新生兒高膽紅素血癥血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶檢測臨床意義分析

金曉秋，曲書強(qiáng)

（1.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 兒科，黑龍江 齊齊哈爾 161006；2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院 兒科）

高膽紅素血癥是新生兒時(shí)期最常見疾病之一，其發(fā)病率占住院新生兒首位，達(dá)30%－50%［1］。膽紅素腦病是其嚴(yán)重的并發(fā)癥，病死率很高，幸存者約75%－90%患有嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥［2］。積極防治膽紅素腦病是非常重要的，因此早期診斷尤為重要。本研究對36名健康新生兒和96名本院新生兒室收治的高膽紅素血癥患兒進(jìn)行血清NSE、γ－GGT檢測及BAEP檢測，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2010年10月至12月本院新生兒室收治的新生兒高膽紅素血癥患兒作為觀察組，男44例，女52例。選取2008年3月至2009年12月在我院產(chǎn)科出生的健康足月新生兒36例，男20例，女16例。兩組間性別、體重及胎齡均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。觀察組入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）足月適于胎齡兒，日齡為生后3－7天；（2）以未結(jié)合膽紅素升高為主（3）存在肉眼可見的皮膚粘膜黃染；（4）出生否認(rèn)窒息及新生兒缺氧缺血性腦病、顱內(nèi)出血或神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀；（5）否認(rèn)家族聽力障礙史及圍生期耳毒性藥物使用史；（6）無嚴(yán)重全身性感染；（7）無宮內(nèi)STORCH（梅毒螺旋體、弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、皰疹病毒及其他）感染史；（8）無嚴(yán)重心、肺疾病，先天畸形及遺傳代謝性疾病。按血清膽紅素水平依據(jù) Maisels所提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］分三組，即輕度升高組血清膽紅素（TB）＞205.2μmol／L，≤256.5μmol／L；中度升高組TB＞256.5μmol／L，≤342μmol／L；重度升高組TB＞342μmol／L。

1.2 方法 高膽紅素血癥患兒生后3－7天期間靜脈采血檢測血清NSE和TB、γ－GGT。NSE檢測應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法，采用鄭州安圖lucy2型化學(xué)發(fā)光儀檢測，試劑盒由北京福瑞生物工程公司提供；TB檢測應(yīng)用釩酸氧化法，采用日立7060全自動(dòng)生化分析儀檢測，試劑盒由北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司提供。于采血檢測血清NSE和TB、γ－GGT的8小時(shí)內(nèi)檢測腦干聽覺誘發(fā)電位，采用日本光電5504型肌電誘發(fā)電位儀在環(huán)境安靜的屏蔽室進(jìn)行。患兒用10%水合氯醛0.3－0.5 ml／kg口服，待熟睡后檢測。記錄電極置國際10－20系統(tǒng)的A1A2，參考電極置Cz。電極阻抗＜5 kΩ，接地電極置于前臂，帶通濾波100 Hz－3 k Hz，靈敏度50μV／Div。雙耳通過耳罩給予極性疏波刺激，刺激頻率為10 Hz，刺激強(qiáng)度75 d B（n HL），疊加400次，分析時(shí)間為10 ms。測試中首先進(jìn)行BAEP聽閾檢測，刺激強(qiáng)度由低到高，將剛好使Ⅴ波出現(xiàn)的最低強(qiáng)度定為聽閾閾值。聽反應(yīng)閾正常者繼續(xù)完成各項(xiàng)BAEP檢查。每耳測試兩輪，以求較好的重復(fù)性，對無反應(yīng)者可加大刺激強(qiáng)度，最高100 dB，以記錄最佳BAEP波形。BAEP異常的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］為符合以下任一項(xiàng)者為異常：（1）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ潛伏期與波間期大于對照組X＋2.5 s；（2）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波一波缺失；（3）Ⅲ－Ⅴ／Ⅰ－Ⅴ＞1；（4）兩耳間潛伏期或（和）峰間期之差＞0.4 ms。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS11.5軟件包，對結(jié)果進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，正態(tài)性數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。呈正態(tài)分布方差不齊的兩組數(shù)據(jù)采用t’檢驗(yàn)，方差齊的采用t檢驗(yàn)。多組間比較采用方差分析和q檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料的比較，采用χ2檢驗(yàn)。兩因素間的相關(guān)性采用直線相關(guān)與回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血清膽紅素水平下的血清NSE、γ－GGT的比較 血清NSE水平在膽紅素重度升高、中度升高、輕度升高組均增高，與對照組之間差異有顯著性；血清γ－GGT升高在輕度升高組與對照組、重度升高組與中度升高組之間差異有顯著性，但在輕度升高組與中度升高組之間差異無顯著性，見表1。

2.2 觀察組血清NSE水平與血清γ－GGT、BAEP異常率相關(guān)性分析 觀察組中血清NSE與γ－GGT呈正相關(guān)（r＝0.734，P＜0.01）；γ－GGT與BAEP異常率呈正相關(guān)（r＝0.812，P＜0.01）；NSE與BAEP異常率呈較弱正相關(guān)（r＝0.287，P＜0.05）。

2.3 BAEP異常情況 重度升高組BAEP異常者均為各波潛伏期和波間隙延長且閾值增高超過100 dB，異常19例；中度升高組與輕度升高組BAEP異常者均表現(xiàn)為各波潛伏期或波間隙延長以及閾值輕度增高，中度升高組20例，輕度升高組25例；對照組BAEP異常者多表現(xiàn)為各波潛伏期或波間隙輕度延長，異常13例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，重度升高組與中度升高組間、輕度升高組與對照組間的BAEP異常率、異常程度差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而中度升高組與輕度升高組間的BAEP異常率、異常程度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 不同血清膽紅素水平下的血清NSE、γ－GGT的比較

3 討論

當(dāng)前人們對膽紅素的研究認(rèn)識到，輕度升高的未結(jié)合膽紅素就具有神經(jīng)毒性作用；血腦屏障、細(xì)胞膜可能以轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白主動(dòng)攝取和外泵膽紅素的方式影響及對抗其神經(jīng)毒性；膽紅素不僅能促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞凋亡壞死，還能在較低濃度影響神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞的興奮性以及干擾神經(jīng)元突觸間的信息的傳遞［5］。最近體外研究顯示，未結(jié)合膽紅素會一直抑制海馬的突觸傳遞的長時(shí)程增強(qiáng)還減少海馬切片突觸場電位的振幅，損壞幼鼠的學(xué)習(xí)記憶能力［6］。另不同種族和地域、不同胎齡和出生體重的新生兒發(fā)生急性膽紅素腦病的血清膽紅素水平不同，國內(nèi)外學(xué)者均提出根據(jù)不同胎齡、體重、日齡和高危因素應(yīng)有不同的干預(yù)指征［7，8］。目前關(guān)于新生兒急性膽紅素腦病早期診斷的研究已經(jīng)積累了很多經(jīng)驗(yàn)，但研究的指標(biāo)很多，均缺乏敏感性和特異性，仍很難早期臨床診斷和評估預(yù)后。

NSE理化性質(zhì)穩(wěn)定，外界環(huán)境對其影響不大，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，只特異地存在于神經(jīng)元細(xì)胞胞漿中［9］。當(dāng)腦損傷等因素影響了神經(jīng)元細(xì)胞的代謝變化，神經(jīng)元細(xì)胞膜功能和結(jié)構(gòu)受損時(shí)，NSE從胞質(zhì)釋放至細(xì)胞間隙和腦脊液中，穿過破損的血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)，使血清中NSE含量升高。國內(nèi)多項(xiàng)研究均表明NSE可以作為新生兒腦損傷早期生化標(biāo)記物，早期診斷腦損傷敏感度和特異度高。對于檢測正常的患兒，免于行顱腦影像學(xué)檢查，減少不必要的放射性損傷和經(jīng)濟(jì)消耗［10］。而BAEP是一種簡單易行、無創(chuàng)、敏感的腦功能檢測方法，已成為早期發(fā)現(xiàn)和客觀評價(jià)腦干病變和聽力異常的可靠工具，特別是對亞臨床型神經(jīng)系統(tǒng)疾病和聽力損害的早期診斷有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。γ－GGT分布在人體多種組織，包括腎、胰、肝、脾、心、腦及生精管等多種組織細(xì)胞膜上［11］。血清γ－GGT在人體主要功能是參與γ－谷氨酸循環(huán)，與氨基酸通過細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)及調(diào)節(jié)谷胱甘肽水平有關(guān)。還原型谷胱甘肽能穩(wěn)定細(xì)胞膜免受有毒物質(zhì)損害，而當(dāng)包括血腦屏障及神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞膜穩(wěn)定性受破壞時(shí)，未結(jié)合膽紅素更易透過血腦屏障對神經(jīng)細(xì)胞造成損害，血清γ－GGT水平升高提示機(jī)體可能正在發(fā)生上述變化。

本研究對不同膽紅素水平的患兒行血清NSE、γ－GGT及BAEP檢測，結(jié)果顯示血清NSE在輕度升高組、中度升高組及重度升高組均升高，明顯高于對照組，與對照組間差異有顯著性，證實(shí)不同程度升高的未結(jié)合膽紅素均具有神經(jīng)毒性作用。而BAEP與血清γ－GGT檢測結(jié)果均顯示在輕度升高組與對照組、重度升高組與中度升高組之間差異有顯著性，但在輕度升高組與中度升高組之間差異無顯著性。與血清NSE檢測比較，后者敏感性及特異性高，從而血清NSE作為早期診斷新生兒膽紅素腦病是更合理的。而且發(fā)現(xiàn)血清NSE與γ－GGT水平呈正相關(guān)，可提示一些未開展血清NSE檢測的基層醫(yī)院，可以把血清γ－GGT作為新生兒膽紅素腦病早期診斷和干預(yù)的一個(gè)參考指標(biāo)。

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