干擾素干預(yù)HBeAg陰性乙型肝炎療效中血清HBsAg定量檢測的意義

黃成河，楊國敬

（中國航天科工集團(tuán)七三一醫(yī)院，北京 100074）

干擾素干預(yù)HBeAg陰性乙型肝炎療效中血清HBsAg定量檢測的意義

黃成河，楊國敬

（中國航天科工集團(tuán)七三一醫(yī)院，北京 100074）

我國屬HBV感染高流行區(qū)，據(jù)2006年全國人群乙肝血清流行病學(xué)調(diào)查，由于乙肝疫苗預(yù)防接種工作的開展，我國1-59歲一般人群的乙型肝炎表面抗原（Hepatitis B surface antigen，HBsAg）攜帶率已由9.75%降至7.18%［1］。但由于我國的人口基數(shù)大，HBV感染及所致疾病仍然是一個(gè)嚴(yán)重的社會(huì)公共衛(wèi)生問題。

慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B，CHB）主要為抗病毒干預(yù)，干擾素和核苷（酸）類似物為臨床干預(yù)一線用藥。目前用于臨床干預(yù)的干擾素為普通干擾素α（IFN-α）和聚乙二醇化干擾素α（PegIFN-α），其主要通過直接抗病毒作用及誘導(dǎo)機(jī)體的免疫反應(yīng)以達(dá)到清除病毒的效果。干擾素干預(yù)的優(yōu)點(diǎn)在于療程相對(duì)固定、可獲得乙型肝炎e抗原（Hepatitis B e antigen，HBeAg）血清學(xué)轉(zhuǎn)換、持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（sustained virological response，SVR）、HBsAg 消失率或血清學(xué)轉(zhuǎn)換以及不會(huì)產(chǎn)生病毒耐藥變異［2］。但是患者應(yīng)答率低、需要注射給藥、明顯的不良反應(yīng)、以及抑制HBV DNA不如核苷類藥物作用強(qiáng)和起效快限制了其在臨床的應(yīng)用［3］。

本研究對(duì)聚乙二醇干擾素α-2a（PegIFNα-2a）干預(yù)過程中患者血清HBsAg水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測，探討其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象慢性乙型肝炎患者為既往乙型肝炎病史或HBsAg陽性超過6個(gè)月并且肝組織學(xué)檢查有肝炎病變，診斷均符合《慢性乙型肝炎防治指南》標(biāo)準(zhǔn)［4］。36例 HBeAg陰性患者以 PegIFNα-2a 180μg／周干預(yù)48周，其中男29例，女7例，年齡18－65歲（平均43歲）。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①HBV DNA≥2000IU／mL；②干預(yù)前血清 ALT水平持續(xù)升高，ALT≥80U／L且≤400U／L，血清總膽紅素＜51.4μmol／L；③血清 HBsAg陽性；④HBeAg陰性；⑤在干預(yù)前半年內(nèi)沒有接受過抗病毒干預(yù)；⑥排除HCV感染等其他慢性肝??；⑦臨床無失代償性肝硬化或肝細(xì)胞癌；⑧排除有嚴(yán)重心、肺、腎、血液、內(nèi)分泌等病變及精神異常病史；⑨非妊娠及哺乳期婦女。

1.2 干預(yù)應(yīng)答判斷病毒學(xué)應(yīng)答：血清HBV DNA檢測不到；持續(xù)應(yīng)答：干預(yù)結(jié)束后隨訪24周HBV DNA檢測不到；復(fù)發(fā)：干預(yù)結(jié)束時(shí)HBV DNA檢測不到，但是停藥后24周HBV DNA升高或陽轉(zhuǎn)；無應(yīng)答：干預(yù)結(jié)束時(shí)HBV DNA無改善。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測血清中HBV DNA定量按照HBV核酸定量檢測試劑盒（深圳凱杰生物工程有限公司）說明書操作，用LightCycler 480實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（美國Roche公司）進(jìn)行測定。血清HBsAg定量按照化學(xué)發(fā)光微粒子免疫測定方法（Chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA）試劑盒（美國Abbott公司）說明書操作，用Architect i2000型免疫發(fā)光分析儀 美國Abbott公司）進(jìn)行測定。監(jiān)測點(diǎn)為基線，干預(yù)中（12、24和48周）及干預(yù)后（72周）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；兩組間計(jì)量資料比較用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基線值測定對(duì)患者臨床指標(biāo)基線水平，包括年齡、血清 ALT水平、HBV DNA及 HBsAg與PegIFNα-2a干預(yù)后是否獲得SVR進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（見表1）。血清ALT基線水平與PegIFNα-2a干預(yù)后持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答相關(guān)，SVR組血清ALT水平高于未獲得SVR組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），年齡、HBV DNA及 HBsAg基線值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 病毒學(xué)應(yīng)答36例患者有21例（58%）干預(yù)結(jié)束時(shí)產(chǎn)生病毒學(xué)應(yīng)答，15例（42%）無病毒學(xué)應(yīng)答。干預(yù)結(jié)束后隨訪24周，有8例（25%）獲得SVR，13例（36%）復(fù)發(fā)。不同應(yīng)答組血清 HBV DNA水平見圖1。在干預(yù)第12、24和48周，SVR組 HBV DNA下降分別為3.9±1.3、4.1±1.7和4.1±1.8log10IU／mL，無應(yīng)答組為2.6±1.4、2.4±1.5和2.3±1.6log10IU／mL（圖1A），復(fù)發(fā)組為3.0±1.9、3.4±1.4和3.4±1.5log10IU／mL（圖1B）。SVR組HBV DNA降低與無應(yīng)答組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與復(fù)發(fā)組之間差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 36例HBeAg陰性患者干預(yù)前臨床指標(biāo)測定

圖1 A）持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）組和無應(yīng)答組患者血清中HBV DNA水平；B）持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）組和復(fù)發(fā)組患者血清中HBV DNA水平。血清中HBV DNA最低檢出限為500IU／mL（2.70log10IU／mL）。

2.3 血清中HBsAg定量干預(yù)前SVR組和未獲得SVR組患者血清中HBsAg水平無差別，分別為3.5±0.8log10IU／mL和3.5±0.6log10IU／mL。PEG-IFNα-2a干預(yù)第12周、24周和48周，SVR組患者血清 HBsAg下降分別為0.8±0.6、1.3±0.7和2.1±1.3log10IU／mL，比無應(yīng)答組（圖2A）和復(fù)發(fā)組（圖2B）顯著降低。

圖2 A）持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）組和無應(yīng)答組患者血清中HBsAg水平；B）持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）組和復(fù)發(fā)組患者血清中HBsAg水平。

3 討論

HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者由于HBV基因前核／核心啟動(dòng)子區(qū)變異導(dǎo)致HBeAg減少或消失。這類患者預(yù)后差、低自發(fā)清除率以及高復(fù)發(fā)率導(dǎo)致持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答率低，尤其是對(duì)于核苷類藥物的抗病毒干預(yù)。Marcellin等5用PegIFNα-2a、拉米夫定或PegIFNα-2a拉米夫定聯(lián)合用藥分別干預(yù)HBeAg陰性CHB患者。研究結(jié)果顯示，PegIFNα－2a干預(yù)組19%的HBeAg陰性患者獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答，3年隨訪數(shù)據(jù)顯示有12%的患者HBV DNA水平在低于檢測下限（400copies／mL）以及每年遞增的HBsAg消失率。由此可見，對(duì)于這類患者用干擾素干預(yù)比需要長期服藥來維持病毒抑制的核苷（酸）類似物具有一定的優(yōu)勢(shì)。PegIFNα-2a干預(yù)結(jié)束時(shí)有63%的患者出現(xiàn)病毒學(xué)應(yīng)答，卻只有19%的患者在干預(yù)結(jié)束24周后獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答。因此，在干預(yù)早期亟需明確的指標(biāo)來預(yù)測干擾素抗病毒干預(yù)效果，進(jìn)而幫助臨床醫(yī)生判斷是否繼續(xù)干擾素的干預(yù)。

近年來隨著免疫發(fā)光檢測技術(shù)在臨床實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用及定量試劑的上市，HBsAg定量已成為重要的臨床檢測實(shí)驗(yàn)［6］。HBsAg定量比HBV DNA檢測花費(fèi)少并且具備高通量的完全自動(dòng)化檢測能力，不僅是HBV感染重要的血清學(xué)標(biāo)志物，也可用于預(yù)測臨床預(yù)后和抗病毒干預(yù)效果。近來研究表明，PegIFN-α能夠比核苷類藥物更迅速地降低血清HB－sAg水平，PegIFN-α治療獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答的中，HBsAg水平均顯著降低［7，8］。

本研究以PegIFNα-2a對(duì)HBeAg陰性CHB患者進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)干預(yù)第12、24和48周SVR組患者血清中HBV DNA下降均高于無應(yīng)答組，可據(jù)此觀察患者對(duì)干預(yù)的病毒學(xué)應(yīng)答情況。但是治療結(jié)束時(shí)，21例（58%）產(chǎn)生病毒學(xué)應(yīng)答，其中13例（36%）復(fù)發(fā)。僅僅根據(jù)血清HBV DNA下降的指標(biāo)并不能明確干預(yù)結(jié)束后患者能否獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答。我們對(duì)干預(yù)期間患者血清HBsAg動(dòng)態(tài)監(jiān)測，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)SVR組患者血清中HBsAg下降高于無應(yīng)答和復(fù)發(fā)組。因此，血清中HBsAg水平不僅可以明確臨床干預(yù)效果，而且監(jiān)測早期HBsAg水平還可預(yù)測患者能否獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答。

綜上所述，血清中HBsAg定量檢測在評(píng)價(jià)CHB抗病毒干預(yù)中起到重要的作用，對(duì)HBeAg陰性患者監(jiān)測HBsAg水平不僅可預(yù)測臨床干預(yù)效果，并且可根據(jù)應(yīng)答指導(dǎo)干預(yù)以提高干預(yù)方法的成本效益。

［1］Liang X，Bi S，Yang W，et al.Epidemiological serosurvey of hepatitis B in China-declining HBV prevalence due to hepatitis B vaccination［J］.Vaccine，2009，27：6550.

［2］Perrillo RP.Therapy of hepatitis B-viral suppression or eradication［J］？Hepatology，2006，43（Suppl 1）：S182.

［3］P Marcellin，GKK Lau，F(xiàn) Bonino，et al.Peginterferon Alfa-2aA-lone，Lamivudine Alone，and the Two in Combination in Patients with HBeAg-Negative Chronic Hepatitis B［J］.N Engl J Med，2004，351：1206.

［4］中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南［J］.肝臟，2005，10：348.

［5］Marcellin P，Bonino F，Lau GK，et al.Sustained response of hepatitis B e antigen-negative patients 3years after treatment with peginterferon alpha-2a［J］.Gastroenterology，2009，136：2169.

［6］Kohmoto M，Enomoto M，Tamori A，et al.Quantitative detection of hepatitis B surface antigen by chemiluminescent microparticle immunoassay during lamivudine treatment of chronic hepatitis B virus carriers［J］.J Med Virol，2005，75：235.

［7］Brunetto MR，Moriconi F，Bonino F，et al.Hepatitis B virus surface antigen levels：aguide to sustained response to peginterferon alfa-2ain HBeAg-negative chronic hepatitis B［J］.Hepatology，2009，49：1141.

［8］Wong VW，Wong GL，Yan KK，et al.Durability of peginterferon alfa-2btreatment at 5years in patients with hepatitis B e antigenpositive chronic hepatitis B［J］.Hepatology，2010，51：1945.

1007－4287（2012）10－1897－03

2011－09－11）