院內(nèi)腸桿菌科細菌感染及其對碳青霉烯類藥物耐藥性的研究

陳靜波，崔清潭

（解放軍第三一三醫(yī)院檢驗科，遼寧 葫蘆島 125000）

院內(nèi)腸桿菌科細菌如肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌是醫(yī)院感染的主要致病菌，其AmpC、ESBLs酶發(fā)生率高。碳青霉烯類藥有廣譜的抗菌活性和較好的通透性，是目前治療腸桿菌科細菌感染的最有效藥物［1－2］。然而，但隨著碳青霉烯類藥的應(yīng)用，腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物的耐藥菌株陸續(xù)被分離，使臨床上抗感染治療有了很大的挑戰(zhàn)［3］。我們選取2009年9月—2010年9月我院住院患者的送檢標本進行檢測分析，探討院內(nèi)腸桿菌科細菌的感染并對碳青霉烯類藥物的耐藥性研究，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

選取2009年9月—2010年9月在我院住院病人的送檢標本600例，同一患者多次分離菌株只取1株。細菌鑒定板購自珠海黑馬生物工程有限公司，厄他培南（ETP）紙片（英國Oxoid公司）購自默沙東公司，含美羅培南（MER）藥物、MH瓊脂均購自法國生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 菌種分離及鑒定 將待檢的標本接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基中，于35℃條件下培養(yǎng)1 d，然后分離純化，按照微生物檢驗操作常規(guī)進行檢驗。

1.2.2 K－B紙片擴散法 取0.5麥氏單位菌液，將菌液按照標準的K－B法涂抹于MH瓊脂上，抑菌圈邊應(yīng)細菌生長，采用游標卡尺測量抑菌圈的直徑。在室溫下按照 M100－S19［4］放置15 min，表面干后將貼于瓊脂平板上。35℃下16 h～18 h，厄他培南1 mm參考的精密度評價標準：耐藥為抑菌圈的直徑少于14 mm；中介為抑菌圈直徑15～18 mm；敏感為抑菌圈直徑大于19 mm。

1.3 統(tǒng)計學分析

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗。若P＜0.05，則差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 菌株分布情況 在600例標本中共分離腸桿菌科菌株369株，分離率為61.5%。其中大腸埃希菌106株，占26.00%；肺炎克雷伯菌92株，占17.5%；奇異變形菌63株，占7.50%；陰溝腸桿菌45株，占7.50%；產(chǎn)氣腸桿菌35株，占5.83%；褪色沙雷菌株28株，占4.67%。

2.2 對厄他培南的藥敏性 腸桿菌科細菌對厄他培南的藥敏性見表1。大腸埃希菌（106株）、奇異變形菌（63株）、肺炎克雷伯菌（92株）、陰溝腸桿菌（45株）、產(chǎn)氣腸桿菌（35株）和褪色沙雷菌（28株）對KB法厄他培南抑菌圈直徑分別是7～36 mm、22～36 mm、7～36 mm、12～30 mm、7～33 mm和19～36 mm，平均抑菌圈直徑范圍分別為26 mm、27 mm、20 mm、26 mm、21 mm和31 mm，敏感率分別為97.17%、92.06%、57.61%、94.29%、95.56% 和92.86%。2.3 對美羅培南的藥敏性 腸桿菌科細菌對美羅培南的藥敏性見表2。106株大腸埃希菌、63株奇異變形菌、92株肺炎克雷伯菌、35株產(chǎn)氣腸桿菌、45株陰溝腸桿菌和28株褪色沙雷菌對美羅培南的敏感率分別為96.23%、90.48%、78.26%、88.57%、93.33%和89.29%。

表1 腸桿菌科細菌對厄他培南的藥敏性（株，%）

3 討論

本研究結(jié)果顯示，在600例標本中共分離腸桿菌科菌株369株，分離率為61.5%。其中大腸埃希菌106株，占26.00%；肺炎克雷伯菌92株，占17.5%；奇異變形菌63株，占7.50%；陰溝腸桿菌45株，占7.50%；產(chǎn)氣腸桿菌35株，占5.83%；褪色沙雷菌株28株，占4.67%。106株大腸埃希菌、63株奇異變形菌、92株肺炎克雷伯菌、35株產(chǎn)氣腸桿菌、45株陰溝腸桿菌和28株褪色沙雷菌對厄他培南的敏感率分別為97.17%、90.48%、57.61%、94.29%、95.56%和92.86%；對美羅培南的敏感率分別 為 96.23%、96.83%、78.26%、88.57%、93.33%和89.29%。碳青霉烯類抗菌藥有較強的抗菌作用，廣泛抗菌譜及對β－內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定性高，其對肺炎克雷伯菌、產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌有高度抗菌作用［5－7］。本文常見的腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物敏感性大于57%，除肺炎克雷伯菌外，其他細菌對厄他培南耐藥性均超過92%。厄他培南是一種新型的廣譜碳青霉烯類抗菌藥物（由美國默沙東公司最新研發(fā)），聯(lián)合青霉素結(jié)合蛋白抑制細菌細胞壁升成，阻滯細菌增長［8，9］。目前已廣泛使用自動化藥敏檢驗系統(tǒng)，但藥敏板條大多無厄他培南，阻礙了產(chǎn)KPC酶菌株的及時發(fā)現(xiàn)與控制。所以，應(yīng)采用不同方法檢測腸桿菌科細菌對厄他培南的耐藥性。

表2 腸桿菌科細菌對美羅培南的藥敏性（株，%）

在臨床上，革蘭陰性腸桿菌科細菌是感染的主要病原菌，大腸埃希菌、奇異變形菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌及褪色沙雷菌為感染流行細菌，應(yīng)加強阻滯該菌株的感染。

產(chǎn)KPC酶菌選擇的重點內(nèi)容為測定腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥性，而藥敏方法測定KPC酶介導的碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥性差異較大，明顯是產(chǎn)酶菌接種效應(yīng)［10］，且菌量也不同。本文腸桿菌科細菌中的產(chǎn)氣腸桿菌、奇異變形菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、褪色沙雷菌對厄他培南的耐藥率分別為1.89%、4.76%、34.78%、0%、4.44%、0%；美羅培南的耐藥率分別為 3.77%、4.76%、19.57%、8.57%、6.67%、10.71%。說明除肺炎克雷伯菌外，腸桿菌科細菌對厄他培南的敏感性均高于美羅培南，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。若腸桿菌科細菌出現(xiàn)對厄他培南耐藥、中介，則對美羅培南耐藥。

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