土茯苓中藥復(fù)方制劑與大蒜油對小鼠的排鉛作用比較

張建琴，唐 祥，余 玉，李 彩，白 云，朱云芳，王一心

（大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南大理 671000）

鉛廣泛存在于自然界中，具有廣泛的用途，是工業(yè)生產(chǎn)中普遍應(yīng)用的化學(xué)物質(zhì)，隨著現(xiàn)代工業(yè)化的不斷發(fā)展，人們接觸到鉛的機會也越來越多。許多研究表明，鉛對人體有較強的毒性作用〔1〕。目前在驅(qū)鉛治療中，常用的是螯合劑和抗氧化劑，但螯合劑大都有副作用，而抗氧化劑的療效也正處于研究探索階段，因此，探索新的具有拮抗鉛毒性和驅(qū)鉛效果的功能性物質(zhì)具有實際意義。國內(nèi)外采用中藥排鉛與食物排鉛的報道較少，且深入機理還有待進一步研究。

本文擬通過對鉛中毒造模小鼠采用土茯苓中藥復(fù)方制劑、大蒜油、乙二胺四乙酸（EDTA）驅(qū)鉛治療，觀察并監(jiān)測小鼠存活率以及造模前、造模后、驅(qū)鉛治療后小鼠血鉛含量、體重的變化，探討比較土茯苓中藥復(fù)方制劑、大蒜油的排鉛效果。

1 材料與方法

1.1實驗動物雄性健康成年小鼠48只（由本校實驗動物中心提供），重35～42 g。

1.2主要器材與試劑電子分析天平（日本島津）、石墨爐原子吸收分光光譜儀（日本島津AA-6200）；苦味酸、氯化鈉、肝素鈉，TritonX-100、醋酸鉛（40 mg/L）、EDTA均為國產(chǎn)的優(yōu)級純；大蒜油：由生蒜經(jīng)水提取、濃縮制成，劑量相當于0.2 g生藥提取。土茯苓中藥復(fù)方制劑：由金銀花、土茯苓、甘草、綠豆、大青葉混合加水煎制而成。

1.3鉛中毒模型的建立以40 mg/L的醋酸鉛溶液按0.01 mL/g體重劑量灌胃造模，1次/d，連續(xù)15 d制成鉛中毒模型〔2〕。

1.4小鼠的分組及標記將小鼠隨機分成4組，即土茯苓中藥復(fù)方制劑組、大蒜油組、EDTA組和中毒不治療組，每組12只，每只小鼠分籠飼養(yǎng)。各組均采用苦味酸染色法對小鼠進行標記。

1.5驅(qū)鉛治療方法實驗第16天，土茯苓中藥復(fù)方制劑組用土茯苓中藥復(fù)方制劑以0.12 mL/10 g灌胃，1次/d，連續(xù)治療15 d。大蒜油組用大蒜油以0.12 mL/10 g灌胃〔3〕，1次/d，連續(xù)治療15 d。EDTA組每天給予EDTA12.9 mg/kg〔4〕，1次/d，連續(xù)治療15 d。中毒不治療組用0.12 mL/10 g蒸餾水灌胃，1次/d，連續(xù)15 d。

1.6血鉛含量、體重測定采用自身對照的實驗方法，分3個階段對小鼠進行血鉛含量及體重測定。第1階段：造模前，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取0.1 mL尾部全血用以測定造模前的血鉛含量。第2階段：實驗第16天，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取0.1 mL尾部全血用以測定造模后的血鉛含量。第3階段：實驗第31天，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取尾部全血0.1 mL用以測定驅(qū)鉛治療后的血鉛含量。

1.7統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS11.5處理軟件、q檢驗、H檢驗、χ2檢驗對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理及分析。

2 結(jié)果

2.1土茯苓中藥復(fù)方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠血鉛含量的影響造模前，小鼠血鉛含量各組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。造模后，小鼠血鉛含量各組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。驅(qū)鉛治療后，土茯苓中藥復(fù)方制劑組、大蒜油組、EDTA組分別與中毒不治療組的血鉛含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；土茯苓中藥復(fù)方制劑組、大蒜油組、EDTA組的血鉛含量兩兩比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。驅(qū)鉛治療后各組的血鉛含量為：土茯苓中藥復(fù)方制劑組＜EDTA組＜大蒜油組。見表1。

2.2土茯苓中藥復(fù)方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠體重的影響造模前小鼠體重各組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。造模后小鼠體重各組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。驅(qū)鉛治療后，土茯苓中藥復(fù)方制劑組、大蒜油組分別與中毒不治療組的體重比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；土茯苓中藥復(fù)方制劑組與大蒜油組的體重比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；土茯苓中藥復(fù)方制劑組的體重＞大蒜油組的體重。見表2。

表1 造模前、造模后、驅(qū)鉛治療后血鉛含量比較

表2 造模前、造模后、驅(qū)鉛治療后小鼠體重變化比較（±s，g）

表2 造模前、造模后、驅(qū)鉛治療后小鼠體重變化比較（±s，g）

注：驅(qū)鉛治療后，經(jīng)q檢驗，**：與EDTA組比較，P＜0.05；△△：與中毒不治療組比較，P＜0.05；##：與土茯苓中藥復(fù)方制劑組比較，P＜0.05。

小鼠體質(zhì)量/g造模前 造模后 驅(qū)鉛治療后土茯苓中藥復(fù)方制劑組 39.80±1.76 39.34±1.6939.02±0.83**△△大蒜油組 39.34±3.10 38.47±2.5937.08±0.91△△##EDTA 組 38.98±5.50 38.25±5.2136.40±1.33△△##中毒不治療組 39.53±3.35 38.44±4.01 34.54±2.30**##組別

2.3土茯苓中藥復(fù)方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠存活率的影響土茯苓中藥復(fù)方制劑組、大蒜油組分別與中毒不治療組的存活率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；土茯苓中藥復(fù)方制劑組與大蒜油組的存活率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 四種方案對造模小鼠的存活率比較

3 討論

近年來，鉛中毒成為了研究熱點，許多學(xué)者致力于中藥驅(qū)鉛的研究，如趙英環(huán)等〔5〕用土茯苓、木瓜、當歸、扁豆、烏梅、甘草等組方對110例鉛中毒患者進行系統(tǒng)治療，取得了較好的療效。也有報道大蒜及其產(chǎn)品對鉛中毒大鼠有解毒功能〔6〕?？梢?，某些中藥、食物具有驅(qū)鉛效果。

鉛中毒是常見的重金屬中毒之一。關(guān)于建立鉛中毒模型的方法報道較多，本實驗參考相關(guān)研究資料，每天以40 mg/L的醋酸鉛溶液，按0.01 mL/g體重劑量灌胃造模，連續(xù)15 d，通過對造模前與造模后的血鉛含量進行統(tǒng)計學(xué)分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。

EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)，能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等大多數(shù)金屬離子形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物，從而發(fā)揮排解重金屬中毒的作用。EDTA同樣也是臨床上普遍采用的驅(qū)鉛藥物之一。本實驗對土茯苓中藥復(fù)方制劑進行加減來探討其對小鼠血鉛含量的促排作用，實驗結(jié)果表明，本土茯苓中藥復(fù)方制劑的驅(qū)鉛功效強于EDTA和大蒜油，因此本土茯苓中藥復(fù)方制劑治療鉛中毒有顯著療效。本土茯苓中藥復(fù)方制劑由金銀花、土茯苓、甘草、綠豆、大青葉等配制而成，綠豆和大青葉可降低鉛中毒小鼠的血鉛值，緩解鉛中毒所致的ZPP升高，減少鉛對機體的毒害作用〔7〕；中醫(yī)理論認為金銀花、土茯苓、甘草具有清熱解毒、利水滲濕的功效，本土茯苓中藥復(fù)方制劑驅(qū)鉛作用可能是因為這些藥物中含有多種有機酸，如甘草中含有甘草酸，土茯苓中含有茯苓酸等〔8〕，這些有機酸可以與鉛絡(luò)合形成絡(luò)合物，促進鉛的排泄，降低腦鉛和血鉛；除了以上機制外，土茯苓、甘草、金銀花復(fù)方制劑中含有豐富的鈣離子〔9〕，補充鈣離子進入機體后，可以通過競爭機制，促進鉛的排泄，降低腦鉛、血鉛水平，升高腦鈣水平，可能是其作用機制之一。由于植物中藥物成分相當復(fù)雜，是何種成分起關(guān)鍵作用或聯(lián)合作用，尚有待進一步探討。

此次科研結(jié)果進一步驗證大蒜油有一定的驅(qū)鉛效果。已有文獻報道大蒜提取物具有促進鉛排泄的作用〔10〕。大蒜本身含有能直接與鉛反應(yīng)的物質(zhì)，如果膠、半胱氨酸、葫蒜素、三硫醚等；某些含硫化合物如硫醚、硫肽等進入人體后，可釋放出活性的巰基物質(zhì)，這些巰基物質(zhì)再與鉛反應(yīng)生成配合物，這些配合物通過尿液或糞便排出體外，從而達到排鉛目的〔11〕。

以土茯苓為主的中藥復(fù)方制劑與大蒜油都有排鉛作用，本實驗初步證實二者驅(qū)鉛功效為：以土茯苓為主的中藥復(fù)方制劑＞大蒜油。如果二者聯(lián)合用藥可能會獲得更顯著的驅(qū)鉛效果，有待于進一步研究。

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