高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教學(xué)的思考

閆東梅 韓 笑 劉起會 李 鵬 朱 迅 (吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院，長春130021)

高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在碩士研究生選修課中占有重要地位，選修率達(dá)到80%以上。盡管如此，仍有很大部分學(xué)生并不明確選修免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的意義及重要性，在學(xué)習(xí)過程中找不到感覺。此外，由于在本科生階段免疫學(xué)課程大多安排為大學(xué)二年級，距研究生課程已3年有余，學(xué)生對于免疫學(xué)內(nèi)容的掌握也是參差不齊［1］，能夠敘述出免疫器官、免疫細(xì)胞以及大致的免疫應(yīng)答過程的人數(shù)還不到50%，其他學(xué)生對免疫學(xué)的了解更有限，即使選修了免疫學(xué)這門課程，也缺乏學(xué)習(xí)的主動性，這使得課程效果往往并不理想。因此，根據(jù)研究生對免疫學(xué)技術(shù)的了解程度制定相應(yīng)的講授計(jì)劃，選擇適當(dāng)?shù)慕虒W(xué)方法，同時充分激發(fā)學(xué)生對免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的興趣，循序漸進(jìn)，最終使研究生能夠游刃有余地運(yùn)用免疫學(xué)理論及技術(shù)到各自的科研活動中去，是高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)課程應(yīng)達(dá)到的基本要求。

1 課程設(shè)置及內(nèi)容

該門課程總學(xué)時40學(xué)時，授課時間為1周。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容涵蓋了抗原抗體反應(yīng)以及免疫功能檢測，包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、雙向免疫擴(kuò)散、補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)以及巨噬細(xì)胞吞噬功能測定等，這些實(shí)驗(yàn)內(nèi)容在免疫學(xué)科的應(yīng)用中較為廣泛，因此具有一定的代表性?？己朔绞綖槔盟鶎W(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行與本專業(yè)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

2 教學(xué)思路的探索

2.1激發(fā)研究生學(xué)習(xí)免疫學(xué)技術(shù)的興趣 在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中，以免疫學(xué)理論為基礎(chǔ)的檢測技術(shù)在研究論文中常見，如對某種蛋白進(jìn)行定性、定量、定位分析可以使用免疫印跡(Western blot)、ELISA、免疫組織化學(xué)染色技術(shù)等，檢測細(xì)胞可以采用流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光等技術(shù)，而它們的基本原理都是利用免疫學(xué)中的抗原抗體反應(yīng)。因此，讓學(xué)生了解免疫學(xué)技術(shù)的重要性并激發(fā)學(xué)生的科研興趣是本門課程的首要任務(wù)。

在第一節(jié)課時，可以給學(xué)生展示幾篇高水平的學(xué)術(shù)文章，列舉文章中相關(guān)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的運(yùn)用對獲得突破性研究成果的重要意義，讓學(xué)生了解高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用的廣泛性和重要性。與此同時，融入免疫學(xué)前沿進(jìn)展以及免疫科學(xué)家所獲得的成就來激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，并初步了解科研的過程。

2.2以科研實(shí)際為切入點(diǎn)，穿插理論教學(xué) 對研究生的培養(yǎng)一方面要注重知識面的擴(kuò)展，另一方面要訓(xùn)練學(xué)生們的科研能力，以使他們更好地完成科研工作，這就要求在教學(xué)中使理論與應(yīng)用的有機(jī)結(jié)合。那么怎樣才能把免疫學(xué)的理論與免疫學(xué)技術(shù)很好的結(jié)合并使學(xué)生運(yùn)用自如呢?

圖1 根據(jù)生命中心法則衍生物質(zhì)檢測的兩大層次Fig．1 Two detection level derived from central dogma

首先，融入生命科學(xué)的基本理論：生命科學(xué)的研究離不開生命的中心法則，那么可以通過對該法則的講解，將學(xué)生引領(lǐng)到科學(xué)研究中。如圖1公式所示，任何一種蛋白物質(zhì)都要經(jīng)歷從DNA到RNA再到蛋白這樣的過程，而這一過程包括兩個層次，其一是基因水平，其二是蛋白水平。如果要對某種物質(zhì)進(jìn)行定量或定性檢測，即可以在基因水平利用分子生物學(xué)技術(shù)如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測，也可以在蛋白水平利用免疫學(xué)技術(shù)檢測。通過這樣的講解學(xué)生們就會明白生命科學(xué)的科研工作離不開免疫學(xué)和分子生物學(xué)這兩門學(xué)科，并了解這兩門學(xué)科的內(nèi)在關(guān)聯(lián)以及對于科研的重要性，初步掌握科研思路。

其次，強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的基本原理：免疫學(xué)檢測技術(shù)中如ELISA、免疫組化、免疫印跡等實(shí)驗(yàn)用到免疫標(biāo)記技術(shù)，其中涉及到抗體的選擇和應(yīng)用，那么掌握多克隆抗體/單克隆抗體、一級抗體/二級抗體這兩對概念對于運(yùn)用免疫學(xué)檢測技術(shù)是至關(guān)重要的。所以在實(shí)驗(yàn)課教學(xué)過程中要不斷地強(qiáng)化這兩對概念，讓學(xué)生們掌握它們的區(qū)別，學(xué)會在以后的科研中根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x用更適合的抗體。

最后，鞏固相關(guān)學(xué)科的基礎(chǔ)知識：目前的科學(xué)研究基本以多學(xué)科交叉方式進(jìn)行，這就要求研究者要有豐富的知識儲備。而免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中所涉及到的其他學(xué)科內(nèi)容，包括細(xì)胞增殖、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、蛋白質(zhì)特征、基因合成等，在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中可以通過影像、圖片等方式，將相關(guān)內(nèi)容結(jié)合起來，以鞏固研究生的科研基礎(chǔ)知識。因此，在實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)施階段，利用任何可以復(fù)習(xí)交叉學(xué)科知識點(diǎn)的機(jī)會，注重研究生的基礎(chǔ)知識積累，加強(qiáng)應(yīng)用，使他們更快的適應(yīng)科研需求，大膽創(chuàng)新發(fā)展。

2.3將能力培養(yǎng)融入到教學(xué)過程中 首先，訓(xùn)練學(xué)生的分析能力：高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)授課的目的是通過幾個實(shí)驗(yàn)的講解和實(shí)際操作，初步培養(yǎng)研究生的科研能力。那么怎樣才能訓(xùn)練他們在科研工作中分析問題、解決問題的能力呢?

課堂討論的方式可以實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，實(shí)驗(yàn)中會設(shè)置陰性對照和空白對照，那么在樣品孵育過程中，可以與學(xué)生一起討論設(shè)置對照的重要性，如果出現(xiàn)了假陽性反應(yīng)，如何分析其原因。在觀察結(jié)果時，由于學(xué)生先前已經(jīng)對可能出現(xiàn)的問題做出了假設(shè)，因此他們就會分析自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，找出原因所在。這樣的教學(xué)方法使學(xué)生對實(shí)驗(yàn)的原理、操作以及影響因素透徹理解，在以后的科研中完全可以獨(dú)立進(jìn)行此方面的實(shí)驗(yàn)。綜上所述，課堂討論這個環(huán)節(jié)是非常必要的，一方面可以鍛煉學(xué)生分析問題和解決問題的能力;另一方面也可以潛移默化地培養(yǎng)研究生從事科研工作的信心，讓他們了解實(shí)驗(yàn)中的失敗是正常的，但要通過分析然后尋找到解決的辦法。

其次，擴(kuò)展學(xué)生的學(xué)術(shù)視野：在學(xué)生們掌握了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)這個工具的基礎(chǔ)上，用簡潔的語言來講解免疫學(xué)比較專業(yè)的內(nèi)容，使學(xué)生初步地理解免疫學(xué)的理論知識，例如免疫細(xì)胞種類與功能、細(xì)胞因子以及抗體的檢測等，以使選修高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)這門課程的學(xué)生在今后不同方向的科研工作中可以從免疫學(xué)的角度對研究的內(nèi)容進(jìn)行思考，從而在一定程度上擴(kuò)寬了學(xué)生們的科研思路，為他們在自己專業(yè)選題時提供方向。

最后，培養(yǎng)學(xué)生的科研素養(yǎng)：高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的一項(xiàng)考核內(nèi)容為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，其目的在于培養(yǎng)學(xué)生的科研思維、提高學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求是結(jié)合所學(xué)知識進(jìn)行與本專業(yè)相關(guān)的課題設(shè)計(jì)。在本課程的開始安排實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)任務(wù)，通過講解一篇典型課題申請書所包含的研究背景、研究目的、研究內(nèi)容和方法、預(yù)期結(jié)果以及創(chuàng)新性等方面，讓學(xué)生初步了解什么是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。然后學(xué)生們通過查閱文獻(xiàn)從而發(fā)現(xiàn)問題，并帶著問題學(xué)習(xí)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，這種由被動學(xué)習(xí)變?yōu)橹鲃訉W(xué)習(xí)的方式不僅提高了研究生學(xué)習(xí)的自主性，而且也激發(fā)了他們的創(chuàng)新意識。最后通過撰寫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)從而使學(xué)生系統(tǒng)歸納及總結(jié)知識的能力也得到了鍛煉。

總之，通過上述教學(xué)方法，在短短一周的時間內(nèi)，獲得了良好的教學(xué)效果;一方面使學(xué)生們明確學(xué)習(xí)高級免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的意義;另一方面，使學(xué)生較好地掌握了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的原理和方法，對于科研過程也有了一定的了解，知道如何選用更科學(xué)的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3 結(jié)語

當(dāng)前研究生的教學(xué)更注重科研能力的培養(yǎng)、創(chuàng)新思維模式的訓(xùn)練［2，3］。免疫學(xué)作為基礎(chǔ)研究與臨床研究的橋梁，在科學(xué)研究中具有重要的地位。通過對免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教學(xué)方法的創(chuàng)新和改進(jìn)，使研究生在學(xué)習(xí)這門課程中，能夠更熟練地掌握實(shí)驗(yàn)方法，更快速地提高科研能力。

1 孫 玲，施 明，石琳熙et al．碩士研究生《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》課堂教學(xué)探索［J］. 醫(yī)學(xué)教育探索，2010;9(4)：496-498.

2 翁慶萍.研究生培養(yǎng)中值得重視的兩個問題［J］.中國高等教育，2003;19(2)：70-72.

3 張昌菊.跨學(xué)科研究生培養(yǎng)模式的思考與實(shí)踐［J］.中國高等醫(yī)學(xué)教育，2007;(10)：4-5，8.