淋巴細胞注射治療習慣性流產(chǎn)的探討

陳藹仙

（廣州女子醫(yī)院，廣東 廣州 510370）

對于習慣性的流產(chǎn)，特別是不明原因的流產(chǎn)，至今仍是世界婦產(chǎn)科上的一個難題。當前，在我國國內不明原因習慣性流產(chǎn)患者主要還是以常規(guī)的保胎或者安胎為主，但療效結果卻并不都如人意。隨著醫(yī)學的不斷發(fā)展，很多的醫(yī)院已經(jīng)開始在嘗試使用免疫治療方法來治療不明原因的流產(chǎn)或者習慣性的流產(chǎn)。隨著該技術的不斷成熟與完善，相信該技術會被廣泛應用于臨床醫(yī)學上[1]。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

所有患者均為連續(xù)流產(chǎn)3次以上，夫妻雙方的身體狀況正常，年齡段為23～35歲，平均年齡為27歲，流產(chǎn)時的孕期為6到11周。46例患者經(jīng)進行各項相關的檢查后，得出其中有21例患者曾有過1～2次的人工流產(chǎn)。對這些患者進行隨機的分組，一組為25例，進行淋巴細胞注射的免疫治療，另外的一組為21例，單純使用靜脈丙種球蛋白治療，作為對照。

1.2 治療方法

1.2.1 了解患者的情況

了解患者的月經(jīng)規(guī)律、內分泌、生育史、過去病史、家族病史以及配偶等相關情況。

1.2.2 對患者進行常規(guī)性檢查

宮腔鏡檢查，盆腔B超，夫妻染色體檢查，性激素系列檢查：孕酮（P），雌二醇（E2），黃體生成素（LH），促卵泡生成素（FSH），催乳素（PRL），睪酮（T），陰道分泌物涂片，丈夫精液等，以明確習慣性流產(chǎn)原因，對癥下藥。

1.2.3 主動免疫治療的操作方法

具體操作方法為：①抽取丈夫的空腹靜脈血28mL，使用肝素進行抗凝。②拿6個無菌的平底刻度試管，將每個試管內裝入淋巴細胞分離液5mL。③將已經(jīng)稀釋好的靜脈血進行搖勻，然后分別裝入原先準備好的6個含有淋巴細胞分離液的試管中內，每管約5mL靜脈血，使靜脈血沿著試管壁慢慢流入，要讓靜脈血與分離液形成分明的界限，不能將兩者搖勻。④然后，馬上2500r/min轉速離心20min，離心管內的液體被分成四層，從上而下分別是血漿層、淋巴細胞層、淋巴細胞分離液層、紅細胞和多個核細胞層。淋巴細胞層最薄位于血漿和淋巴細胞分離液之間，白色，用無菌吸管將6支離心管內淋巴細胞吸出來，加到另外2支無菌刻度離心管內。⑤將無菌鹽水加入兩個刻度離心管內至9mL，用無菌玻璃吸管反復打散吸洗，然后以2500r/min轉速離心10min，棄去上清。⑥將全部淋巴細胞用生理鹽水配成4mL懸液，分裝到4個耐低溫無菌朔料管（液氮罐保存），每個管1 mL淋巴細胞懸液，最后得出的淋巴細胞懸液大概是在（2～3）×107/mL的范圍。⑦選擇患者前臂的內側，進行皮內注射，每次注射1mL淋巴細胞懸液，分6個點注射，30min之后對局部的反應進行觀察。每隔2周就注射1次，4次作為1個療程。如果患者懷孕了，要繼續(xù)增加1到3次的加強治療；如果患者在半年內仍未懷孕，則需要再進行3次的治療[2]。

1.2.4 對照組的治療

患者在懷孕前為其注射靜脈丙種球蛋白，每一次為20g，注射4次作為1個療程，每隔2周就為其注射1次，懷孕之后要繼續(xù)注射2次。

1.2.5 對患者的心理治療

大部分的患者對主動免疫治療的認識存在不足，會產(chǎn)生一種懷疑的心理。因此，對這些患者應該進行一些解釋和說明，讓患者了解到主動免疫治療的重要性以及治療效果，同時還讓他們了解相關的注意事項，讓患者對醫(yī)生產(chǎn)生一種信任感，讓她們在治療過程中保持良好的心態(tài)，對進行的治療能予以積極的配合，對于使用主動免疫治療的患者，每一次注射之后都要對患者注射部位的紅腫情況進行觀察記錄，對持續(xù)的時間、患者自身的感覺等也要做好相關的筆記。醫(yī)護人員應該與患者建立良好的關系，讓患者主動與醫(yī)護人員交流內心感受，讓他們將內心的顧慮或者自責發(fā)泄出來，不僅對患者緩解心理壓力有很好的幫助，還有助于醫(yī)生分析患者流產(chǎn)的原因[3]。

1.3 治療效果的判斷標準

如果患者懷孕了，而且懷孕時間超過了5個月，則為治療成功；如果患者懷孕的時間在5個月就流產(chǎn)的，則為治療失敗。

2 結 果

在接受主動免疫治療的25例患者中，懷孕為21例，其中成功分娩為12例，有9例的懷孕時間超過了5個月，未懷孕的為4例，治療的成功率為84%；對照組的21例患者中，懷孕為15例，其中成功分娩為8例，有7例的懷孕時間超過5個月，懷孕時間少于5個月4例，未懷孕的為2例，治療的成功率為71.4%。觀察兩組產(chǎn)下嬰兒中，接受主動免疫治療這一組的12名嬰兒中，有9例的體質量在3.5～3.8kg的范圍，體征均正常，有2例的嬰兒由于在宮內的生長較緩慢，體質量分別為2.2kg和2.3kg。對照組的8例嬰兒中，有5例的體質量在3.1～3.6kg，有3例因在宮內生長緩慢原因體質量在2.2～2.4kg，嬰兒體征也均正常。兩組嬰兒的對比無顯著差異（P＞0.05）。

3 討 論

在本臨床研究中，尚未發(fā)現(xiàn)有患者在接受免疫治療的過程中出現(xiàn)感染或者過敏等不良現(xiàn)象。如果患者在第一次注射中皮膚出現(xiàn)嚴重的紅潤硬結，甚至還出現(xiàn)水泡的癥狀，再次妊娠一般是預后良好，由此也可以看出皮膚反應可以作為淋巴細胞注射免疫療效的一個判斷標準。對于失敗的16%的患者，分析其原因，是因為在抗心磷脂抗體（ACA）、抗精子抗體（AsAb） 以及抗子宮內膜抗體（AEA）的這3項試驗中有一項以上的陽性，患者獲得的治療效果都并不理想，再次進行妊娠的成功率就低了[4]。

隨著生殖研究學的不斷發(fā)展，眾多研究人員認為原發(fā)性習慣性自然流產(chǎn)可能因為患者對于胚胎和半同種抗原的反應性不高，沒有能力生產(chǎn)出相應的封閉抗體，進而致使胚胎受到排斥，在進行患者配偶的淋巴細胞進行免疫治療時，夫婦兩者的HLA抗原并不相容，這種胚胎攜帶的父源性HLA抗原可以刺激母體的免疫系統(tǒng)， 進而導致一類 IgG型抗體的產(chǎn)生，醫(yī)學上稱之為封閉抗體或封閉因子。封閉抗體不僅可以跟母體淋巴細胞的表面抗原進行結合，還以跟滋養(yǎng)細胞的本身相結合，這種結合可以使母體與胎兒之間的免疫識別和免疫反應被阻斷。一些患者之所以出現(xiàn)反復的自然流產(chǎn)，是因為她們缺乏封閉抗體，母體內的免疫系統(tǒng)很容易會對胚胎產(chǎn)生免疫性的抗拒，導致流產(chǎn)結果的產(chǎn)生。使用患者配偶的靜脈血進行淋巴細胞免疫的治療，能夠讓患者的CD8增生，CD4/CD8比例恢復正常狀態(tài)，誘使母體內部的T細胞受體產(chǎn)生抗夫的個別基因抗體，這種免疫功能變化可以通過封閉抗體的介導，增強母體對胚胎的保護，提高妊娠的成功率。依據(jù)免疫的原理，多次少量的異體抗原起到的刺激效果更容易產(chǎn)生保護性的抗體，并且出現(xiàn)不良反應的現(xiàn)象比大劑量的刺激要少得多。在本次臨床研究中，我們使用的就是多次少量的免疫治療方法（淋巴細胞為（2～3）×107/mL，4次作為一個療程），同時還結合對患者的心理治療，收到了顯著的治療效果[5]。

在本研究中，使用淋巴細胞注射免疫治療的成功率明顯高于單純用靜脈丙種球蛋白治療的這一組，這說明淋巴細胞注射對習慣性流產(chǎn)是具有重要的臨床意義的。在接受免疫治療后，封閉抗體就會形成并增加，母體內的免疫能力就會增強，有利于提高妊娠的成功率。使用丈夫淋巴細胞主動免疫的治療方法，母體的免疫反應會比較快，時間也短，并且沒有明顯的副作用出現(xiàn)。根據(jù)對兩組產(chǎn)下嬰兒的觀察可看出雙方并無顯著的差異（P＞0.05）。讓母體使用配偶血液分離出來的淋巴細胞進行治療，還可以減少血源性感染的危險。

關于不明原因引起的習慣性流產(chǎn)病因尚不能得到確切的解釋，一般認為絕大多數(shù)的原因都與母體內的免疫因素有關系，但是目前的一些檢查免疫項目（CD8、CD4、HLA等）都較為昂貴，并且技術水平的要求很高，增大了確診的難度。而使用淋巴細胞皮內注射治療的方法不僅簡單、方便，而從經(jīng)濟方面來講也較為實惠，能夠被大多數(shù)患者所接受。因此，筆者認為在排除原因確診是習慣性流產(chǎn)后就可以使用淋巴細胞注射免疫治療法，這樣不僅可以減少患者嘗試各種治療的痛苦，還可以為他們較少一筆醫(yī)療開支。

[1] 李東明,甘騰華,穆小堅,等.習慣性流產(chǎn)患者免疫治療前后封閉抗體的變化及其意義[J].廣西醫(yī)學,2009,38(1)：46-48.

[2] 廖丹,李鳳英,譚秋慧.淋巴細胞免疫治療反復早期自然流產(chǎn)53例[J].臨床醫(yī)學,2009,29(1)：75-76.

[3] 張瑞群.淋巴細胞免疫治療自然流產(chǎn)49例分析[J].中國實用醫(yī)藥,2010,5(15)：45-46.

[4] 汪麗蘭.淋巴細胞主動免疫聯(lián)合HCG治療復發(fā)性流產(chǎn)270例療效分析[J].醫(yī)學信息(中旬刊),2010,(12)：3531-3532.

[5] 丁克文,宋燕,劉娟,等.反復自然流產(chǎn)患者經(jīng)配偶淋巴細胞免疫治療后外周封閉抗體水平變化[J].中國免疫學雜志,2009,25(2)：157-158.