低溫脅迫對(duì)觀光木幼苗離體葉片生理特性的影響

林寧 謝安德 王凌暉 潘啟龍 秦武明 唐春紅

摘要：以一年生盆栽觀光木幼苗為材料，研究了低溫脅迫（１２、８、４、０ ℃）下幼苗葉片有關(guān)的生理生化指標(biāo)變化及其與抗寒性的關(guān)系。結(jié)果表明，低溫對(duì)觀光木葉片的相對(duì)電導(dǎo)率、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、脯氨酸和可溶性糖含量的影響均達(dá)到極顯著水平。隨溫度的降低，觀光木葉片的相對(duì)電導(dǎo)率、脯氨酸和可溶性糖含量不斷升高；丙二醛含量呈先上升后略下降的變化趨勢(shì)，但總體高于對(duì)照（２５ ℃）的含量；超氧化物歧化酶活性也不斷升高，且在０ ℃時(shí)達(dá)到最大值，為對(duì)照的４．４３倍。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，低溫與相對(duì)電導(dǎo)率、可溶性糖含量的相關(guān)系數(shù)均達(dá)０．８９４以上，呈顯著的負(fù)相關(guān)，但低溫與丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、脯氨酸含量的相關(guān)性不顯著。

關(guān)鍵詞：觀光木；葉片；低溫脅迫；生理特性

中圖分類號(hào)：Ｑ９４９．７４７．１；Ｑ９４８．１１２＋．２；Ｑ９４６ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０12）16－3524-04

Effects of Low-Temperature Stress on Physiological Characteristics of In VitroTsoongiodendron odorum Seedlings Leaves

ＬＩＮ Ｎｉｎｇ１，ＸＩＥ Ａｎ－ｄｅ２，ＷＡＮＧ Ｌｉｎｇ－ｈｕｉ２，ＰＡＮ Ｑｉ－ｌｏｎｇ２，ＱＩＮ Ｗｕ－ｍｉｎｇ２，ＴＡＮＧ Ｃｈｕｎ－ｈｏｎｇ２

（１． Ｌｉｕｗａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｅｓｔ Ｆａｒｍ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｚｈｕａｎｇ Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎ，Ｙｕｌｉｎ ５３７８００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；

２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ， Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｃｏｌｄ－ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｌｅａｖｅｓ ｕｎｄｅｒ ｃｏｌｄ ｓｔｒｅｓｓ（１２， ８， ４， ０ ℃） ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｕｓｉｎｇ ｏｎｅ－ｙｅａｒ－ｏｌｄ ｐｏｔ Ｔｓｏｏｎｇｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｏｄｏｒｕｍ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｏｗ－ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ （ＲＥＣ）， ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ （ＭＤＡ） ｃｏｎｔｅｎｔ， ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ （ＳＯＤ） ａｃｔｉｖｉｔｙ， ｐｒｏｌｉｎｅ （Ｐｒｏ） ａｎｄ ｓｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｔ． ｏｄｏｒｕｍ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ． Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｔｈｅ ＲＥＣ， Ｐｒｏ ａｎｄ sｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ； ｔｈｅ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆｉｒｓｔｌｙ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｌｉｇｈｔｌｙ， ｂｕｔ ｇｅｎｅｒａｌｌｙ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ（２５ ℃）； ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＳＯＤ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙ ａｎｄ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｈｅ ｐｅａｋ（４．４３ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ） ａｔ ０ ℃． Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｏｗ－ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ＲＥＣ， sｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｎｅｇａｔｉｖｅ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｗａｓ ａｂｏｖｅ ０．８９４． Ｈｏｗｅｖｅｒ， ｔｈｅ ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｏｗ－ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ， ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ， Ｐｒｏ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｔｓｏｏｎｇｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｏｄｏｒｕｍ Ｃｈｕｎ．； ｌｅａｖｅｓ； ｌｏｗ－ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｓｔｒｅｓｓ； ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ

觀光木（Ｔｓｏｏｎｇｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｏｄｏｒｕｍ Ｃｈｕｎ．）又名香花木、香木楠、宿軸木蘭，為木蘭科（Ｍａｇｎｏｌｉａｃｅａｅ）觀光木屬（Ｔｓｏｏｎｇｉｏｄｅｎｄｒｏｎ Ｃｈｕｎ）多年生常綠喬木，是中國(guó)特有的植物，廣泛分布于福建、廣東、海南、廣西等?。ㄗ灾螀^(qū)）以及云南省東南部、江西省南部等地區(qū)［１］。觀光木以其良好的速生性與豐產(chǎn)性而成為亞熱帶地區(qū)極有發(fā)展前途的速生用材樹種［２］，而且樹冠濃密、株型優(yōu)美、花朵漂亮、香氣襲人，是城市園林綠化及景觀建設(shè)中具有較高觀賞價(jià)值的優(yōu)良樹種；并且樹干挺直、木材輕軟、結(jié)構(gòu)細(xì)、開裂少、易加工，是家俱、樂器和膠合板生產(chǎn)等工業(yè)領(lǐng)域的良好用材；在精細(xì)化工方面還可提取香料；同時(shí)，由于觀光木是中國(guó)特有的古老孑遺樹種，對(duì)研究古代植物區(qū)系、古地理、古氣候都有重要的科學(xué)價(jià)值；此外，該種為木蘭科的單種屬植物，目前多呈零星分布，數(shù)量極少，加上其種子易喪失發(fā)芽能力，更新困難，隨著森林的破壞及亂砍濫伐現(xiàn)象的加劇，若不采取有效措施加以保護(hù)，有滅絕的危險(xiǎn)，現(xiàn)在已處于瀕危狀態(tài)，被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物［３］。溫度作為重要的環(huán)境因子之一，對(duì)植物的地域分布和生長(zhǎng)發(fā)育等方面起著重要的作用。低溫能影響植物的生長(zhǎng)代謝，引起相關(guān)生理指標(biāo)的變化。一般認(rèn)為，脯氨酸（Ｐｒｏｌｉｎｅ，Ｐｒｏ）和可溶性糖（Ｓｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ）是植物重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和防脫水劑，與植物的抗逆性密切相關(guān)。其含量的增加有利于提高植物的抗寒性能［４］。目前有關(guān)對(duì)觀光木的抗寒性研究較少，僅李剛等［５］、方小平等［６］分別對(duì)南京市和貴州省的觀光木幼苗的半致死溫度（Ｓｅｍｉｌｅｔｈａｌ ｔｅｍｐｅｒａ－ｔｕｒｅ，ＬＴ５０）、丙二醛（Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量或超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ dｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）活性進(jìn)行了探討，尚未見對(duì)兩廣地區(qū)的觀光木以及結(jié)合滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)如脯氨酸、可溶性糖的含量等生理指標(biāo)進(jìn)行過(guò)研究。為此，試驗(yàn)以南寧市的鄉(xiāng)土樹種觀光木幼苗離體枝條上的葉片為材料，研究其在低溫脅迫下的細(xì)胞膜透性（Ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ）、ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性以及其他滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量等生理生化指標(biāo)的變化規(guī)律，探索其抗寒機(jī)理及抗寒能力，以期為觀光木的遷地保護(hù)、栽培和引種馴化等方面提供一定的技術(shù)依據(jù)。

１材料與方法

１．１材料及處理

試驗(yàn)于廣西大學(xué)林學(xué)院苗圃教學(xué)實(shí)習(xí)基地和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。２０１０年３月２２日將園土和腐殖土按３∶１（體積比）充分混合后，裝入規(guī)格為１５ ｃｍ （直徑）×２０ ｃｍ（高） 的花盆中，選用一年生觀光木實(shí)生苗進(jìn)行栽植，每盆１株。９月２０日，在苗高約３５ ｃｍ時(shí)，隨機(jī)采集長(zhǎng)勢(shì)良好、無(wú)病蟲害的幼苗枝條，裝入密封保鮮袋中帶回實(shí)驗(yàn)室。先用去離子水洗凈枝條和葉片表面的污物，吸水紙吸干水分，然后放入預(yù)先設(shè)置為２５ ℃的人工氣候箱中進(jìn)行低溫處理。溫度分別設(shè)置為２５（ＣＫ）、１２、８、４、０ ℃共５個(gè)不同梯度的處理，每個(gè)處理設(shè)６個(gè)重復(fù)；且溫度以２ ℃／ｈ的速度降溫，當(dāng)溫度降至某一設(shè)定值后，保持２４ ｈ，并隨機(jī)取葉片測(cè)定；然后繼續(xù)降溫。降溫期間的環(huán)境條件是光照時(shí)間為處理日當(dāng)天８∶００～２０∶００、光照強(qiáng)度為１２０ μｍｏｌ／（ｍ2·ｓ）、空氣相對(duì)濕度保持在８０％左右。

１．２測(cè)定方法

植物細(xì)胞膜透性的高低是植物處在逆境條件下細(xì)胞膜的完整程度與穩(wěn)定性的體現(xiàn)，也是衡量植物抗逆性強(qiáng)弱的重要指標(biāo)之一，在正常情況下，細(xì)胞膜對(duì)進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)具有選擇性透過(guò)能力；當(dāng)植物受到逆境脅迫后，植物的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，細(xì)胞膜受到破壞，膜的透性增加，從而使細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲，進(jìn)而使植物細(xì)胞浸提液的相對(duì)電導(dǎo)率（Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ，ＲＥＣ）增大；細(xì)胞膜透性增大（相對(duì)電導(dǎo)率增大）的水平與受傷害的程度有關(guān)［７］。所以細(xì)胞膜透性用相對(duì)電導(dǎo)率表示，相對(duì)電導(dǎo)率采用電導(dǎo)儀法測(cè)定［７］；ＭＤＡ含量采用硫代巴比妥酸顯色法測(cè)定［７］，ＳＯＤ活性采用ＮＢＴ光化還原法測(cè)定［８］，脯氨酸含量采用酸性茚三酮法測(cè)定［８］，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定［７］。對(duì)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和相關(guān)性分析。

２結(jié)果與分析

２．１低溫脅迫對(duì)觀光木葉片細(xì)胞膜透性的影響

細(xì)胞膜是植物抵御低溫脅迫的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，對(duì)低溫較為敏感，其電解質(zhì)的變化可顯示細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的受損程度［９］。低溫脅迫對(duì)觀光木葉片細(xì)胞膜透性的影響測(cè)定結(jié)果見圖１，由圖１可以看出，葉片組織相對(duì)電導(dǎo)率隨著溫度的降低逐漸升高，當(dāng)溫度降至１２ ℃時(shí)，相對(duì)電導(dǎo)率緩慢增加，為２２．１１％，是對(duì)照的１．５４倍；而繼續(xù)降低到８ ℃與４ ℃時(shí)，相對(duì)電導(dǎo)率顯著增加到３７．３８％和５５．５４％，分別是對(duì)照的２．６０、３．８７倍；再降到０ ℃時(shí)，相對(duì)電導(dǎo)率達(dá)到６１．７８％，為對(duì)照的４．３０倍。說(shuō)明溫度越低，相對(duì)電導(dǎo)率增加的幅度越大，細(xì)胞膜受到傷害的程度也就越嚴(yán)重。方差分析結(jié)果表明，低溫對(duì)相對(duì)電導(dǎo)率的影響達(dá)到了極顯著差異水平（Ｐ＜０．０１）。

２．２低溫脅迫對(duì)觀光木葉片ＭＤＡ含量的影響

ＭＤＡ是膜脂過(guò)氧化的最終產(chǎn)物之一，能嚴(yán)重?fù)p害植物的細(xì)胞膜系統(tǒng)，干擾植物的光合、呼吸及其他代謝過(guò)程，其含量的高低是膜脂過(guò)氧化程度的重要標(biāo)志［１０］。低溫脅迫對(duì)觀光木葉片ＭＤＡ含量的影響測(cè)定結(jié)果見圖２，由圖２可見，隨著溫度的降低，葉片ＭＤＡ含量呈先升高后略下降的變化趨勢(shì)，但總體含量均高于對(duì)照。當(dāng)溫度降至１２ ℃時(shí)，ＭＤＡ含量緩慢增加，為１４．４３ ｎｍｏｌ／ｇ；到８ ℃時(shí)，ＭＤＡ含量明顯增加，為２１．８６ ｎｍｏｌ／ ｇ；到４ ℃時(shí)達(dá)到最大值，為３８．８９ ｎｍｏｌ／ｇ，是對(duì)照的２．９１倍，說(shuō)明此時(shí)的膜脂過(guò)氧化程度最嚴(yán)重；到０ ℃時(shí)，ＭＤＡ含量為３３．２４ ｎｍｏｌ／ｇ，比４ ℃時(shí)的含量略有下降，可能是此時(shí)體內(nèi)較高的ＳＯＤ活性抑制了膜脂過(guò)氧化作用所致。方差分析結(jié)果表明，低溫對(duì)ＭＤＡ含量的影響呈極顯著差異水平（Ｐ＜０．０１）。

２．３低溫脅迫對(duì)觀光木葉片ＳＯＤ活性的影響

ＳＯＤ是能清除氧自由基的細(xì)胞保護(hù)酶，在植物體內(nèi)可提高植物組織的抗氧化能力，其活性的大小與植物的抗逆性密切相關(guān)。低溫脅迫對(duì)觀光木葉片ＳＯＤ活性的影響測(cè)定結(jié)果見圖３。由圖３可以看出，葉片ＳＯＤ活性隨著溫度的降低呈不斷增加的變化趨勢(shì)。當(dāng)溫度降至１２ ℃和８ ℃時(shí)，ＳＯＤ活性增加緩慢，分別為５１．５６、６４．９３ Ｕ／ｇ，分別是對(duì)照的１．１６、１．４７倍；降到４ ℃之后，ＳＯＤ活性顯著增加；到０ ℃時(shí)，ＳＯＤ活性達(dá)到１９６．１８ Ｕ／ｇ，是對(duì)照的４．４３倍。說(shuō)明隨著溫度的降低，刺激了ＳＯＤ活性增強(qiáng)。方差分析結(jié)果表明，低溫對(duì)ＳＤＯ活性的影響達(dá)到了極顯著差異水平（Ｐ＜０．０１）。

２．４低溫脅迫對(duì)觀光木葉片Pro含量的影響

Pro是一種具有高度水溶性的游離氨基酸，作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，能保持細(xì)胞原生質(zhì)體與環(huán)境的滲透平衡，還可穩(wěn)定生物大分子結(jié)構(gòu)、保持膜結(jié)構(gòu)的完整性［１１］。低溫脅迫對(duì)觀光木葉片Pro含量的影響測(cè)定結(jié)果見圖４，由圖４可見，隨著溫度的降低，葉片Pro含量呈不斷增加的變化趨勢(shì)。當(dāng)溫度降至１２ ℃時(shí)，Pro含量顯著增加至５０４．６３ μｇ／ｇ（ＦＷ），為對(duì)照的１．１９倍；之后緩慢增加，在０ ℃時(shí)，Pro含量達(dá)５８７．９６ μｇ／ｇ（ＦＷ），為對(duì)照的１．３９倍，說(shuō)明Pro含量一直保持著較高的水平，這對(duì)于細(xì)胞抵御低溫脅迫具有一定的積極作用。方差分析結(jié)果表明，低溫對(duì)Pro含量的影響達(dá)到了極顯著差異水平（Ｐ＜０．０１）。

２．５低溫脅迫對(duì)觀光木葉片可溶性糖含量的影響

可溶性糖是植物體內(nèi)的重要代謝產(chǎn)物，在抗寒過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。低溫脅迫對(duì)觀光木葉片可溶性糖含量的影響測(cè)定結(jié)果見圖５，由圖５可以看出，隨著溫度的降低，葉片可溶性糖含量不斷增加。其中，當(dāng)溫度降至１２ ℃時(shí)，可溶性糖含量較低，與對(duì)照的差異不顯著（Ｐ ＞０．０５）；之后可溶性糖含量顯著增加，在８ ℃和４ ℃時(shí)分別為５．９６％、６．０６％；到０ ℃時(shí)，可溶性糖含量達(dá)６．５２％，為對(duì)照的１．３４倍。方差分析結(jié)果表明，低溫對(duì)可溶性糖含量的影響達(dá)極顯著差異水平（Ｐ＜０．０１）。

２．６低溫與各生理指標(biāo)之間的相關(guān)性分析

在低溫脅迫下，植物的生理代謝因受到干擾而發(fā)生紊亂，使植物受傷甚至死亡。分析低溫與各生理指標(biāo)之間的相關(guān)性，有助于發(fā)現(xiàn)低溫與各生理指標(biāo)之間以及各生理指標(biāo)之間的緊密聯(lián)系程度。低溫脅迫下觀光木葉片各生理指標(biāo)變化的相關(guān)性分析結(jié)果見表１，由表１可知，低溫與相對(duì)電導(dǎo)率、可溶性糖含量呈顯著的負(fù)相關(guān)，但與ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性、Pro含量的相關(guān)性不顯著；相對(duì)電導(dǎo)率與ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性呈顯著的正相關(guān)，與可溶性糖含量呈極顯著的正相關(guān)。因此，低溫脅迫下可以通過(guò)測(cè)定植物細(xì)胞的相對(duì)電導(dǎo)率或可溶性糖含量等指標(biāo)來(lái)間接反映出觀光木的抗寒性能。

３小結(jié)與討論

Ｌｙｏｎｓ［１２］認(rèn)為，在低溫脅迫下受到冷害的植物細(xì)胞，細(xì)胞膜首先發(fā)生物相變化，膜脂從液晶態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z態(tài)，膜收縮后出現(xiàn)裂縫，造成細(xì)胞內(nèi)含物外滲，導(dǎo)致膜透性增大。與此同時(shí)，植物細(xì)胞內(nèi)活性氧代謝的平衡被破壞，有利于活性氧的產(chǎn)生，從而引發(fā)或加劇膜脂過(guò)氧化作用，造成細(xì)胞膜系統(tǒng)的損傷。在試驗(yàn)中，隨著溫度的降低（從２５ ℃降到４ ℃），觀光木葉片的相對(duì)電導(dǎo)率、ＭＤＡ含量不斷升高，可能的原因是在溫度降低時(shí)ＳＯＤ活性增加緩慢、酶的活性保持在較低的水平所致，也說(shuō)明是細(xì)胞對(duì)低溫環(huán)境的一個(gè)適應(yīng)過(guò)程；而在０ ℃時(shí)，相對(duì)電導(dǎo)率升高的程度減緩，ＭＤＡ含量略有下降，此時(shí)的ＳＯＤ活性達(dá)到最大值，說(shuō)明一定的低溫能刺激ＳＯＤ活性的大大增強(qiáng)，SOD能夠及時(shí)清除體內(nèi)過(guò)多的活性氧自由基，減輕膜脂過(guò)氧化引起的膜傷害，保護(hù)膜的完整性，從而使觀光木表現(xiàn)出能忍受０ ℃的低溫。同時(shí)，這也可能是細(xì)胞對(duì)低溫脅迫的一種保護(hù)性應(yīng)激反應(yīng)。這與王永紅等［９］對(duì)山茶（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．）的研究結(jié)果相一致；但與李晶等［１３］對(duì)紅松（Ｐｉｎｕｓ ｋｏｒａｉｅｎｓｉｓ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）、楊德浩等［１４］對(duì)歐洲白樺（Ｂｅｔｕｌａ ｐｅｎｄｕｌａ Ｒｏｔｈ．）的ＳＯＤ活性研究結(jié)果不相一致，可能的原因是不同樹種對(duì)于低溫脅迫的抗寒機(jī)理或響應(yīng)機(jī)制不一樣所致。相關(guān)性分析結(jié)果表明，相對(duì)電導(dǎo)率與ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性呈顯著的正相關(guān)。

一般情況下，植物體內(nèi)的游離脯氨酸含量并不多；但經(jīng)低溫脅迫后，其作為細(xì)胞內(nèi)的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、防凍劑或膜穩(wěn)定劑［１５］會(huì)迅速增加含量。不過(guò)目前有關(guān)脯氨酸的積累與植物抗寒性的關(guān)系存在２種不同的觀點(diǎn)，一種認(rèn)為脯氨酸的積累與植物抗寒性存在著一定的相關(guān)性；另一種則認(rèn)為脯氨酸的積累與植物抗寒性無(wú)關(guān)。在試驗(yàn)中，觀光木葉片脯氨酸含量隨著溫度的降低不斷增加，且相關(guān)性分析表明，脯氨酸含量與低溫存在著一定的負(fù)相關(guān)性（相關(guān)系數(shù)＝－０．８１２）；這與王連敏等［１６］對(duì)玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）、黎明等［１７］對(duì)香木蓮（Ｍａｎｇｌｉｅｔｉａ ａｒｏｍａｔｉｃａ Ｄａｎｄｙ）的抗寒性研究結(jié)果一致。但Ｙｅｌｅｎｏｓｋｙ［１８］在對(duì)柑橘（Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ Ｂｌａｎｃｏ）的研究中指出，脯氨酸積累與柑橘的抗寒性無(wú)關(guān)。

可溶性糖作為低溫脅迫下植物細(xì)胞的主要滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一，一直被研究者所關(guān)注。簡(jiǎn)令成［１９］認(rèn)為，在低溫脅迫初期，植物可能依賴其細(xì)胞內(nèi)可溶性糖含量的增加來(lái)抵御低溫傷害；而當(dāng)脅迫加劇時(shí)，可能轉(zhuǎn)為依靠細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)與核酸的變化和提高來(lái)抵御低溫傷害?？扇苄蕴呛颗c植物抗寒性之間存在著相關(guān)性［４］。試驗(yàn)中，觀光木葉片的可溶性糖含量隨著溫度的降低明顯在增加；且相關(guān)性分析結(jié)果表明，可溶性糖含量與低溫呈顯著的負(fù)相關(guān)（相關(guān)系數(shù)＝－０．８９４），這與黎明等［１７］對(duì)香木蓮、李曉儲(chǔ)等［２０］對(duì)樂昌含笑（Ｍｉｃｈｅｌｉａ ｃｈａｐｅｎｓｉｓ Ｄａｎｄｙ）的研究結(jié)果一致。

植物的抗寒性不僅與植物本身的遺傳基因有關(guān)，而且還與植物的生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。李剛等［５］研究表明，南京市一年生觀光木幼苗能忍耐－６ ℃左右的低溫；方小平等［６］研究表明，貴州省二年生觀光木幼苗能忍耐－４ ℃左右的低溫，而本試驗(yàn)的研究結(jié)果卻表明，南寧市一年生觀光木幼苗能忍耐０ ℃左右的低溫，這種差異性可能是觀光木對(duì)當(dāng)?shù)貧夂驐l件適應(yīng)性的結(jié)果或是生長(zhǎng)發(fā)育階段不同、亦或是低溫處理的溫度不同所導(dǎo)致的。同時(shí)本試驗(yàn)只是在人工模擬低溫條件下對(duì)觀光木幼苗離體枝條葉片的抗寒性進(jìn)行了初步研究，對(duì)于其抗寒能力的強(qiáng)弱還需要在田間進(jìn)行真實(shí)性抗寒比較來(lái)檢驗(yàn)。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 李松海，謝安德，賁麗云，等．珍貴樹種觀光木研究現(xiàn)狀及展望［Ｊ］．南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，２０１１，４２（８）：９６８－９７１．

［２］ 繆林海．觀光木高齡植株扦插繁殖技術(shù)的初步研究［Ｊ］．福建林業(yè)科技，２００２，２９（１）：４７－４９．

［３］ 宋朝樞，徐榮章，張清華．中國(guó)珍稀瀕危保護(hù)植物［Ｍ］．北京：中國(guó)林業(yè)出版社，１９８９．１７５－１７７．

［４］ 劉金文，沙偉，王艷君．低溫脅迫對(duì)不同物候期細(xì)葉杜香的生理影響［Ｊ］．植物研究，２００４，２４（２）：１９7－２００．

［５］ 李剛，姜衛(wèi)兵，翁忙玲，等．木蘭科６種常綠樹幼苗抗寒性的初步研究［Ｊ］．園藝學(xué)報(bào)，２００７，３４（３）：７８３－７８６．

［６］ 方小平，李昌艷，胡光平．貴州４種木蘭科植物幼苗的抗寒性研究［Ｊ］．林業(yè)科學(xué)研究，２０１０，２３（６）：８６２－８６５．

［７］ 李合生．植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２０００．１９５－１９７，２６０－２６３．

［８］ 陳建勛，王曉峰．植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［Ｍ］．廣州：華南理工大學(xué)出版社，２００６．６６－６９．

［９］ 王永紅，李紀(jì)元，田敏，等．低溫脅迫對(duì)山茶物種２個(gè)抗寒性生理指標(biāo)的影響［Ｊ］．林業(yè)科學(xué)研究，２００６，１９（１）：１２１－１２４．

［１０］ 陳少裕．膜脂過(guò)氧化對(duì)植物細(xì)胞的傷害［Ｊ］．植物生理學(xué)通訊，１９９１，２７（２）：８４－９０．

［１１］ 湯章城．逆境條件下植物脯氨酸的累積及其可能的意義［Ｊ］． 植物生理學(xué)通訊，１９８４（１）：１５－２１．

［１２］ ＬＹＯＮＳ Ｊ Ｍ． Ｃｈｉｌｌｉｎｇ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｐｌａｎｔs［Ｊ］． Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９７３，２４（1）：４４５－466．

［１３］ 李晶，閻秀峰，祖元?jiǎng)偅蜏孛{迫下紅松幼苗活性氧的產(chǎn)生及保護(hù)酶的變化［Ｊ］． 植物學(xué)報(bào)，２００２，４２（２）：１４８－１５２．

［１４］ 楊德浩，楊敏生，王進(jìn)茂，等． 歐洲白樺苗期低溫脅迫時(shí)膜系統(tǒng)的變化［Ｊ］． 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００４，３２（６）：１３－１５．

［１５］ 王榮富．植物抗寒指標(biāo)的種類及其應(yīng)用［Ｊ］．植物生理學(xué)通訊，１９８７（３）：４９－５５．

［１６］ 王連敏，王立志，張國(guó)民，等．苗期低溫對(duì)玉米體內(nèi)脯氨酸、電導(dǎo)率及光合作用的影響［Ｊ］． 中國(guó)農(nóng)業(yè)氣象，１９９９，２０（２）：２８－３１．

［１７］ 黎明，李福秀，馬煥成，等．香木蓮對(duì)短時(shí)低溫脅迫處理的生理生態(tài)響應(yīng)［Ｊ］．北方園藝，２００６（１）：３７－３９．

［１８］ ＹＥＬＥＮＯＳＫＹ Ｇ Ａ． Accｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｅｅ ｐｒｏｌｉｎｅ ｉｎ ｃｉｔｒｕｓ leaves ｄｕｒｉｎｇ ｃｏｌｄ ｈａｒｄeｎｉｎｇ ｏｆ ｙｏｕｎｇ tree ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｇｉｍｅｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９７９，６４（3）：４２５－４２７．

［１９］ 簡(jiǎn)令成．植物抗冷機(jī)理研究進(jìn)展［Ｊ］．植物學(xué)通報(bào)，１９９２（９）：１７－２２．

［２０］ 李曉儲(chǔ)，萬(wàn)志州，黃利斌．樂昌含笑引種育苗技術(shù)研究［Ｊ］．林業(yè)科技開發(fā)，２００１，１５（３）：１４－１５．