血細(xì)胞分析儀血小板檢測(cè)異常影響因素研究

劉鋒

血細(xì)胞分析儀［1］由于具有較為良好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性、快速方便特性，使臨床檢驗(yàn)工作得到大幅度上升，顯著提高了工作效率;由于血小板體積較小，容易受到干擾發(fā)生粘附、聚集和變性等情況，使得血小板檢測(cè)難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，其檢測(cè)結(jié)果變化、且很不穩(wěn)定，計(jì)數(shù)結(jié)果與實(shí)際值出現(xiàn)顯著的差異，為了能夠提高血細(xì)胞分析儀對(duì)血小板檢測(cè)的精確度，我們對(duì)血細(xì)胞分析儀血小板檢測(cè)異常影響因素進(jìn)行分析，具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 儀器 血細(xì)胞分析儀采取Sysmex KX-21型(日產(chǎn))及相應(yīng)配套試劑;顯微鏡使用CX31光學(xué)顯微鏡(日本奧林巴斯公司生產(chǎn))。

1.2 檢測(cè)方法 ①血細(xì)胞分析儀檢測(cè):采靜脈血2.0 ml于EDTA-K2真空抗凝管，充分搖勻上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。②顯微鏡檢測(cè):采取手工顯微鏡檢測(cè)計(jì)數(shù)按照“全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程”(草酸銨法:血液20 μl加入0.38 ml血小板稀釋液，進(jìn)行充分混勻、充液、進(jìn)行鏡檢)對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行3次計(jì)數(shù)，取血小板計(jì)數(shù)的平均值;取經(jīng)抗凝血樣進(jìn)行血片推制，采取瑞士染色，推制血膜符合標(biāo)準(zhǔn)具有顯著的舌狀，頭、體、尾，經(jīng)瑞氏染色，后在顯微鏡下觀察血小板的大小、形態(tài)、有無凝集，以及血片中白細(xì)胞及紅細(xì)胞的大小、形態(tài)和碎片。③觀察內(nèi)容:對(duì)4862標(biāo)本進(jìn)行血細(xì)胞分析儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)412例標(biāo)本出現(xiàn)血小板檢測(cè)異常，并進(jìn)行手工顯微鏡檢測(cè)，血小板無異常，對(duì)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板發(fā)生異常情況影響因素進(jìn)行總結(jié)。

2 結(jié)果

4862標(biāo)本進(jìn)行血細(xì)胞分析儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)412例標(biāo)本出現(xiàn)血小板檢測(cè)異常，并進(jìn)行手工顯微鏡檢測(cè)，血小板無異常，對(duì)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板發(fā)生異常情況影響因素進(jìn)行總結(jié)，影響因素具有較為多的情況，具體見表1。

表1 412例檢測(cè)血小板發(fā)生異常影響因素(例，%)

3 討論

在外周血細(xì)胞中血小板是體積最小的細(xì)胞，它具有較多的功能的細(xì)胞，主要參與機(jī)體自行止血整個(gè)過程，在內(nèi)外凝血系統(tǒng)中具有較為重要的作用，由于其具有特性容易被破壞和發(fā)生附、聚集、變性等其他因素的干擾。

采血因素占影響因素中很大份額，老人、兒童、嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良及體質(zhì)較差患者由于靜脈血管不明顯常常發(fā)生采血困難，經(jīng)過多次反復(fù)穿刺使得局部組織發(fā)生水腫及皮下出血，引起血小板發(fā)生聚集［2］、使得血小板消耗以及引起的組織凝血因子進(jìn)入采集的血樣標(biāo)本，形成微小凝血塊，進(jìn)一步消耗血小板，是導(dǎo)致血細(xì)胞分析儀產(chǎn)生的結(jié)果偏低最長(zhǎng)見到的因素。

溶血?jiǎng)┰谘?xì)胞分析儀試劑中非常重要，可以對(duì)血樣標(biāo)本中紅細(xì)胞進(jìn)行破壞達(dá)到溶解效果［3］，并且使白細(xì)胞體積變化更有規(guī)律性，便于血細(xì)胞分析儀檢測(cè)，但溶血不充分，對(duì)紅細(xì)胞碎片不能夠徹底進(jìn)行沖洗，使得血細(xì)胞分析儀檢測(cè)出現(xiàn)假陽性，導(dǎo)致對(duì)血小板計(jì)數(shù)值假性增高。

EDTA抗凝是臨床上采血最常用的抗凝劑，文獻(xiàn)報(bào)道在室溫條件下EDTA抗凝血，血小板會(huì)出現(xiàn)EDTA依賴性凝集［4］，發(fā)生血小板EDTA依賴性凝集可能與血清中抗心磷脂抗體的滴度，血小板表面相關(guān)抗原的自身抗體有關(guān)，發(fā)生EDTA依賴性凝集后血細(xì)胞分析儀不能夠?qū)δw的結(jié)構(gòu)確認(rèn)，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)值假性減少。

經(jīng)混合后的標(biāo)本放置較長(zhǎng)時(shí)間，由于溶解試劑具有滲透壓，對(duì)血小板具有破壞作用，血小板的體積隨時(shí)間的延長(zhǎng)而發(fā)生變化，血小板的數(shù)量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。

血液分析儀是利用電阻抗原理計(jì)數(shù)血小板［5］，血小板的數(shù)量變化與體積變化密切相關(guān);紅細(xì)胞和血小板的計(jì)數(shù)是在同一通道中進(jìn)行，它們之間僅以體積大小來區(qū)別，因此，血小板的計(jì)數(shù)易受小紅細(xì)胞數(shù)量或紅細(xì)胞碎片的影響［6］;大體積血小板導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)減少，由于分析儀不能對(duì)巨大血小板進(jìn)行識(shí)別，將大體積血小板誤計(jì)入紅細(xì)胞，而導(dǎo)致血小板假性減少。

［1］ 李輝.血細(xì)胞分析儀對(duì)血小板的影響因素.中華臨床醫(yī)學(xué)研究雜志，2005，11(17):2557.

［2］ 魯力.淺談血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的影響因素及其質(zhì)量控制.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2008，24(5):751.

［3］ 李莉玲.探討血細(xì)胞分析儀測(cè)量血小板異常的因素.實(shí)用醫(yī)技雜志，2008，15(18):2370.

［4］ 陳夢(mèng)珍.血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板影響因素的探討.江西醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2005，23(3):243-244.

［5］ 鐘素萍，馬粵健.Svsmex KX-21型血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的影響因素的探討.海南醫(yī)學(xué)，2007，18(8):132.

［6］ 廖忠.血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板的影響因素分析.廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，23(5):611-619.