河源地區(qū)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者免疫治療的研究分析

吳燕 李漢煌 朱彩容

[摘要] 目的 研究河源地區(qū)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）患者采用淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后的臨床效果。方法 方便選取2015 年4 月—2017 年11 月在該院婦科門診或婦?？剖罩蔚?9例封閉抗體（BA）陰性的不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者進(jìn)行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療，以復(fù)查BA判斷臨床療效。結(jié)果 患者經(jīng)主動(dòng)免疫治療1個(gè)療程后，BA陽(yáng)性率為83.54%（66/79），2個(gè)療程后BA陽(yáng)性率為91.14%（72/79），與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.07、5.38，P<0.01）；免疫治療后，BA轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者中，妊娠率為59.72%（43/72），經(jīng)治療后BA仍為陰性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.07，P>0.05）；免疫治療后，BA轉(zhuǎn)陽(yáng)并已妊娠的患者中，接受孕后加強(qiáng)免疫治療為研究組，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加強(qiáng)免疫治療為對(duì)照組，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=13.36，P<0.01）。結(jié)論 淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療河源地區(qū)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者能提高BA陽(yáng)性率，及對(duì)其再次妊娠具有臨床應(yīng)用價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；不明原因；封閉抗體；免疫治療

[中圖分類號(hào)] R714 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）05（a）-0013-03

Research and Analysis of Immune Treatment of Patients with Unexplained Recurrent Abortion in Heyuan Region

WU Yan， LI Han-huang， ZHU Cai-rong

Heyuan Maternal and Infant Healthcare Hospital， Heyuan， Guangdong Province， 517000 China

[Abstract] Objective To research the clinical effect of immune treatment of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region. Methods Convenient selected 79 cases of BA negative unexplained recurrent abortion in Heyuan region for the active lymphocyte immunotherapy admitted and treated in the outpatient in the department of gynecology and department of gynecology and obstetrics from April 2015 to November 2017， and the clinical curative effect was determined by checking BA. Results After 1 treatment course of active immune therapy， the BA positive rate was 83.54%（66/79）， after 2-treatment course， the BA positive rate was 91.14%（72/79）， and the differences were highly statistically significant compared with those before treatment（χ2=12.07， 5.38， P<0.01）， after the immune therapy， the BA negative conversion patients， the pregnancy rate was 59.72%（43/72）， after the treatment， the pregnancy rate was 57.14%（4/7）， and the difference between the two groups was not statistically significant （χ2=0.07，P>0. 05）； after the immune therapy， 0f 30 cases enhancing the immune therapy after pregnancy， the gestational success rate was 90.00%（27/30） and the unsuccessful rate was 10.00%（3/30）， and of 13 cases not enhancing the immune therapy in the control group， the successful rate was 46.15%（6/13） and the unsuccessful rate was 53.85%（7/13）， and the differences were statistically significant（χ2=13.36， P<0.01）. Conclusion The active lymphocyte immunization therapy of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region can improve the BA positive rate， and it is of clinical application value to the second pregnancy.

[Key words] Recurrent abortion； Unexplained； Blocking antibody； Immune therapy

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（repetitive spontaneous abortion，RSA）是指自然流產(chǎn)次數(shù)≥2次的患者，妊娠早期為疾病高發(fā)期，是婦產(chǎn)科常見(jiàn)病，在已婚婦女占得比例大約12%[1-2]，病因復(fù)雜尚無(wú)定論。部分學(xué)者指出可與染色體異?；蛏辰馄式Y(jié)構(gòu)異常等有關(guān)。還有學(xué)者認(rèn)為，疾病可能與其他免疫系疾病、生活條件和環(huán)境及心理因素等有關(guān)[3]。還有42%～82%的其他因素尚未確認(rèn)[4-6]，現(xiàn)將原因不明的RSA稱之為不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（URSA）。近年來(lái)，隨著生殖醫(yī)學(xué)尤其是免疫學(xué)的不斷發(fā)展，生殖免疫學(xué)治療技術(shù)的提高， 發(fā)現(xiàn)許多不明原因?qū)е碌姆磸?fù)流產(chǎn)與免疫因素密切相關(guān)。文獻(xiàn)指出[7]，RSA患者的BA陽(yáng)性率極低，而研究發(fā)現(xiàn)給予患者主動(dòng)免疫治療可取得理想的臨床療效，可以有效提高患者的受孕率。臨床認(rèn)為主動(dòng)免疫治療可以以配偶或健康第三方淋巴細(xì)胞作為治療的免疫因素，達(dá)到理想的療效。目前，解決患者不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)問(wèn)題，已經(jīng)成為臨床高度重視的課題。該研究以2015 年4 月—2017 年11 月該院收治的79例河源地區(qū)BA陰性的URSA患者為例，對(duì)患者進(jìn)行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療，探討其臨床療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對(duì)象為方便選取在該院婦科門診或婦保科就診符合復(fù)發(fā)流產(chǎn)診斷的患者79例， 選取的患者均為封閉抗體陰性，平均年齡（29.04±4.10）歲，最小22歲，最大40歲，流產(chǎn)次數(shù)2～5次，平均2.25 次，治療前所有患者及家屬簽訂與治療相關(guān)的知情書，研究對(duì)象需符合以下條件： ①患者歷史流產(chǎn)次數(shù)≥2次；② 排除支、衣原體生殖道感染癥狀；③通過(guò)測(cè)定激素六項(xiàng)等排除內(nèi)分泌疾病；④患者雙方染色體核型無(wú)異常；⑤無(wú)生殖器畸形及其他先天性免疫系統(tǒng)病變等；⑥女方自身免疫性抗體檢查無(wú)異常[8]。

1.2 方法

1.2.1 封閉抗體（BA）檢測(cè) 檢測(cè)方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），采用美國(guó)OneLambda公司生產(chǎn)[4]的試劑盒。抽取患者外周血2～3 mL，3 000 r/min離心分離出血清備用，按說(shuō)明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療方法 抽取丈夫或第三者（需排除血清HIV、梅毒、甲肝、丙肝、乙肝等傳染病）外周血15～20 mL（肝素抗凝），淋巴細(xì)胞提取過(guò)程必須在無(wú)菌條件下操作，為保證提取質(zhì)量，對(duì)提取后的細(xì)胞使用生理鹽水反復(fù)沖洗3次，調(diào)至細(xì)胞懸液量1.8 mL，采用皮內(nèi)多點(diǎn)注射方法，在患者上臂內(nèi)側(cè)注射六個(gè)點(diǎn)，左右各3個(gè)點(diǎn)，每周進(jìn)行免疫治療一次，每個(gè)療程4次，孕前每次間隔3周，1個(gè)療程完成后2周復(fù)查BA，如果BA轉(zhuǎn)陽(yáng)，需在半年內(nèi)盡早懷孕，否則需進(jìn)行加強(qiáng)治療，間隔4～6周，直到成功受孕，懷孕后繼續(xù)每2周1次，直至14周左右；仍為陰性患者則進(jìn)行第2個(gè)療程，隨后復(fù)查[9]。

1.2.3 觀察指標(biāo) 患者經(jīng)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后，分析BA轉(zhuǎn)陽(yáng)率、再次妊娠流產(chǎn)情況等，經(jīng)治療后超聲檢查提示妊娠維持至14 周以上即判為妊娠成功。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，該次實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫治療后BA變化

接受免疫治療且BA均為陰性的79例URSA患者，經(jīng)治療1個(gè)療程后，BA轉(zhuǎn)陽(yáng)率為83.54%（66/79），經(jīng)2個(gè)療程治療后BA陽(yáng)性率為91.14%（72/79），與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.07、5.38，P<0.01）。見(jiàn)表1。

2.2 免疫治療對(duì)URSA患者懷孕機(jī)會(huì)的影響

免疫治療后，BA轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者中，妊娠率為59.72%（43/72），經(jīng)治療后BA仍為陰性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.07，P>0.05）。

2.3 免疫治療后的臨床研究分析

經(jīng)治療后BA轉(zhuǎn)為陽(yáng)性并已懷孕的患者中，接受孕后加強(qiáng)免疫治療為研究組，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加強(qiáng)免疫治療為對(duì)照組，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），兩組比較差異有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=13.36，P<0.01）。見(jiàn)表2。

3 討論

隨著科技的發(fā)展， 生活水平的提高， 妊娠生育越來(lái)越受到大家的關(guān)注， 妊娠期流產(chǎn)是不可忽視的問(wèn)題， 其中復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)病率約為4%， 這類疾病超過(guò)一半的發(fā)病機(jī)制與免疫因素有關(guān)[10-11]?，F(xiàn)代生殖免疫學(xué)認(rèn)為，妊娠的過(guò)程類似于半同種移植[12]，宮內(nèi)胚胎移植物的正常維持，既需要母體自身正常免疫功能，又需要其他免疫調(diào)節(jié)的協(xié)同作用，如封閉抗體（BA）特異性的封閉效應(yīng)。適齡生育婦女體內(nèi)都存在一定水平的BA， 妊娠時(shí)來(lái)自父母雙方的白細(xì)胞抗原（HLA） 相互排斥， 父源性HLA 抗原屬于外來(lái)物，促進(jìn)母體免疫系統(tǒng)發(fā)生應(yīng)答，促進(jìn)封閉因子釋放；因子與人體的滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)合，或與淋巴細(xì)胞表面的抗原結(jié)合，進(jìn)而截?cái)嗔四概c子之間的免疫識(shí)別及免疫反應(yīng)[13-14]，減少免疫排斥反應(yīng)， 這樣能增加胚胎的成活率， 降低流產(chǎn)概率。關(guān)于RSA的很多研究提出，RSA的發(fā)生率與母體BA水平存在直接關(guān)聯(lián)，且BA水平與流產(chǎn)次數(shù)相關(guān)，流產(chǎn)次數(shù)越多，人體內(nèi)的BA水平就越低[15]。

河源地區(qū)免疫治療的79 例URSA患者中，治療前均為陰性，經(jīng)一兩個(gè)療程治療后，BA陽(yáng)性率分別為83.54%、91.14%，與治療前比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)果提示淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療對(duì)提高患者體內(nèi)BA水平有積極作用。這一研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)相關(guān)學(xué)者研究相一致[16]，其2個(gè)療程治療后BA陽(yáng)性率89.63%，與該次研究結(jié)果相近；經(jīng)治療后BA成功轉(zhuǎn)為陽(yáng)性的72例患者中，懷孕率為59.72%；經(jīng)治療后BA仍為陰性的7例患者中，懷孕率57.14%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），反應(yīng)出BA陽(yáng)性與否對(duì)河源地區(qū)URSA患者懷孕的機(jī)會(huì)并無(wú)太大影響。經(jīng)治療后BA轉(zhuǎn)為陽(yáng)性并已懷孕的患者中，接受孕后加強(qiáng)免疫治療設(shè)為研究組，共30例，其中27例妊娠成功，3例再次結(jié)局不良，成功妊娠率為90.00%；未接受孕后加強(qiáng)免疫治療設(shè)為對(duì)照組，共13例，其中妊娠成功6例，7例再次結(jié)局不良，成功妊娠率為46.15%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明河源地區(qū)URSA患者經(jīng)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療BA轉(zhuǎn)陽(yáng)后，再次妊娠后須做加強(qiáng)治療，增加母體內(nèi)BA，形成免疫耐受，從而保護(hù)胎兒，因此顯著提高了再次妊娠成功率。

綜上所述， 在河源地區(qū)，對(duì)于BA陰性不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者，應(yīng)及時(shí)利用丈夫或第三者血清中淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法治療， 提高BA陽(yáng)性率，并在其再次妊娠后需積極進(jìn)行加強(qiáng)治療，有效提高再次妊娠成功率。因此，淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療法簡(jiǎn)單易行，可有效提高河源地區(qū)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的成功受孕率，具有積極的推廣價(jià)值，且治療周期短、免疫反應(yīng)強(qiáng)、減少經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)且患者容易接受，可以在臨床上長(zhǎng)期發(fā)展。對(duì)于經(jīng)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后BA仍為陰性或轉(zhuǎn)陽(yáng)后受孕率未見(jiàn)顯著提高，但孕后繼續(xù)進(jìn)行免疫治療的成功分娩的概率明顯提高。如存在其他未知原因，需要繼續(xù)進(jìn)行更深入的研究分析。

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（收稿日期：2018-02-06）