河南及重慶、安徽部分地區(qū)山羊球蟲感染情況與種類調(diào)查

衛(wèi)九健 ，張曉東，張子軍，菅復(fù)春，齊 萌，張菲菲，呂亞莉，丁建平，張文靜，王改蘭，寧長(zhǎng)申

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002；2.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院；3.河南省新密市畜牧局）

山羊球蟲病是由寄生于山羊腸道上皮細(xì)胞內(nèi)的艾美耳屬球蟲引起的一種原蟲病，臨床上常表現(xiàn)為腹瀉、消瘦、貧血、生長(zhǎng)發(fā)育受阻和生產(chǎn)性能下降，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡，羔羊發(fā)病率和死亡率較高，給養(yǎng)殖業(yè)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失［1-2］。為更好地防治山羊球蟲病，促進(jìn)養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展，筆者于2011年1月至2012年2月對(duì)河南省的8個(gè)地區(qū)、重慶市的云陽縣和安徽省的合肥市等地區(qū)的山羊球蟲感染情況、種類及流行特點(diǎn)進(jìn)行了調(diào)查研究，以期為山羊球蟲病的防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

分別對(duì)河南省中牟、登封、魯山、確山、商城、盧氏、汝陽、新安，重慶市云陽和安徽省合肥等地共1 126只山羊逐只經(jīng)直腸采集糞便樣品，每份10～30 g，分別裝入潔凈的100 mL離心管內(nèi)，記錄羊的品種、年齡、臨床情況等，帶回實(shí)驗(yàn)室置4°C冰箱保存，待檢。選取河南中牟某羊場(chǎng)的山羊?yàn)檠芯繉?duì)象，每月定期采集糞樣，進(jìn)行為期1年的球蟲感染動(dòng)態(tài)研究。

1.2 卵囊檢查與計(jì)數(shù)

采用飽和蔗糖溶液漂浮法對(duì)糞便樣本進(jìn)行檢查，采用麥克馬斯計(jì)數(shù)法測(cè)定每克糞便中的球蟲卵囊數(shù)（OPG）。

1.3 卵囊收集與培養(yǎng)

參照劉光輝等［3］的方法進(jìn)行球蟲卵囊的收集與培養(yǎng)。

1.4 卵囊形態(tài)觀察及種類鑒定

于光學(xué)顯微鏡下觀察孢子化前后的球蟲卵囊大小、顏色、形態(tài)結(jié)構(gòu)等特征，并用Motic顯微圖像分析處理系統(tǒng)顯微照相，根據(jù)卵囊孢子化時(shí)間、孢子囊形態(tài)結(jié)構(gòu)及卵囊指數(shù)等，參照有關(guān)文獻(xiàn)［4-10］進(jìn)行球蟲蟲種鑒定。

2 結(jié)果

2.1 山羊球蟲感染情況

經(jīng)飽和蔗糖溶液漂浮法檢查，1 126份糞便樣本中1 070份發(fā)現(xiàn)有球蟲卵囊，總感染率95.03%，河南中牟、登封、魯山、確山、商城、盧氏、汝陽、新安，重慶云陽和安徽合肥等地山羊球蟲感染率分別為95.9%（614/640）、100%（47/47）、95.0%（76/80）、100%（18/18）、86.7%（13/15）、100%（9/9）、100%（17/17）、28.6%（2/7）、92.5%（197/213）和 96.3%（77/80）。

2.2 不同年齡段山羊球蟲感染情況

6月齡以下、6月齡至1歲和1歲以上山羊球蟲感染率分別為 93.3%（458/491）、97.1%（66/68） 和96.3%（546/567），最大OPG值分別為277 600、14 800和26 600，平均OPG值分別為5 282.77、3 550.71和15 07.88。6月齡以下山羊中有6只出現(xiàn)腹瀉癥狀，球蟲卵囊感染強(qiáng)度均較大，最大OPG值達(dá)277 600。

2.3 不同品種山羊球蟲感染情況

對(duì)8個(gè)品種的山羊進(jìn)行調(diào)查，奶山羊、波爾山羊、波爾雜交山羊、酉州烏羊、巫山黑山羊、安徽白山羊、渝東白山羊和魯山牛腿山羊球蟲感染率分別為28.6%（2/7）、96.0%（702/731）、94.0%（78/83）、100%（19/19）、90.0%（90/100）、96.3%（77/80）、100%（26/26）、95.0%（76/80）。

2.4 不同飼養(yǎng)方式山羊球蟲感染情況

舍飼和放牧山羊的球蟲感染率分別為95.7%（838/876）和92.8%（232/250），平均OPG值分別為3 744.35和1 028.62。

2.5 不同月份山羊球蟲感染情況

對(duì)中牟某羊場(chǎng)進(jìn)行為期1年的球蟲感染情況調(diào)查，共收集640份糞便樣本，614份為陽性，感染率95.9%，其中，1月、2月、5月、9月和11月山羊球蟲感染率均為100%，3月、4月、6月、7月、8月、10月和 12月球蟲感染率分別為 91.9%（68/74）、91.1%（51/56）、91.7%（44/48）、91.1%（51/56）、95.8%（46/48）、95.8%（46/48）和 96.9%（62/64）。最大OPG值出現(xiàn)在8月份，高達(dá)277 600，球蟲平均感染強(qiáng)度春季和夏季逐漸升高，到秋季達(dá)到高峰，冬季感染強(qiáng)度明顯降低（詳見圖1）。

圖1 不同月份球蟲感染陽性山羊糞便中卵囊平均感染強(qiáng)度

2.6 球蟲種類及各種球蟲感染率

經(jīng)飽和蔗糖溶液法檢查的1 070份陽性糞便樣品中，除部分樣品因感染強(qiáng)度小，無法進(jìn)行球蟲種類鑒定外，共收集813份陽性樣品中球蟲卵囊進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)艾美耳球蟲12種，分別為阿普艾美耳球蟲（E.apsheronica）占4.7%、阿氏艾美耳球蟲（E.arloingi）46.1%、艾麗艾美耳球蟲（E.alijevi）41.6%、斑點(diǎn)艾美耳球蟲（E.punctata）0.4%、蒼白艾美耳球蟲（E.pallida）5.4%、家山羊艾美耳球蟲（E.hirci）76.9%、柯察艾美耳球蟲（E.kocharli）7.5%、克氏艾美耳球蟲（E.christenseni）48.8%、妮氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae）5.4%、山羊艾美耳球蟲（E.caprina）3.7%、羊艾美耳球蟲（E.caprovina）3.0%和約奇艾美耳球蟲（E.jolchijevi）11.3%。詳見表1。

表1 不同調(diào)查地點(diǎn)山羊感染艾美耳球蟲種類%

2.7 山羊球蟲混合感染情況

鑒定的813份陽性糞便樣本中有640份感染兩種以上球蟲，混合感染率78.7%，最多可混合感染9種球蟲，多數(shù)為2～4種；同時(shí)感染2種、3種和4種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為30.3%、24.4%和14.4%；同時(shí)感染5種、6種、7種、8種和9種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為5.3%、2.7%、1.1%、0.5%和0.1%。

2.8 各種球蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征

2.8.1 阿普艾美耳球蟲（E.apsheronica Musaev，1970） 卵囊黃褐色，呈卵圓形，大小為 31.17（22.49～38.26）μm×24.32（17.83～28.54）μm，平均卵囊指數(shù) 1.28，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔較小，無極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，大小平均為14.11 μm×8.96 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，無斯氏體，子孢子頭尾相鄰并列于孢子囊內(nèi)，孢子化時(shí)間為72 h。見圖2-1。

2.8.2 阿氏艾美耳球蟲（E.arloingi Marotel，1905） 卵囊淡黃色，呈橢圓形或稍卵圓形，兩邊較平直，大小為33.58（22.72～37.09）μm×18.72（15.14～24.58）μm，平均卵囊指數(shù)1.79，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，鐘形極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)橢圓形，大小平均為12.26 μm×8.54 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為36h。見圖2-2。

2.8.3 艾麗艾美耳球蟲（E.alijevi Musaev，1970） 卵囊淡黃色或無色，呈球形或亞球形，大小為18.07（13.10～25.46）μm×17.83（12.42～24.76）μm，平均卵囊指數(shù) 1.01，卵囊壁兩層，表面光滑，無卵膜孔，無極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，大小平均為9.35 μm×5.48 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為132 h。見圖2-3。

2.8.4 斑點(diǎn)艾美耳球蟲（E.punctata Landers，1955） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或卵圓形，大小為32.86（22.53～38.79）μm×23.76（16.81～28.57）μm，平均卵囊指數(shù) 1.38，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔明顯，無極帽，有極粒，有卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，大小平均為 8.47 μm×3.98 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為64 h。見圖2-4。

2.8.5 蒼白艾美耳球蟲（E.pallida Christensen，1938） 卵囊黃褐色，呈長(zhǎng)橢圓形，大小為 16.83（12.30～20.02）μm×12.27（8.76～15.59）μm，平均卵囊指數(shù) 1.37，卵囊壁兩層，表面光滑，無卵膜孔，無極帽，無極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，大小平均為 8.05 μm×4.28 μm，有孢子囊殘?bào)w，無斯氏體，子孢子頭尾相鄰斜列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為72 h。見圖2-5。

2.8.6 家山羊艾美耳球蟲（E.hirci Chevalier，1966） 卵囊黃褐色，呈短橢圓形或亞球形，大小為25.39（21.82～30.05）μm×19.16（17.15～22.88）μm，平均卵囊指數(shù) 1.33，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈寬卵圓形，大小平均為11.05 μm×8.28 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有較小的斯氏體，子孢子頭尾相鄰橫列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為24 h。見圖2-6。

2.8.7 柯察艾美耳球蟲（E.kocharli Musaev，1970） 卵囊黃褐色，呈短橢圓形或亞球形，大小為24.16（18.49～27.06）μm×19.97（14.25～23.08）μm，平均卵囊指數(shù) 1.21，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔不明顯，無極帽，無極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈卵圓形，大小平均為 10.27 μm×7.36 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為72 h。見圖2-7。

2.8.8 克氏艾美耳球蟲（E.christenseni Levine,Ivens and Fritz，1966） 卵囊黃褐色，呈典型的卵圓形，大小為34.82（28.17～46.08）μm×22.59（17.18～27.60）μm，平均卵囊指數(shù)1.54，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈卵圓形，大小平均為12.46 μm×8.63 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為120 h。見圖 2－8。

2.8.9 妮氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae Yakimoff and Rastegaieff，1930） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或亞球形，大小為 24.71（18.37～27.96）μm×19.87（14.14～23.66）μm，平均卵囊指數(shù)1.24，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔不明顯，無極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈卵圓形，大小平均為14.18 μm×7.53 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，兩個(gè)子孢子頭尾相對(duì)，沿孢子囊長(zhǎng)軸兩邊并列，孢子化時(shí)間為57 h。見圖2－9。

圖2 山羊12種孢子化艾美耳球蟲卵囊圖

2.8.10 山羊艾美耳球蟲（E.caprina Lima,1979） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或卵圓形，大小為 30.74（25.68～39.96）μm×23.66（18.36～27.64）μm，平均卵囊指數(shù) 1.30，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔較寬且明顯，無極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，大小平均為13.35 μm×7.61 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為72 h。見圖2－10。

2.8.11 羊艾美耳球蟲（E.caprovina Lima，1980） 卵囊黃褐色，呈寬橢圓形或亞球形，大小為30.17（23.82～36.07）μm×24.77（18.28～27.22）μm，平均卵囊指數(shù) 1.22，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，無極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈卵圓形，大小平均為 12.79 μm×7.52 μm，有孢子囊殘?bào)w，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為72 h。見圖2－11。

2.8.12 約奇艾美耳球蟲（E.jolchijevi Musaev，1970） 黃褐色，卵囊呈壺狀或罐狀，上寬下窄，大小為33.81（25.76～36.26）μm×24.75（20.30～27.49）μm，平均卵囊指數(shù)1.37，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘?bào)w，孢子囊呈卵圓形，大小平均為10.31 μm×6.63 μm，孢子囊殘?bào)w呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時(shí)間為120 h。見圖2－12。

3 討論

3.1 山羊球蟲感染普遍，嚴(yán)重感染導(dǎo)致發(fā)病

山羊球蟲病呈世界性分布，其球蟲命名較混亂，目前較公認(rèn)的寄生于山羊的球蟲有13種，本調(diào)查主要參考汪明的報(bào)道［4－5］進(jìn)行蟲種鑒定。陶立等［6］報(bào)道廣西圈養(yǎng)山羊球蟲的平均感染率86.68%，鑒定出10種球蟲，優(yōu)勢(shì)蟲種為阿氏、艾麗和雅氏艾美耳球蟲；鮑鳴等［7］報(bào)道安徽鳳臺(tái)縣山羊球蟲感染率94.64%，鑒定出10種艾美耳球蟲，優(yōu)勢(shì)種為雅氏、阿氏、浮氏和小型艾美耳球蟲；張玲等［8］調(diào)查發(fā)現(xiàn)洛陽周邊地區(qū)山羊球蟲平均感染率36.45%；本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)山羊球蟲總感染率95.0%，鑒定出12種艾美耳球蟲，主要感染蟲種為阿氏、艾麗、家山羊和克氏艾美耳球蟲，不同地區(qū)間山羊球蟲感染存在差異，除河南新安山羊球蟲感染率較低外，其他調(diào)查點(diǎn)山羊球蟲感染率均較高。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，6只山羊出現(xiàn)腹瀉和消瘦等癥狀，OPG值高達(dá)277 600，表明球蟲的嚴(yán)重感染是引起山羊發(fā)病和影響?zhàn)B羊效益的重要原因之一，雖然多數(shù)羊感染球蟲后無明顯臨床癥狀而呈隱性感染狀態(tài)，但其是重要的傳染源。調(diào)查發(fā)現(xiàn)山羊球蟲混合感染率為78.7%，與文獻(xiàn)報(bào)道［7］比較一致，表明山羊球蟲混合感染較普遍，在防治中應(yīng)引起重視。

3.2 不同年齡段球蟲感染強(qiáng)度存在差異；感染無明顯季節(jié)性，但秋季感染強(qiáng)度最大

張玲等［8］報(bào)道6個(gè)月以內(nèi)、6～12月齡和1歲以上的山羊球蟲感染率分別為45.26%、35.00%和20.83%，隨年齡增長(zhǎng)呈遞減趨勢(shì)；李培英等［9］報(bào)道合肥地區(qū)0～3月齡山羊球蟲感染率達(dá)100%；廣西地區(qū)圈養(yǎng)山羊以6～12月齡羊球蟲感染率最高，為97.93%，6個(gè)月以內(nèi)和1年以上的山羊球蟲感染率分別為89.39%和74.49%，山羊球蟲的感染強(qiáng)度隨年齡的增長(zhǎng)而降低，6月齡以下羊感染強(qiáng)度最大［6］。本次采用飽和蔗糖溶液漂浮法對(duì)糞樣進(jìn)行檢查，各年齡段山羊球蟲感染率均較高，無顯著差異，可能與舍飼條件下環(huán)境污染、羊易于接觸球蟲感染等有關(guān)；但6月齡以下羊球蟲感染強(qiáng)度大，最大OPG值為277 600，平均OPG值為5 282.77，明顯高于6月齡以上羊，與上述報(bào)道相一致。球蟲感染多流行于溫暖濕潤(rùn)的季節(jié)。此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，各月份山羊球蟲感染率均在91.1%～100%之間，可能與舍飼條件下，圈舍糞尿混積，常年潮濕，冬季保暖措施較好，給球蟲傳播創(chuàng)造了有利條件有關(guān)，加之成年羊作為帶蟲者，糞便中排出的卵囊長(zhǎng)期污染圈舍環(huán)境，故未表現(xiàn)明顯的季節(jié)性，但8月份山羊球蟲感染強(qiáng)度最大，可能與夏季環(huán)境濕潤(rùn)，便于球蟲卵囊發(fā)育到感染階段而大量感染有關(guān)，在該季節(jié)應(yīng)加強(qiáng)羊球蟲病的防治。

3.3 山羊球蟲感染無明顯種間差異，舍飼山羊感染強(qiáng)度高于放牧山羊

國(guó)內(nèi)外大量調(diào)查研究顯示，不同品種山羊?qū)η蛳x均易感。肖明等［10］報(bào)道柴達(dá)木絨山羊球蟲檢出率70.49%。本次調(diào)查的8個(gè)品種山羊，除奶山羊感染率28.6%外（本次調(diào)查數(shù)量較小，有待進(jìn)一步研究），其他7個(gè)品種山羊的感染率均在90%以上，表明山羊感染球蟲無品種間差異。

李培英等［9］調(diào)查發(fā)現(xiàn)舍飼羊群球蟲感染率明顯高于放牧羊群，舍飼山羊球蟲感染強(qiáng)度遠(yuǎn)高于放牧山羊。本次調(diào)查結(jié)果顯示，舍飼山羊球蟲感染率與放牧山羊無明顯差異，舍飼山羊的感染強(qiáng)度高于放牧山羊，與上述報(bào)道相符。主要是因?yàn)樯犸曆蛉夯顒?dòng)范圍小，飼養(yǎng)密度大，較為擁擠，環(huán)境潮濕，卵囊不宜暴露在日光照射等條件下，有利于球蟲的傳播和感染。

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