012-09-19 09:28:34郭雙雁陶麗君馬麗娟白曉萍錢小華徐國萍
    大理大學學報 2012年9期
    關鍵詞:灌胃低劑量乙醇

    張 磊,郭雙雁,陶麗君,馬麗娟,白曉萍,錢小華,徐國萍*

    (大理學院基礎醫(yī)學院,云南大理 671000)

    飲酒是人生不可避免的,遇到高興的事更喜歡多喝幾杯。但酒不僅能興奮人的神經,給人帶來快樂的滿足,一旦過量就會對人體有損害,胃腸道的損害首當其沖。早在19世紀,Beaumont就發(fā)現(xiàn),過度飲酒后,胃黏膜出現(xiàn)明顯的病變,包括充血、糜爛及滲出。此后的大量研究也發(fā)現(xiàn),短期攝入大量酒精可引起胃黏膜的損傷〔1-2〕。動物實驗也證實,當乙醇超過一定濃度時可引起胃黏膜的損傷,引起損傷的最低濃度隨實驗方法和使用的動物種類的不同而不同〔3〕。目前研究表明,胃黏膜損傷的產生與胃黏膜自身保護作用的減弱或相對減弱,即與胃黏膜攻擊性因素及保護/防御性因素失衡密切相關〔4〕。國內學者于20世紀80年代中期開始了中藥保護胃黏膜的研究〔5-6〕,其中胃乃安對胃黏膜的損傷有一定保護作用,但其作用機制不清。本實驗旨在通過體內觀察胃乃安對乙醇致小鼠胃黏膜損傷的影響,分析及探討其作用機制,為臨床上應用胃乃安中藥類藥物治療胃黏膜損傷提供理論依據(jù)和實驗基礎。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 藥物與試劑 胃乃安膠囊(廣州中一藥業(yè)有限公司,批準文號:國藥準Z44020043),0.9%生理鹽水,無水乙醇,10%甲醛。

    1.1.2 動物 20只雄性健康小鼠,體重(30±5)g(大理學院動物實驗中心提供)。

    1.2 方法

    1.2.1 實驗分組 選用體重(30±5)g、雄性小鼠20只,隨機分為四個組,每組5只。正常對照組、模型組、胃乃安低劑量( 0.3 g/kg)組( W1組)、胃乃安高劑量( 1.5 g/kg)組( W2組)。 W1組、W2組以胃乃安0.3 mL/只灌胃,正常組和模型組則給予等量0.9%生理鹽水0.3 mL/只灌胃,每天1次,連續(xù)25 d,常規(guī)飼養(yǎng)。

    1.2.2 小鼠急性胃黏膜損傷模型建立 將前述分組小鼠在建立損傷模型前禁食24 h,不禁水,末次給藥后1 h,模型組、W1組、W2組給予無水乙醇(0.3 mL/只)灌胃,對照組以等量0.9%生理鹽水(0.3 mL/只)灌胃,1 h后頸椎脫臼法處死,剖腹,將胃的賁門及幽門結扎后取出,并向胃內注入10%甲醛溶液3 mL,然后取胃置于同濃度甲醛溶液中固定20 min。

    將已固定的胃沿胃大彎剪開,用生理鹽水沖洗胃內殘留物后將胃粘膜展開,觀察胃粘膜改變、拍照并按Guth記分〔7〕全胃各病灶長度之和為損傷指數(shù),病灶長度<1 mm為1分;1.0~1.9 mm為2分,依次類推,病灶寬度>2 mm則將其計數(shù)加倍。損傷抑制率=(模型對照組損傷指數(shù)-用藥組損傷指數(shù))/模型對照組損傷指數(shù)×100%。

    在病變明顯部位取材,常規(guī)固定脫水,石蠟包埋,4 um厚度連續(xù)切片,HE染色制成病理切片于顯微鏡下觀察。

    2 結果

    2.1 小鼠胃黏膜損傷指數(shù)測定

    表1 各組小鼠胃黏膜損傷指數(shù)及抑制率表

    2.1.2 各實驗組小鼠胃黏膜損傷指數(shù)比較 見圖1。

    圖1 各組小鼠胃粘膜損傷指數(shù)比較

    2.2 形態(tài)學觀察 與正常對照組比較,見圖2。模型組的胃黏膜重度充血、水腫,表面有較多灰黃色分泌物,可見散在糜爛和小灶性出血;低劑量組的胃黏膜中度出血、水腫,表面有灰黃色分泌物,可見散在出血點;高劑量組胃黏膜輕度出血、水腫,偶見出血。

    圖2 各實驗組小鼠胃黏膜形態(tài)學觀察

    2.3 組織病理學觀察 與正常對照組比較,見圖3。模型組胃黏膜淺層嚴重糜爛、出血,大量炎細胞浸潤,黏膜固有層內腺體明顯破壞;胃乃安低劑量組表層黏膜中度糜爛,腺體破壞,淺層出血,有炎細胞浸潤;胃乃安高劑量組鏡下可見黏膜輕度糜爛,有少量炎細胞浸潤,腺體完整。

    圖3 各實驗組小鼠胃黏膜組織病理觀察

    3 討論

    酒精性胃黏膜損傷是經口攝入乙醇,可直接損害胃黏膜上皮被覆的脂蛋白層,使胃黏膜屏障受損,加上胃液中氫離子回滲入黏膜上皮細胞,導致組胺、5-羥色胺和肝素釋放,引起黏膜下動脈短路,毛細血管壓力升高與通透性增加,最終出現(xiàn)黏膜充血、紅細胞滲出、胃黏膜糜爛出血,甚至淺表性潰瘍。

    胃乃安膠囊由五味藥物組成,含有人參、黃芪、田七、人工牛黃及珍珠層粉。珍珠層粉〔8〕可以消除精神緊張,通過鎮(zhèn)靜安神的作用可以解除胃和十二指腸潰瘍的心理精神病根。另外,珍珠層粉含有豐富的CaCO3,可中和部分胃酸,加之所含的殼角蛋白不易被胃酶、胰酶消化,故可在潰瘍處形成黏膜保護層,促使纖維母細胞增殖,從而修復潰瘍。研究表明,胃乃安膠囊不僅能縮小無水乙醇致胃黏膜損傷的潰瘍程度,而且對胃黏膜具有一定的保護作用,在臨床上有一定的應用前景〔9-12〕。

    本實驗研究發(fā)現(xiàn),對小鼠進行胃乃安灌胃造模后,胃乃安組乙醇致小鼠胃黏膜損傷程度明顯輕于模型組,并且胃乃安高劑量組的小鼠胃黏膜損傷程度明顯輕于低劑量組。本實驗說明胃乃安可能降低了小鼠胃液中游離酸和總酸含量,起到了抗?jié)儽Wo胃黏膜的作用。

    〔1〕Gottfried EB,Korsten MA,Lieber CS.Alchol-induced gastric and duodenal lesions In man〔J〕.Am J Gastroenterol,1978,70( 6):587-592.

    〔2〕Loren L,Wilfield MW.Histology of alcoholic Hemorrhagic"gastritis":Aprospective evaluation〔J〕.Gastroenterology,1988,94( 6):1254-1262.

    〔3〕Falalyeyeva TM,Samonina GE,Beregovaya TV,et al.Effect of glyprolines PGP,GP,and PG on homeostasis of gastric mucosa in rats with experimental ethanol-induced gastric ulcers〔J〕.Bull Exp Biol Med.2010,149( 6) :699-701.

    〔4〕陳韶華,厲有名.酒精性胃粘膜損傷的研究進展〔J〕.國際消化病雜志,2006,26( 4):249-250.

    〔5〕沈鷹.中醫(yī)藥保護胃黏膜研究進展〔J〕.安徽中醫(yī)學院學報,2001,20( 6):86-88.

    〔6〕楊建宏.柴胡疏肝散加減治療膽汁返流性胃炎80例療效觀察〔J〕.大理學院學報,2007,7( S1): 183-183.

    〔7〕Guth PH,Aures D,Paulson G,et al.Topical aspirin plus HCl gastric lesions in the rat〔J〕.Gastroenterology,1979,76( 1):88-93.

    〔8〕李端,徐翔,吳佩君,等.水解珍珠層粉在小鼠體內的抗氧化作用〔J〕.中成藥,1996,18( 12):30-31.

    〔9〕倪依東,劉友章,張惠臣.胃乃安膠囊治療胃脘痛的臨床研究〔J〕.中藥新藥與臨床藥理,2002,13( 6):353-355.

    〔10〕郭秋平,雷夏凌,賴曉明,等.胃乃安膠囊對乙醇致胃黏膜損傷及醉酒試驗的影響〔J〕.遼寧中醫(yī)藥大學學報,2011,13( 7):228-230.

    〔11〕章偉,王維泓,周慶陶.胃乃安膠囊聯(lián)合柳氮磺胺吡啶片治療潰瘍性結腸炎76例臨床觀察〔J〕.臨床軍醫(yī)雜志,2011,39( 6):1212-1213.

    〔12〕孫維真,孫維斌.胃乃安膠囊、雷尼替丁聯(lián)用治療消化性潰瘍的臨床研究(附51例觀察)〔J〕.福建醫(yī)藥雜志,2005,27( 2):69-70.

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