痛風(fēng)舒緩膠囊抗炎鎮(zhèn)痛作用研究①

冷 嫚 ，楊丹莉，夏 文，4，吳 芹，龔其海，聶 晶，金 鳳，王井洪

(1.遵義醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室暨貴州省基礎(chǔ)藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室貴州 遵義 563000;2.遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，貴州遵義 563000;3.貴州景紅生物科技有限責(zé)任公司，貴州 貴陽 550000;4貴州百靈企業(yè)集團(tuán)制藥有限股份公司，貴州 貴陽 550000)

痛風(fēng)舒緩膠囊(TFSHC)是根據(jù)傳統(tǒng)驗(yàn)方，加 以改進(jìn)后制成的新藥。該驗(yàn)方在臨床應(yīng)用多年，對(duì)痛風(fēng)療效確切，無明顯不良反應(yīng)。本研究通過二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹模型觀察TFSHC的抗炎作用，通過熱板法和醋酸扭體法觀察TFSHC的鎮(zhèn)痛作用。該研究旨在為該開發(fā)TFSHC為6類中藥新藥提供部分臨床前基礎(chǔ)藥理學(xué)資料。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 昆明種小鼠，體重18～20 g，由重慶第三軍醫(yī)大學(xué)提供，許可證號(hào)為SCXK(渝)2007－001;由重慶第三軍醫(yī)大學(xué)提供。

1.2 藥物 痛風(fēng)舒緩膠囊(新藥發(fā)明專利專利號(hào):201010205632.3ZL)，批號(hào):20090920;布洛芬緩釋片，惠州大亞制藥股份有限公司，批號(hào):090401。

1.3 儀器 電子分析天平，北京賽多利斯天平有限公司，型號(hào):BS 110S;電熱恒溫水浴箱，北京市光明醫(yī)療儀器廠，型號(hào):HH.W21.420型。

1.4 小鼠耳廓腫脹法抗炎試驗(yàn) 取昆明種小鼠40只，隨機(jī)分為4組，分別灌胃生理鹽水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高劑量 TFSHC(0.33 g/kg，1g/kg)連續(xù)7 d，末次給藥1.5 h后，將二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩面40 μl，將小鼠脫椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，稱重量，計(jì)算腫脹度=右耳－左耳。

1.5 熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn) 取昆明小鼠置于熱板上，記錄小鼠自熱板上至出現(xiàn)舔后足反應(yīng)所需的時(shí)間，即為痛閾值，凡小于5 s或大于30 s及跳躍者均淘汰。合格小鼠再測(cè)1次痛閾值 ，取兩次平均值作為各鼠痛閾值。取合格小鼠40只，將其隨機(jī)分為四組，分別灌胃生理鹽水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高劑量 TFSHC(0.33 g/kg，1 g/kg)連續(xù)7 d，末次給藥后1 h、3 h測(cè)量痛閾值。

1.6 冰醋酸致小鼠扭體法 取昆明小鼠40只，雌性，隨機(jī)分為4組，分別灌胃生理鹽水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高劑量 TFSHC(0.33 g/kg，1 g/kg)連續(xù)7 d，于末次給藥后1 h，分別由腹腔注射0.9%醋酸(0.2 ml/只)，觀察20 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 TFSHC對(duì)二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹的影響 與生理鹽水處理組比較，TFSHC低、高劑量對(duì)小鼠耳廓腫脹均有顯著的抑制腫脹作用(P＜0.05)，布洛芬也有顯著的抑制腫脹作用(P＜0.05)。表明TFSHC對(duì)二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹有抗炎作用，結(jié)果(見表1)。

表1 TFSHC對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹度的影響(s，n=10)

表1 TFSHC對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹度的影響(s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，*P＜0.05

組 別 腫脹度(mg)腫脹抑制率(%)

2.2 TFSHC對(duì)熱板法小鼠痛閾值的影響 與生理鹽水組比較，TFSHC低、高劑量組均能顯著提高痛閾值(P＜0.05)，布洛芬也能顯著提高痛閾值(P＜0.05)。表明TFSHC對(duì)熱刺激引起的小鼠疼痛有鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果(見表2)。

表2 TFSHC對(duì)熱板法小鼠痛閾值的影響(s，n=10)

表2 TFSHC對(duì)熱板法小鼠痛閾值的影響(s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，*P＜0.05

組 別 1 h痛閾值(s)3h痛閾值(s)15.77 ±4.69 16.95 ±4.51布洛芬(35mg/kg)23.52 ±7.24* 26.50 ±6.85*TFSHC 低(0.33g/kg)28.11 ±4.55* 30.54 ±6.67*TFSHC 高(1.0g/kg)27.18 ±6.55* 28.26 ±6.62生理鹽水*

2.3 TFSHC對(duì)冰醋酸引起的小鼠扭體的影響

與生理鹽水處理組比較，TFSHC高劑量能顯著減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)(P＜0.05)，布洛芬組也能顯著減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)(P＜0.05)。表明TFSHC高劑量對(duì)醋酸刺激引起小鼠的疼痛有鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果(見表3)。

表3 TFSHC對(duì)冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(x ± s，n=10)

3 討論

痛風(fēng)是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病，其發(fā)病機(jī)制與嘌呤代謝障礙及尿酸排泄減少密切相關(guān)，其中急性痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎發(fā)病急，癥狀重，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量［1］。目前用于緩解急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物主要包括:秋水仙堿，消炎痛等。這些藥物雖能一定程度改善癥狀，但秋水仙堿有肝、腎損害、呼吸抑制等嚴(yán)重不良反應(yīng);消炎痛對(duì)胃腸道有明顯的刺激作用，容易引起胃腸粘膜糜爛和潰瘍、甚至上消化道出血的危險(xiǎn)等［2］。故現(xiàn)亟待尋找有效、安全的新藥。

近10余年來，隨著生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的不合理改變，我國(guó)痛風(fēng)的發(fā)病率呈現(xiàn)日益增高的趨勢(shì)。痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎急性發(fā)作時(shí)可表現(xiàn)為關(guān)節(jié)紅腫熱痛和活動(dòng)受限［3］。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，本病屬于“痹證”范疇，病因主要由于過食膏粱厚味，脾胃運(yùn)化失常，濕熱蘊(yùn)結(jié)，絡(luò)脈淤滯所致，癥見關(guān)節(jié)紅腫熱痛等癥，當(dāng)以清熱利濕、舒筋止痛為法［4，5］。TFSHC由白芍、威靈仙、牛寄奴、金錢草、澤瀉等組成，有清熱散結(jié)，化瘀止痛的功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究已證實(shí)白芍具有鎮(zhèn)痛作用、擴(kuò)血管等作用;威靈仙具有舒筋止痛等作用;金錢草具有利尿通淋，清熱解毒，抗炎等作用;澤瀉具有降血脂及利尿等作用。全方協(xié)同具有清熱利濕去痹、舒筋通絡(luò)止痛之功效。

抗炎實(shí)驗(yàn)的炎癥腫脹模型有以下幾種方法:通過致炎因子如異性蛋白(雞蛋清)、顆粒性異物(酵母、角叉菜膠)、化學(xué)物(二甲苯、松節(jié)油、甲醛)等引起局部毛細(xì)血管通透性增加，制作局部炎癥腫脹模型［6］。本實(shí)驗(yàn)選擇了通過在耳部局部涂抹二甲苯建立小鼠耳廓腫脹炎癥模型，觀察TFSHC的抗炎效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與生理鹽水處理組比較，TFSHC低、高劑量對(duì)小鼠耳廓腫脹均有顯著的抑制腫脹作用(P＜0.05)，布洛芬也有顯著的抑制腫脹作用(P＜0.05)，表明TFSHC與布洛芬均對(duì)二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹有抗炎作用。與布洛芬組相比較，低、高劑量TFSHC組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)中，通過熱刺激法、醋酸扭體法制造小鼠疼痛的模型，觀察TFSHC的鎮(zhèn)痛作用。熱板法實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與生理鹽水組比較，TFSHC低、高劑量組均能顯著提高小鼠痛閾值(P＜0.05)，布洛芬也能顯著提高小鼠痛閾值(P＜0.05)。與布洛芬組相比較，TFSHC組提高小鼠痛閾值的趨勢(shì)更明顯，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。研究結(jié)果表明TFSHC對(duì)熱板法所致小鼠足疼痛都具有鎮(zhèn)痛作用。醋酸扭體法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與生理鹽水處理組比較，TFSHC高劑量能減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)(P＜0.05)，布洛芬組也能顯著減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)(P＜0.05)。與布洛芬組相比較，低、高劑量TFSHC組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。研究結(jié)果表明TFSHC對(duì)醋酸刺激引起小鼠的扭體疼痛具有緩解作用。

本研究揭示TFSHC具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛效應(yīng)，該研究結(jié)果為開發(fā)TFSHC為6類中藥新藥提供了部分臨床前藥理學(xué)資料。

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