不同產(chǎn)地金櫻子根、莖、果中多糖含量的比較研究

譚宏韜

金櫻子為薔薇科植物金櫻子RosalaevigataMichx.的干燥成熟果實，味酸、甘、澀，性平，歸腎、膀胱、大腸經(jīng)。具有固精縮尿，澀腸止瀉的功效，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)金櫻子具有抗氧化、抑菌和抗炎、抑脂、免疫活性、致突變等作用，還能誘導(dǎo)細胞凋亡，臨床上主要用于治療遺尿、尿頻，腹瀉，遺精、早泄，子宮下垂，慢性支氣管炎，以及作為肥胖糖尿病的食療方[1]。

藥食兼?zhèn)涞慕饳炎右蚱滹L(fēng)味獨特、營養(yǎng)價值豐富的特點倍受青睞，作為制藥企業(yè)生產(chǎn)多種保健品的重要原料和疾病治療不可缺少的藥物，金櫻子藥材資源需求量越來越大。但由于社會產(chǎn)量少、市場庫存薄弱、用途日益拓寬的原因，金櫻子藥材商品貨少價揚[2]，因此，研究提高金櫻子藥材資源的方法為當務(wù)之急。席許林等[3]以金櫻子根為主自擬中草藥方運用于2型糖尿病患者，結(jié)果治療前后血糖明顯下降。劉佩沂等[4]通過總結(jié)近幾年金櫻子根的研究進展，得出金櫻子根已廣泛應(yīng)用于臨床的結(jié)論，但關(guān)于其化學(xué)成分及藥理研究報導(dǎo)甚少。賴岳曉等[5]通過研究得出金櫻子根、莖多糖具有抑菌作用，說明多糖是金櫻子根和莖的主要藥效成分，但是否能夠代替金櫻子果入藥，目前尚無相關(guān)研究報導(dǎo)。

《中國藥典》2005版規(guī)定，金櫻子肉按干燥品計算，含金櫻子多糖以無水葡萄糖計，不得少于25%[6]，金櫻子多糖無疑是金櫻子果肉的主要活性成分之一。本論文研究通過對不同產(chǎn)地的金櫻子根、莖、果中多糖含量進行比較，初步探討金櫻子的根和莖是否能在一定程度上代替果實入藥，為進一步解決金櫻子藥材資源匱乏問題提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 藥材采集及處理

于廣西藤縣(2005年10月5日)、湖南長沙(2008年11月24日)、廣東河源(2009年1月16日)、廣東肇慶(2008年10月6日)，各采集3株已成熟金櫻子的根、莖、果實，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥資源教研室何國振副教授鑒定為薔薇科植物金櫻子RosalaevigataMichx.的成熟根、莖、果實。將藥材除去雜質(zhì)，洗凈，60℃烘干，粉碎得粗粉備用。

1.2 儀器

紫外光-可見光吸收光譜儀(UV/Vis Spectrophotometer) (Optizen 2120uv，韓國)；十萬分之一克電子天平 (Sartorius AG BP211D，德國)。

1.3 試藥

濃硫酸(分析純)，苯酚(分析純，重蒸酚)；葡萄糖對照品(批號：110833-200503，中國藥品生物制品檢定所)。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備

將葡萄糖對照品打開蓋置小燒杯中，在五氧化二磷減壓干燥器中干燥12 小時，精密稱定0.015 g置25 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每ml中含無水葡萄糖0.6 mg)。

2.2 標準曲線的制備

精密量取對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml分別置50 ml量瓶中，各加水補足至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液2ml，置具塞試管中，迅速滴加4 %苯酚溶液1 ml、濃硫酸7.0 ml，搖勻，置40 ℃水浴中保溫30分鐘，取出置冰浴中放置5分鐘，取出[7]，以蒸餾水為空白，于490 nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，葡萄糖濃度為橫坐標，繪制標準曲線[6]。

測定結(jié)果表明，葡萄糖在0.006～0.030 mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。r=0.9998，A=11.550c-0.01410。其中，A表示吸光度，c為葡萄糖濃度。

2.3 測定法

精密稱定金櫻子根、莖粗粉各1 g，果粗粉0.5 g置錐形瓶中，精密加水50 ml，稱定重量，靜置1小時，水浴回流提取1小時，冷卻至室溫，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 ml，置100 ml量瓶中，加水補足至刻度，搖勻，精密量取25 ml，置50 ml量瓶中，加水補足至刻度，搖勻，精密量取2 ml置具塞試管中，參照標準曲線的制備項下的方法，自“迅速滴加4%苯酚溶液1 ml、濃硫酸7.0 ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量[6]。

2.4 精密度試驗

同一供試品溶液，各精密稱取5份，參照標準曲線制備項下的方法，依法測定吸光度為0.193、0.193、0.194、0.193、0.193，RSD=0.23%(n=5)，精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗

同一批樣品，各精密稱取5份，參照測定法項下的方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算出樣品中金櫻子多糖的含量，分別為15.47%、14.95%、15.53%、14.34%、13.85%，RSD=4.92%(n=5)，重復(fù)性良好。

2.6 回收率試驗

根據(jù)重復(fù)性試驗中測定的5份樣品金櫻子多糖含量的平均值，計算0.25 g樣品中含有金櫻子多糖的重量。取同一批樣品，各精密稱取5份，參照測定法項下的方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算平均回收率為98.64%，RSD值為1.80%。

2.7 樣品含量測定及統(tǒng)計分析

每個樣品重復(fù)3次，參照測定法項下的方法，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算出樣品中金櫻子多糖的含量，分別對廣西藤縣、湖南長沙、廣東河源、廣東肇慶4個不同采收地點的金櫻子的多糖含量進行測定，結(jié)果見表1。

運用SPSS 11.5軟件的One-Way ANOVA 過程進行方差分析，對比不同產(chǎn)地金櫻子根、莖與果之間的多糖含量，結(jié)果示4個產(chǎn)地金櫻子的根與果、莖與果多糖含量均存在顯著性差異(P<0.05)；廣西藤縣、湖南長沙、廣東肇慶3個產(chǎn)地金櫻子根與莖多糖含量存在顯著性差異(P<0.05)，而廣東河源金櫻子的根與莖多糖含量之間無顯著性差異(P>0.05)。

表1 不同產(chǎn)地的金櫻子不同部位多糖含量比較

3 分析與討論

4個產(chǎn)地金櫻子根、莖的多糖含量都比果實的多糖含量低，且具有顯著性差異，因此，不能以金櫻子的根和莖代替果實入藥。且《中國藥典》2005版規(guī)定，金櫻子肉按干燥品計算，含金櫻子多糖以無水葡萄糖計，不得少于25%[6]，而實測值均低于該標準，除卻操作誤差，主要因為藥用植物的生長發(fā)育及產(chǎn)品器官的形成、有效物質(zhì)的合成與累積受自身遺傳特征、自然環(huán)境、采收等多方面的影響[8]。當藥用植物所處的外界環(huán)境條件發(fā)生了變化，其體內(nèi)的代謝活動就會受到影響，從而使有效物質(zhì)的含量發(fā)生變化，結(jié)果影響到藥材的內(nèi)在質(zhì)量，因此對中藥材實施GAP種植顯得尤為重要。另外也說明金櫻子在入藥前必須經(jīng)過一些炮制加工，才可以達到較好的臨床療效。

目前國內(nèi)學(xué)者對金櫻子已經(jīng)進行了大量研究，這些工作可以為本研究提供可靠的基礎(chǔ)。根、莖、果之間的比較屬于同一植株的縱向比較，可消除外界干擾因素；多糖的測定方法來源于藥典，科學(xué)而穩(wěn)定。本研究通過測定比較金櫻子根、莖、果中主要活性成分——金櫻子多糖的含量，跟以往的研究僅局限于藥材化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用和制劑工藝不同，從新的角度研究解決藥材貨源不足的現(xiàn)狀，具有重要意義。

參考文獻

[1] 閔俊，李燕燕，余華．金櫻子化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用研究進展[J]．環(huán)球中醫(yī)藥，2008，1(2)：16-18.

[2] 尹平孫.幾種中藥材熱銷品種行情點評[J].特種經(jīng)濟動植，2008，14(8)：24-25.

[3] 席許林，張新國.古老中藥方治療2型糖尿病的秘方[J].中國醫(yī)藥指南，2011，9(5)：147-148.

[4] 劉佩沂，田素英，梅全喜.金櫻根研究進展[J].海峽藥學(xué)，2010，22(1)：98-99.

[5] 賴岳曉，王艷，盤昌盛，等.金櫻子根和莖多糖的抑菌作用研究[J].中國藥房，2009，20(24)：1857-1858.

[6] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典[M]．一部．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：153-154.

[7] 羅毅，潘細貴，劉剛，等.苯酚-硫酸法測定多糖含量顯色方式的優(yōu)選[J].中國中醫(yī)藥信息雜質(zhì)，2005，12(1)：45-46.

[8] 黃堅航.影響中藥質(zhì)量的因素[J].海峽藥學(xué)，2005，17(3)：189-192.