鴨副黏病毒病并發(fā)大腸桿菌病的診治

張秀峰，丁 壯，劉佳旭，劉玉茹

（1.吉林大學畜牧獸醫(yī)學院，吉林 長春 130062；2.吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物醫(yī)學學院，吉林 吉林 132101；3.吉林市船營區(qū)越北鎮(zhèn)動物疾控中心，吉林 吉林 132100）

吉林省吉林市經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)某養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的1500只蛋鴨于2011年9月發(fā)生了傳染病，并引起大量死亡，發(fā)病后經(jīng)我校實驗室診斷、治療，病情得到了控制，現(xiàn)將該病的診斷及防治情況介紹如下。

1 臨床癥狀

患鴨發(fā)病初期拉白色稀糞，其后糞便呈水樣、暗紅色或墨綠色；食欲減退、少食或拒食，飲欲增加，體重迅速減輕[1]。有的病鴨呼吸道發(fā)出“咕咕聲”，出現(xiàn)張口呼吸、甩頭、咳嗽等呼吸道癥狀；耐過鴨會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，飲水時上述癥狀更加明顯。部分鴨頭腫脹，并有流淚現(xiàn)象，3d后出現(xiàn)死亡。

2 病理剖檢變化

剖檢瀕死鴨或病死鴨，頭頸部皮膚充血、出血，腦充血、出血；有的見鼻腔充血或出血，喉頭黏膜出血，支氣管內(nèi)充滿黃色干酪樣物；個別鴨氣囊出現(xiàn)輕度渾濁[2]。脾臟腫大、淤血；心臟外膜見出血斑點，肝臟充血、出血，個別有包肝現(xiàn)象；腺胃和肌胃角質(zhì)層下出血；胰腺見出血點或灰白色壞死；盲腸扁桃體出血，腸道黏膜出血、壞死、潰瘍、結痂，從十二指腸開始至后腸段病變更加明顯和嚴重，直腸尤其明顯，有散在性潰瘍病灶，有的覆蓋紅褐色結痂[3]。

3 診斷

3.1 細菌學檢查

3.1.1 直接涂片鏡檢 取病死鴨肝、脾等病料觸片進行革蘭和瑞特染色鏡檢，觀察有無細菌[4]。

3.1.2 細菌的分離培養(yǎng) 無菌取病鴨的肝、心臟病料分別劃線接種于普通瓊脂平板、伊紅美藍瓊脂平板、肉湯于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h后觀察結果[5]。

3.1.3 涂片染色鏡檢 挑取普通瓊脂平板和伊紅美藍瓊脂平板上可疑菌落涂布于載玻片上，革蘭染色，在油鏡下觀察細菌的基本形態(tài)。

3.1.4 生化試驗 糖類分解試驗、硫化氫試驗、MR試驗、VP試驗等，然后觀察記錄結果。

3.1.5 動物試驗 將已鑒定菌株作為接種菌株，隨機選取10只小鼠平均分為兩組，即試驗組和對照組各5只，試驗組每只小鼠腹腔接種菌液0.2mL，對照組每只小鼠腹腔注射0.2mL無菌生理鹽水，接種后隔離飼養(yǎng)，每日觀察數(shù)次，連續(xù)觀察5d，記錄小鼠的發(fā)病情況、死亡時間及死亡數(shù)量，然后對小鼠進行解剖分離致病菌，進行培養(yǎng)，觀察菌落的形態(tài)及細菌染色特征。

3.1.6 藥敏試驗 取經(jīng)純化后的單個菌落接種肉湯培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h后，將菌液均勻涂布在普通瓊脂培養(yǎng)基上進行藥敏試驗，然后置37℃培養(yǎng)24 h，觀察、測定抑菌環(huán)的大小。藥敏紙片包括四環(huán)素、強力霉素、卡那霉素、紅霉素、鏈霉素、青霉素、恩諾沙星、氟苯尼考[6]。

3.2 病毒的分離、鑒定

取少量病死鴨的病料 （肝臟、脾臟、胰腺等），按照1∶5的比例加入滅菌的生理鹽水，在組織研磨器中研磨，制備組織勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移到滅菌的離心管，于臺式高速離心機中10000r／min離心5 min，吸取上清，轉(zhuǎn)移至另一滅菌離心管中，并加入雙抗（青霉素和鏈霉素），37℃水浴鍋中作用30min。用無菌注射器吸取上述處理液，0.1mL／只的劑量，尿囊腔接種10日齡的SPF雞胚4只，37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天人工翻胚、照胚各2次，及時取出死亡雞胚，并置4℃冰箱中6h左右，觀察死胚病變，并無菌收集雞胚尿囊液，然后進行病毒血凝試驗和血凝抑制試驗，觀察記錄結果[7]。

4 診斷結果

4.1 細菌學檢查結果

4.1.1 染色鏡檢結果 鏡下觀察到單個散在的革蘭陰性兩端鈍圓的短桿菌。

4.1.2 細菌培養(yǎng)特性 普通瓊脂平板上長出形態(tài)凸起，光滑濕潤，灰白色，半透明，邊緣整齊，有特殊的糞便臭味的菌落。伊紅美藍瓊脂平板上為圓形藍紫色菌落，中心為紫黑色帶金屬光澤。肉湯呈均勻渾濁，管底有黏液樣沉淀物。經(jīng)染色鏡檢細菌形態(tài)與直接涂片鏡檢形態(tài)一致。

4.1.3 生化培養(yǎng)結果 糖類分解試驗結果：發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、木糖、甘露醇，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，產(chǎn)生靛基質(zhì)，不發(fā)酵蔗糖。硫化氫試驗陰性；MR陽性、VP陰性[8]。

4.1.4 動物試驗結果 試驗組的5只小鼠全部死亡，剖檢小鼠，分離培養(yǎng)小鼠肝臟上病菌，發(fā)現(xiàn)與病死鴨分離出的病菌的形態(tài)、染色特性、培養(yǎng)特性完全一樣。

4.1.5 藥敏試驗結果 結果該菌對四環(huán)素、卡那霉素、紅霉素、鏈霉素、青霉素、恩諾沙星不敏感，對氟苯尼考和強力霉素高效。

4.2 病毒的分離、鑒定結果

4.2.1 病料研磨液接種10日齡雞胚 4枚雞胚均在48h左右死亡，死亡后的雞胚尿囊液清亮，胚體背部及爪尖有出血現(xiàn)象。

4.2.2 無菌收集上述4枚雞胚尿囊液 并對這4枚雞胚尿囊液分別進行血凝試驗，試驗結果顯示，已經(jīng)分離出病毒，且病毒具有凝集雞紅細胞的能力，平均血凝效價為27[9]。

4.2.3 進行血凝抑制試驗 試驗結果顯示，標準陽性的新城疫血清對雞胚尿囊液有抑制作用。

經(jīng)上述診斷可以確診為鴨副黏病毒病并發(fā)大腸桿菌病。

5 防治措施

5.1 對病鴨用抗鴨副黏病毒血清注射

同時用百毒殺帶鵝消毒和水槽、料槽等用具，用氟苯尼考和強力霉素配合金剛烷胺拌料飼喂5d～7 d，治療效果較好；未發(fā)病鴨使用疫苗緊急接種[10]。

5.2 供給鴨群足量的多種維生素和電解多維等

加強飼養(yǎng)管理，降低鴨群密度，注意搞好環(huán)境衛(wèi)生，全場清除糞便、污物、徹底消毒，對病死鴨要做深埋處理。

經(jīng)上述處理后，鴨群在第4天死亡開始減少，第5天鴨群食欲開始增加，第10天后鴨群基本恢復正常。

[1]張 坤，刁有祥，陳 琳.鴨瘟與鴨副黏病毒混合感染種鴨的診治[J].中國家禽，2011，33（22）：56－57.

[2]甘孟侯.中國禽病學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2003：8－11.

[3]袁圣丹，袁 生.蛋鴨副黏病毒病的初步診斷和防治[J].中獸醫(yī)學雜志，2011（3）：43－44.

[4]丁孟建，胡世君.規(guī)模養(yǎng)殖場肉鴨大腸桿菌病病原的分離鑒定及耐藥性檢測[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2012（3）：105－107.

[5]潘俊斌.雛鴨大腸桿菌病的診斷與防治[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2011（7）：14.

[6]龔新輝，沙依蘭古麗，汪 萍，等.鴨大腸桿菌藥敏試驗研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（6）：331－335.

[7]溫納相，周 全，宋永峰，等.種番鴨副黏病毒病的生的學特性研究[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2011（1）：2－5.

[8]劉風波，閆 芳，許 蓓，等.雞傳染性法氏囊病繼發(fā)大腸桿菌病的診治[J].國外畜牧學，2010，30（2）：89－91.

[9]陳延芝，莊志偉.應用新城疫弱毒疫苗與滅活疫苗防制鴨副黏病毒病的探索[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2011（3）：35－37.

[10]程曉霞，朱小麗，陳仕龍，等.新城疫疫苗預防鴨副粘病毒病效果[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2010，29（2）：25－29.